Hes1 mRNA在神經(jīng)干細胞向神經(jīng)細胞分化過程中表達變化的研究
本文選題:海馬 + Hes ; 參考:《重慶醫(yī)學(xué)》2013年33期
【摘要】:目的探討Hes1mRNA在神經(jīng)干細胞(NSC)向神經(jīng)細胞分化過程中的表達變化。方法構(gòu)建乳鼠海馬NSC的細胞培養(yǎng)模型,對NSC增殖分化進行形態(tài)學(xué)觀察。細胞分化前后,采用免疫化學(xué)染色法分別檢測巢蛋白(Nestin)和神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)的表達,以鑒定細胞類型。流式細胞儀檢測細胞周期以確定細胞增殖活性。用逆轉(zhuǎn)錄-PCR(RT-PCR)檢測NSC中Hes1mRNA的表達變化情況。結(jié)果從海馬分離培養(yǎng)的細胞生長狀態(tài)良好,有克隆增殖能力,呈Nestin表達陽性,細胞分化后呈NSE表達陽性。流式細胞儀檢測結(jié)果顯示,誘導(dǎo)前NSC增殖活躍,其S期的細胞比例明顯高于誘導(dǎo)分化各階段的細胞比例(P0.01)。與誘導(dǎo)前NSC相比,分化細胞各階段G0G1期細胞比例則顯著增多(P0.01),細胞停滯于G0G1期。RT-PCR結(jié)果表明,Hes1mRNA在NSC誘導(dǎo)分化前后均有表達,與誘導(dǎo)前相比,分化后的各階段Hes1mRNA表達量均明顯減少(P0.05),而分化各階段Hes1mRNA表達量差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論 Hes1mRNA的高表達可能與NSC的增殖有關(guān),而Hes1mRNA表達的減弱則有利于神經(jīng)細胞的大量分化。
[Abstract]:Objective to investigate the expression of Hes1 mRNA in neural stem cells (NSC). Methods the cell culture model of hippocampal NSC was established and the proliferation and differentiation of NSC were observed. The expression of nestin and neuron-specific enolase (NSE) were detected by immunocytochemical staining before and after differentiation to identify the cell types. Cell cycle was measured by flow cytometry to determine cell proliferation activity. The expression of Hes1 mRNA in NSC was detected by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). Results the cells isolated from the hippocampus grew well and had the ability to clone and proliferate. The cells showed nestin positive expression and NSE expression after differentiation. The results of flow cytometry showed that the proliferation of NSC was active before induction and the proportion of cells in S phase was significantly higher than that in all stages of differentiation (P0.01). Compared with NSC before and after induction, the proportion of G0G1 phase cells increased significantly (P0.01). The results of RT-PCR showed that Hes1 mRNA was expressed before and after induction of NSC, and compared with that before induction. The expression of Hes1 mRNA decreased significantly in all stages of differentiation (P0.05), but there was no significant difference in Hes1 mRNA expression in all stages of differentiation (P0.05). Conclusion the high expression of Hes1 mRNA may be related to the proliferation of NSC, and the decrease of Hes1 mRNA expression is beneficial to the differentiation of nerve cells.
【作者單位】: 新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院生理學(xué)與神經(jīng)生物學(xué)教研室;
【基金】:河南省新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院高學(xué)歷人才科研資助項目(2007502002)
【分類號】:R329
【參考文獻】
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【共引文獻】
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,本文編號:2078332
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