本文選題：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 + 基因沉默　； 參考：《中國(guó)病理生理雜志》2013年08期

【摘要】：目的:探討沉默caspase-3對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)增殖、細(xì)胞周期和凋亡的影響。方法:構(gòu)建靶向caspase-3的shRNA重組慢病毒并轉(zhuǎn)染MSCs,通過(guò)real-time PCR和Western blotting在mRNA及蛋白水平鑒定轉(zhuǎn)染結(jié)果。采用MTS法檢測(cè)細(xì)胞增殖,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期。Real-time PCR檢測(cè)bcl-2和bax mRNA的表達(dá)。Hoechst熒光染色法檢測(cè)細(xì)胞的凋亡情況。結(jié)果:Real-time PCR和Western blotting結(jié)果均表明成功建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染shRNA-caspase-3的大鼠MSCs細(xì)胞株。沉默caspase-3使MSCs的增殖率明顯提高(P0.05),且S期細(xì)胞百分比明顯增多,為(52.66±0.30)%。沉默caspase-3后bcl-2 mRNA表達(dá)上調(diào),bax mRNA表達(dá)下調(diào),bcl-2/bax比值升高(P0.05)。轉(zhuǎn)染組的細(xì)胞凋亡率為(15.01±1.73)%,低于空載體組的(25.67±3.05)%和空白對(duì)照組的(23.67±1.16)%(P0.05)。結(jié)論:沉默caspase-3能調(diào)控MSCs的細(xì)胞周期,促進(jìn)細(xì)胞增殖,減少細(xì)胞凋亡。
[Abstract]:Aim: to investigate the effects of silencing caspase-3 on proliferation, cell cycle and apoptosis of rat bone marrow mesenchymal stem cells (MSCs). Methods: the recombinant shRNA lentivirus targeting caspase-3 was constructed and transfected into MSCs. The transfection results were identified by real-time PCR and Western blotting at the level of mRNA and protein. MTS assay was used to detect cell proliferation and flow cytometry to detect cell cycle. Real-time PCR was used to detect the expression of bcl-2 and bax mRNA. Hoechst fluorescence staining was used to detect apoptosis. Results the results of PCR and Western blotting showed that the stable rat MSCs cells transfected with shRNA-caspase-3 were successfully established. Silencing caspase-3 significantly increased the proliferation rate of MSCs and the percentage of S phase cells, which was 52.66 鹵0.30%. After silencing caspase-3, the expression of bcl-2 mRNA up-regulated and down-regulated the ratio of bcl-2 / Bax to increase P0.05. The rate of apoptosis in the transfected group was 15.01 鹵1.73, which was lower than that in the empty vector group (25.67 鹵3.05) and the blank control group (23.67 鹵1.16). Conclusion: silencing caspase-3 can regulate the cell cycle of MSCs, promote cell proliferation and reduce apoptosis.
【作者單位】： 中山大學(xué)孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院心胸外科;廣州市第一人民醫(yī)院腦內(nèi)科;
【基金】：廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目(No.2012B031800258) 中山大學(xué)青年教師培育項(xiàng)目(No.11ykpy30)
【分類號(hào)】：R363

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 任力杰;王洋;韓漫夫;;鋅及堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子單獨(dú)或聯(lián)合應(yīng)用體外培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的生長(zhǎng)及增殖[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2010年27期

2 吳剛;何輝;曹月誠(chéng);陳旭春;楊蕾;富大智;;不同血清培養(yǎng)條件下骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的增殖[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2010年49期

3 米爾薩力江·亞森;郭常軍;費(fèi)琴明;陳統(tǒng)一;崔大敷;;基因芯片分析成骨生長(zhǎng)肽對(duì)OPG~(-/-)小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的作用[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2011年27期

4 鐘達(dá);廖前德;盧吉平;尹科;周星;嚴(yán)安;翁曉軍;;不同體積分?jǐn)?shù)富血小板血漿對(duì)犬骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖的影響[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2009年49期

