【摘要】：目的構建大鼠Lhx8全長結構基因真核表達載體。方法 PCR法擴增Lhx8全長結構基因,經EcoRI和BamHI雙酶切后連接至真核表達載體pEGFP-C3中,重組質粒pEGFP-C3-Lhx8經測序鑒定后,采用脂質體轉染的方法轉染至體外培養(yǎng)的海馬神經干細胞中。結果測序鑒定表明,重組質粒pEGFP-C3-Lhx8-EGFP構建成功,該重組質粒轉入體外培養(yǎng)的神經干細胞后,質粒轉染組中ChAT陽性的細胞數(shù)較陰性對照組明顯增多(P0.05)。結論重組質粒pEGFP-C3-Lhx8-EGFP構建成功,Lhx8能夠促進NSCs向ChAT陽性的細胞分化。
[Abstract]:Objective to construct the eukaryotic expression vector of rat Lhx8 full-length structure gene. Methods the full-length structure gene of Lhx8 was amplified by PCR and ligated into eukaryotic expression vector pEGFP-C3 by double enzyme digestion of EcoRI and BamHI. The recombinant plasmid pEGFP-C3-Lhx8 was sequenced. Liposome transfection was used to transfect neural stem cells from hippocampus in vitro. Results sequencing showed that the recombinant plasmid pEGFP-C3-Lhx8-EGFP was successfully constructed. After the recombinant plasmid was transferred into neural stem cells cultured in vitro, the number of ChAT positive cells in the plasmid transfection group was significantly higher than that in the negative control group (P0.05). Conclusion the recombinant plasmid pEGFP-C3-Lhx8-EGFP was successfully constructed and Lhx8 could promote the differentiation of NSCs into ChAT positive cells.
【作者單位】： 南通大學醫(yī)學院人體解剖學系 江蘇省神經再生重點實驗室;
【基金】：國家自然科學基金資助項目(31070937;31271138) 江蘇省自然科學基金資助項目(BK2012659) 江蘇省高校優(yōu)勢學科建設工程資助項目(PAPD) 江蘇省普通高校研究生科研創(chuàng)新計劃資助項目(CXZZ12-0869)
【分類號】：R329.28

【共引文獻】

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