利用生物膜細(xì)菌建立骨折術(shù)后內(nèi)植物相關(guān)骨髓炎動(dòng)物模型
發(fā)布時(shí)間:2018-05-08 20:05
本文選題:動(dòng)物模型 + 生物膜 ; 參考:《南方醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文
【摘要】:背景:內(nèi)植物相關(guān)骨髓炎是骨科及骨科創(chuàng)傷病人骨折固定術(shù)后的一種嚴(yán)重并發(fā)癥。有研究表明,醫(yī)療器械相關(guān)感染占所有骨科感染的70%以上,并且由于治療手段局限,常常導(dǎo)致感染性骨不連以及骨髓炎等棘手問(wèn)題,并伴隨了嚴(yán)重的社會(huì)經(jīng)濟(jì)影響。動(dòng)物模型是研究?jī)?nèi)植物相關(guān)骨髓炎最常用、最有效、最有價(jià)值的工具之一。骨髓炎研究中,髓內(nèi)固定的動(dòng)物模型被廣泛應(yīng)用,但是這類(lèi)模型中的髓內(nèi)固定并不像臨床情況中一樣在用穩(wěn)定骨折的同時(shí)遠(yuǎn)端使用鎖定釘,因而缺乏了旋轉(zhuǎn)穩(wěn)定性。然而,內(nèi)固定的穩(wěn)定性對(duì)骨折的修復(fù)和愈合起到至關(guān)重要的作用,在使用這些動(dòng)物模型時(shí),穩(wěn)定性的缺失會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果形成負(fù)面影響。選擇鋼板固定的方式或許是對(duì)穩(wěn)定性缺失的一種合適的解決方法,但是目前大多數(shù)動(dòng)物模型中并沒(méi)有使用鋼板作為內(nèi)固定方式,而是選擇不進(jìn)行截骨處理。雖然這樣避免了穩(wěn)定性的影響,卻也掩蓋了骨折及其愈合過(guò)程與感染的相互影響,局限了其應(yīng)用。此外,骨髓炎動(dòng)物模型過(guò)去通常使用漂浮細(xì)菌作為起始接種的病原體,但是隨著細(xì)菌生物膜這一概念的提出,科學(xué)家們逐漸意識(shí)到漂浮細(xì)菌作為起始接種的局限性以及細(xì)菌生物膜在骨髓炎中所起到的重要作用。美國(guó)疾病控制中心(CDC)報(bào)告稱,在所有感染中的60%是由細(xì)菌生物膜導(dǎo)致的感染。內(nèi)植物表面形成細(xì)菌生物膜常常導(dǎo)致抗菌治療面臨失敗,與漂浮細(xì)菌相比生物膜細(xì)菌對(duì)抗生素的耐藥程度可以高達(dá)1000倍以上。因此,Williams等提出了一種新的使用成熟細(xì)菌生物膜代替漂浮細(xì)菌作為起始接種的內(nèi)植物相關(guān)骨髓炎動(dòng)物模型。但是,這一模型使用羊作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,僅在皮質(zhì)骨表層局部進(jìn)行處理,接種范圍及骨折程度不足,不足以模擬臨床常見(jiàn)骨折情況。一般來(lái)說(shuō),動(dòng)物模型為新的治療手段提供基礎(chǔ)研究,應(yīng)當(dāng)盡可能的反映臨床情況。因此,我們期望建立一個(gè)股骨骨折鋼板固定并用細(xì)菌生物膜作為起始接種的骨髓炎兔子模型,來(lái)改進(jìn)上面提到的這些問(wèn)題。我們的動(dòng)物模型能夠更加貼近臨床情況,可以提供一個(gè)更好的工具來(lái)觀察感染的進(jìn)程、骨折的愈合以及評(píng)估內(nèi)植物的材料和涂層的抗菌能力。方法和材料:24只新西蘭大白兔(NZW)隨機(jī)分為相等的兩組。用直徑1mm的線鋸在每只兔子的右側(cè)股骨干中段進(jìn)行截骨,并用一塊5孔鋼板及4枚螺釘進(jìn)行固定。第一組(對(duì)照組)的鋼板并不接種細(xì)菌,第二組(實(shí)驗(yàn)組)的鋼板接種金黃色葡萄球菌(ATCC25923)的生物膜。所有兔子分別在第0、7、14、21天拍攝X線片,在術(shù)后21天取右側(cè)股骨標(biāo)本進(jìn)行micro-CT掃描重建,脫鈣處理后進(jìn)行石蠟包埋切片并予HE染色行組織學(xué)觀察。兩組鋼板分別取6塊進(jìn)行掃描電鏡(SEM)以及共聚焦顯微鏡(CLSM)對(duì)生物膜進(jìn)行觀察與評(píng)估。結(jié)果:在第二組中(實(shí)驗(yàn)組),所有兔子均可明顯觀察到膿液形成,骨膜反應(yīng),皮質(zhì)骨的破壞和吸收;所有鋼板表面均可以觀察到生物膜的形成。相反,對(duì)照組只有輕度的炎癥反應(yīng),并沒(méi)有膿液形成;鋼板表面均整潔無(wú)感染表現(xiàn)。兩組的組織學(xué)評(píng)分(P0.001)以及鋼板表面的細(xì)菌半定量(P0.001)結(jié)果皆具有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:結(jié)果表明,我們成功建立了一個(gè)新的開(kāi)放性骨折鋼板內(nèi)固定術(shù)后感染的兔子模型,為內(nèi)植物相關(guān)骨髓炎的研究提供了新的工具。
[Abstract]:Background : Internal plant - related osteomyelitis is a serious complication after fracture fixation in orthopedic and orthopedic trauma patients . The study shows that the infection of medical devices accounts for more than 70 % of all orthopedic infections . In general , animal models have been used as experimental animals , which often lead to infection caused by bacterial biofilm . In general , animal models provide a better tool to observe the clinical situation . In general , animal models can provide a better tool to observe the process of infection , the healing of fractures , and the assessment of the antibacterial ability of materials and coatings of plants . Methods and materials : 24 New Zealand White rabbits ( NZW )
【學(xué)位授予單位】:南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類(lèi)號(hào)】:R681.2;R-332
【參考文獻(xiàn)】
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1 邱明星;熊?chē)?guó)兵;;細(xì)菌生物膜模型研究進(jìn)展[J];實(shí)用醫(yī)院臨床雜志;2014年04期
2 黃金亮;唐輝;范新宇;徐永清;;慢性難治性骨髓炎動(dòng)物模型制備與鑒定[J];西南國(guó)防醫(yī)藥;2012年03期
,本文編號(hào):1862855
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