5 肖漓;石炳毅;馮凱;何秀云;許曉光;周文強(qiáng);韓永;高鈺;;HLA-G參與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的抑制作用機(jī)制探討[J];生物技術(shù)通訊;2009年06期

6 張紹偉;劉晶;韋紀(jì)英;;不同濃度富血小板血漿對(duì)體外培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖活性的影響[J];陜西醫(yī)學(xué)雜志;2009年06期

7 宋會(huì)平;王志強(qiáng);趙亞平;陳學(xué)英;張育敏;康悅;張康蓉;李寶興;;血小板裂解液對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞生長(zhǎng)的影響[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2008年21期

8 郝彥琴;盧寧;李紅;趙龍鳳;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的貼壁培養(yǎng)及內(nèi)毒素對(duì)其增殖活性的影響[J];中華實(shí)驗(yàn)和臨床感染病雜志(電子版);2010年02期

9 陳偉;王麗娜;姜艷芳;王金成;段德生;;5-氮雜胞苷對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向肌細(xì)胞增殖及分化的影響[J];吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2006年01期

10 張良;周建業(yè);胡盛壽;;雪旺細(xì)胞促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖的實(shí)驗(yàn)研究[J];中國(guó)修復(fù)重建外科雜志;2007年08期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 李蔚;吳素蘭;林q煌;周天鴻;曾志鋒;;EGS564基因沉默HCMV UL49表達(dá)及其抗病毒活性的研究[A];中國(guó)的遺傳學(xué)研究——遺傳學(xué)進(jìn)步推動(dòng)中國(guó)西部經(jīng)濟(jì)與社會(huì)發(fā)展——2011年中國(guó)遺傳學(xué)會(huì)大會(huì)論文摘要匯編[C];2011年

2 孫萬(wàn)平;張稷;孫靜;王鳳鳴;謝芳;張學(xué)光;;巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)增殖分化的影響[A];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)第九次會(huì)員代表大會(huì)暨青年學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要集[C];2007年

3 季愛(ài)民;蘇丹;車鷗;李文適;孫靚;張忠義;楊彬;;殼聚糖/siRNA納米粒介導(dǎo)的功能性基因沉默研究(英文)[A];2009年中國(guó)藥學(xué)大會(huì)暨第九屆中國(guó)藥師周論文集[C];2009年

4 劉丹;龔衛(wèi)娟;田芳;胡茂志;錢莉;季明春;;可溶性MICA蛋白對(duì)NK細(xì)胞增殖、分裂和凋亡的影響[A];中國(guó)免疫學(xué)會(huì)第五屆全國(guó)代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要[C];2006年

5 江文正;于益芝;曹雪濤;;DIgR2基因沉默增強(qiáng)樹(shù)突狀細(xì)胞誘導(dǎo)的抗乙肝病毒免疫應(yīng)答的研究[A];中國(guó)免疫學(xué)會(huì)第五屆全國(guó)代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要[C];2006年

6 ;Identification and characterization of NYGGF4,a novel gene containing a phosphotyrosine-binding (PTB) domain that stimulates 3T3-L1 preadipocytes proliferation[A];2006（第三屆）江浙滬兒科學(xué)術(shù)會(huì)議暨浙江省兒科學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2006年

7 龐小峰;劉樂(lè)維;;高壓輸電線的電磁輻射對(duì)成纖維細(xì)胞增殖的影響[A];中國(guó)生物醫(yī)學(xué)工程進(jìn)展——2007中國(guó)生物醫(yī)學(xué)工程聯(lián)合學(xué)術(shù)年會(huì)論文集（下冊(cè)）[C];2007年

8 劉鴻禧;;表遺傳學(xué)研究若干新進(jìn)展[A];第五屆廣東省環(huán)境誘變劑學(xué)會(huì)暨第三屆廣東省預(yù)防醫(yī)學(xué)會(huì)衛(wèi)生毒理專業(yè)委員會(huì)學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C];2006年

9 宋然;房仙穎;王璐;俞飚;徐強(qiáng);;SBF-1選擇性抑制活化T細(xì)胞增殖及其抗炎機(jī)制的研究[A];第十屆全國(guó)抗炎免疫藥理學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2010年

