同種大鼠腹腔異位心臟移植模型的建立和常山酮抗免疫排斥反應(yīng)的研究
本文選題:大鼠同種腹腔異位心臟移植 + 常山酮; 參考:《吉林大學(xué)》2017年碩士論文
【摘要】:常山酮(Halofuginone HF),又名鹵夫酮,是從中國(guó)草本植物常山中提取出來(lái)的一種生物堿。近年來(lái),HF具有廣泛的有益的生物活性。研究發(fā)現(xiàn),HF不僅僅具有抗球蟲(chóng)的作用,還可以調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)的功能。有研究已經(jīng)表明,HF在多種器官移植手術(shù)中可以有效的延長(zhǎng)移植物的存活時(shí)間及受體的存活率。然而,HF在抗免疫排斥反應(yīng)中對(duì)CD4~+CD25~+Foxp3~+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的作用機(jī)制沒(méi)有研究。由于HF的藥用價(jià)值不斷的被研究證實(shí),本文將通過(guò)HF在同種大鼠腹腔異位心臟移植術(shù)術(shù)后,受體在抗免疫排斥反應(yīng)中的作用機(jī)制進(jìn)行研究和討論,本研究將為尋找治療免疫排斥反應(yīng)和解決器官移植中免疫排斥的方法提供部分理論依據(jù)。本實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)方案,以Wistar大鼠為供體,SD大鼠為受體,成功建立同種大鼠腹腔異位心臟移植模型,實(shí)驗(yàn)者總結(jié)了成功建立此模型的心得以及經(jīng)驗(yàn)。本實(shí)驗(yàn),通過(guò)HF作用于模型來(lái)分析HF在同種大鼠腹腔異位心臟移植手術(shù)中對(duì)CD4~+CD25~+Foxp3~+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的影響。將24只供體Wistar大鼠、24只受體SD大鼠各分組分為兩組,A組移植手術(shù)前三天,手術(shù)后四天經(jīng)口給予生理鹽水,作為空白對(duì)照組,共12例;B組在移植手術(shù)前三天,手術(shù)后四天20mg/kg/d HF經(jīng)口給藥,作為給藥組,共12例。術(shù)后每天觀察和評(píng)估受體大鼠,通過(guò)B超、心電圖,觸診觀察移植物的存活時(shí)間以及搏動(dòng)狀況,在術(shù)后3d、5d、7d采取移植物做HE染色,觀察心肌的損傷以及炎性細(xì)胞的浸潤(rùn),在術(shù)后5d、7d,分別取A、B組的外周血、脾臟以及淋巴結(jié)進(jìn)行流式細(xì)胞儀檢測(cè)CD4~+CD25~+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(CD4~+CD25~+n Treg)的表達(dá)量。在術(shù)后第5d、第7d,分別取A、B組的脾臟進(jìn)行熒光定量pcr檢測(cè)脾臟中Foxp3~+的表達(dá)量。術(shù)后每天觀察和評(píng)估結(jié)果:A組對(duì)照組,術(shù)后受體當(dāng)天精神狀態(tài)良好,進(jìn)食進(jìn)水正常,移植心臟搏動(dòng)強(qiáng)而有力,心率約200次/min;術(shù)后第3d。受體反應(yīng)以及飲食量減少,活動(dòng)量也相對(duì)減少,取供心觀察心臟部分開(kāi)始變黑,心搏動(dòng)減弱;術(shù)后第5d,受體反應(yīng)同第3d,甚至反應(yīng)更加遲鈍,取供心肉眼觀察顏色暗紅發(fā)黑。B組給藥組。術(shù)后受體當(dāng)天精神狀態(tài)良好,進(jìn)食進(jìn)水正常,移植心臟搏動(dòng)強(qiáng)而有力,心率約200次/min;術(shù)后第3d、第5d狀態(tài)同當(dāng)天,分別取供心觀察發(fā)現(xiàn)顏色無(wú)暗紅,外觀鮮紅,無(wú)明顯血栓及壞死組織。HE染色結(jié)果:第3d、第5d、第7d的心臟病理切片結(jié)果顯示,A組空白組,低倍鏡下觀察,心肌損傷越來(lái)越嚴(yán)重,大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。高倍鏡下,心肌細(xì)胞腫脹、空泡變性嚴(yán)重。B組給藥組,低倍鏡下顯示,心肌整體病變比空白組輕,心肌間可見(jiàn)炎性細(xì)胞的浸潤(rùn)也有水腫。在高倍鏡下發(fā)現(xiàn),偶見(jiàn)空泡變性,水腫較空白組輕,炎性細(xì)胞較空白組少。流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果:在術(shù)后第5d、第7d分別對(duì)A、B兩組大鼠采集淋巴結(jié)、脾臟、外周血進(jìn)行流式細(xì)胞儀分析檢測(cè),結(jié)果發(fā)現(xiàn)CD4~+CD25~+n Treg在淋巴結(jié)和脾臟有明顯的的升高,在外周血中有明顯下降。熒光定量pcr檢測(cè)結(jié)果:在術(shù)后第5d、第7d分別對(duì)A、B兩組大鼠采集脾臟進(jìn)行熒光定量pcr檢測(cè),結(jié)果發(fā)現(xiàn)給藥組脾臟中表達(dá)的Foxp3的基因表達(dá)量比空白組高,且顯著。結(jié)論:成功建立了大鼠同種腹腔異位心臟移植手術(shù)模型,常山酮在大鼠異位心臟移植手術(shù)模型中具有抗免疫排斥的作用。
[Abstract]:The effects of HF on CD4 ~ + CD25 ~ + Foxp3 ~ + regulatory T cells were studied . The results showed that there were no dark red , bright red , no obvious thrombus and necrotic tissue in the heart . The results showed that the changes of CD4 ~ + CD25 ~ + n - Treg in lymph nodes and spleen were more and more severe than those in the blank group . Results : The gene expression of Foxp3 expressed in the spleen of rats was higher than that in blank group , and the results showed that the rat model of allogeneic heart transplantation was successfully established , and it had anti - immune rejection in the model of ectopic heart transplantation in rats .
【學(xué)位授予單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類(lèi)號(hào)】:R654.2;R-332
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2 祝~=驤;iJ梊霞;洃克琴;崔素英;文允摪;,
本文編號(hào):2043297
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