【摘要】：目的:探討有絲分裂相關激酶Plk1磷酸化修飾Tara蛋白在調控HeLa細胞胞質分裂及增殖中的作用。方法:運用酵母雙雜交、免疫共沉淀、體外沉降實驗確定Plk1與Tara兩種蛋白是否能夠相互結合;采用體內外磷酸化實驗明確Plk1對Tara蛋白的磷酸化修飾;采用免疫熒光實驗及流式細胞術檢測Tara蛋白的磷酸化對HeLa細胞胞質分裂及細胞增殖的影響。結果:Plk1與Tara在體內外均能結合;Tara蛋白在體內外均能夠被Plk1磷酸化修飾;過量表達Tara蛋白的磷酸化突變體對HeLa細胞的胞質分裂有明顯的抑制作用,細胞增殖明顯受阻。結論:Plk1能夠與Tara結合,并通過磷酸化修飾Tara蛋白阻礙細胞胞質分裂進程及抑制細胞增殖。
[Abstract]:Aim: to investigate the role of mitotic kinase Plk1 phosphorylation modified Tara protein in regulating cytoplasmic division and proliferation of HeLa cells. Methods: yeast two-hybrid, immunoprecipitation, in vitro sedimentation assay were used to determine whether Plk1 and Tara could bind to each other, and in vitro and in vivo phosphorylation experiments were used to determine the phosphorylation modification of Tara protein by Plk1. The effects of phosphorylation of Tara protein on cytokinesis and proliferation of HeLa cells were detected by immunofluorescence assay and flow cytometry. Results: Plk1 and Tara could bind in vivo and in vitro, Tara protein could be modified by Plk1 phosphorylation in vitro and in vivo, and the phosphorylated mutants which overexpressed Tara protein could inhibit the cytokinesis of HeLa cells and inhibit the proliferation of HeLa cells. Conclusion: Plk1 can bind to Tara and modify Tara protein by phosphorylation to block the process of cytokinesis and inhibit cell proliferation.
【作者單位】： 鄭州大學第一附屬醫(yī)院血液科;浙江大學附屬第一醫(yī)院骨髓移植中心;
【基金】：國家自然科學基金資助項目30900640 中國博士后科學基金資助項目2012M511591
【分類號】：R329

【參考文獻】

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本文編號：2310254