10 甘露;;胃泌素在慢性應(yīng)激性大鼠血清對(duì)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化的抑制作用中的影響研究[A];中國(guó)免疫學(xué)會(huì)第五屆全國(guó)代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要[C];2006年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 余志平;siRNA治療研究異彩紛呈(上)[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2007年

2 本版編輯 顏亮 楚君　任海軍;“沉默”是金[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2006年

3 蘆勤;我國(guó)科學(xué)家發(fā)現(xiàn)細(xì)胞增殖抑制基因[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2004年

4 醫(yī)學(xué)博士 科學(xué)松鼠會(huì)成員 致樺;美麗的干擾[N];中國(guó)經(jīng)營(yíng)報(bào);2010年

5 宮高;斷絕腫瘤“糧草”[N];衛(wèi)生與生活報(bào);2003年

6 余志平;siRNA治療研究異彩紛呈(中)[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2007年

7 記者 何德功;抗癌病毒可以破壞癌細(xì)胞[N];新華每日電訊;2002年

8 ;2004年度國(guó)家科技進(jìn)步獎(jiǎng)獲獎(jiǎng)項(xiàng)目之一（二等獎(jiǎng)）[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2005年

9 周清春;骨髓移植：用自己的造血干細(xì)胞[N];科技日?qǐng)?bào);2005年

10 寒信;單個(gè)癌基因的致癌作用[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2004年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 李海生;低氧促進(jìn)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖和分化及其機(jī)制研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2005年

2 張偉;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)機(jī)制的研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2004年

3 牟大鵬;抑制消減雜交技術(shù)篩選骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化前后差異表達(dá)基因[D];吉林大學(xué);2007年

4 景紅;大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外誘導(dǎo)為腎臟系膜細(xì)胞樣細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2008年

5 黃定強(qiáng);骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化的實(shí)驗(yàn)研究[D];四川大學(xué);2004年

6 王勃;誘導(dǎo)骨髓干細(xì)胞向心肌樣細(xì)胞分化的研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2005年

7 韓立赤;張應(yīng)力誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞骨向分化的實(shí)驗(yàn)研究[D];四川大學(xué);2005年

8 周竹娟;轉(zhuǎn)核技術(shù)建立可增殖神經(jīng)細(xì)胞系的實(shí)驗(yàn)研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2007年

9 鄧全軍;端粒酶永生化大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的體內(nèi)外研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2008年

10 邢小麗;大鼠視網(wǎng)膜勻漿上清液體外誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為神經(jīng)元樣細(xì)胞實(shí)驗(yàn)研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2008年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 曾婷婷;小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在體外對(duì)淋巴細(xì)胞增殖和細(xì)胞凋亡的影響[D];四川大學(xué);2006年

2 林長(zhǎng)貴;慢病毒載體介導(dǎo)nanog基因修飾小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞[D];福建醫(yī)科大學(xué);2008年

3 張?jiān)迄i;BMP-14與bFGF聯(lián)合誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向軟骨分化的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2009年

4 周瓊;NGF體外誘導(dǎo)hMSCs分化為神經(jīng)元樣細(xì)胞[D];南華大學(xué);2008年

5 劉偉軍;Ca～（2+）在電磁場(chǎng)刺激骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的增殖與分化過(guò)程中作用的研究[D];華中科技大學(xué);2006年

6 何力鵬;hVEGF_（121）/EGFP融合蛋白的表達(dá)、純化及功能鑒定[D];南昌大學(xué);2009年

7 劉宏志;大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化為神經(jīng)前體細(xì)胞的研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2005年

8 董玉泉;兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)、鑒定及生物學(xué)特性研究[D];青島大學(xué);2006年

9 項(xiàng)正兵;人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向膽堿能神經(jīng)元樣細(xì)胞定向分化的實(shí)驗(yàn)研究[D];南昌大學(xué);2007年

10 周雅麗;Survivin基因在骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中的表達(dá)研究[D];蘭州大學(xué);2009年

，

本文編號(hào)：1895765