本文選題：鐵皮石斛 + 補(bǔ)腎�。� 參考：《廣州中醫(yī)藥大學(xué)》2016年博士論文

【摘要】：衰老是生命無(wú)可避免且復(fù)雜的一種自然規(guī)律,隨著年齡的增加,體內(nèi)新陳代謝下降和各器官的功能逐漸衰退,形體外觀和內(nèi)臟衰老征象變得更加明顯[1]。中醫(yī)藥學(xué)對(duì)衰老理論和延緩衰老具有深刻的闡述和豐富的實(shí)踐,《素問(wèn)·上古天真論》中明確指出機(jī)體的“生、長(zhǎng)、壯、老、已”,受腎中精氣的調(diào)節(jié),提出腎虛是衰老的主要原因。老年期中耳鳴耳聾、腰酸腿軟、夜尿頻多等均為腎氣衰退的表現(xiàn),因此,在調(diào)攝養(yǎng)生的前提下,應(yīng)注重補(bǔ)腎培元。雖然我們不可能違背生命衰老這個(gè)自然規(guī)律,但是希望通過(guò)探索人類衰老的機(jī)理,合理采用保健措施,重視防護(hù),可有效降低衰老相關(guān)疾病的發(fā)病率,提高生活質(zhì)量,延緩衰老。傳統(tǒng)中醫(yī)對(duì)石斛功效評(píng)價(jià)很高,《本草通玄》記載石斛“咸能益腎,多功于水土(腎、脾)二臟”；《本草思辨錄》記載石斛為腎藥、為肺藥、為腸胃藥；《神農(nóng)本草經(jīng)》認(rèn)為石斛新鮮或干燥莖入藥,有滋陰清熱、補(bǔ)腎益精之功效：《藥性論》中石斛“主治腰腳軟弱,骨中虛損,補(bǔ)腎積精,養(yǎng)腎氣,益力”；《本草綱目》評(píng)價(jià)鐵皮石斛“強(qiáng)陰益精,補(bǔ)腎益力,壯筋骨,益智除驚,補(bǔ)五臟虛勞贏瘦,輕身延年”；《道藏》更將鐵皮石斛列為“中華九大仙草”之首,因其具有獨(dú)特的藥用價(jià)值和保健功效,成為歷代養(yǎng)生補(bǔ)品,說(shuō)明石斛的延緩衰老作用早已被認(rèn)識(shí)。近來(lái)研究證實(shí)mTOR (mammalian target of rapamycin,哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白)通路的調(diào)節(jié)作用與機(jī)體衰老密切相關(guān),可通過(guò)活化NF-κB、促炎癥因子釋放等而參與炎癥衰老的過(guò)程。線粒體功能紊亂致氧自由基生成增加是衰老調(diào)控機(jī)制之一,線粒體功能受損及數(shù)量減少與諸多年齡相關(guān)疾病密切聯(lián)系。mTORCl受抑制后可致發(fā)揮保護(hù)功能的基因群活化,通過(guò)限制線粒體呼吸減少氧自由基造成的損傷,從而致機(jī)體壽命延長(zhǎng)。我們前期研究發(fā)現(xiàn)鐵皮石斛抗雌鼠卵巢衰老的機(jī)制可通過(guò)增強(qiáng)血液中的抗氧化酶活性、抑制促炎癥因子的釋放、抑制NF-κB炎癥通路的活化來(lái)調(diào)控,因此,本研究進(jìn)一步提出“鐵皮石斛可通過(guò)抑制mTOR信號(hào)通路過(guò)度活化,參與調(diào)控線粒體介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡通路,改善生殖衰老,從而影響多種老年疾病的相關(guān)進(jìn)程,發(fā)揮“補(bǔ)腎、延年益壽”的作用。目的：基于鐵皮石斛“補(bǔ)腎、延年益壽”的功效及結(jié)合“腎主骨生髓、主藏精、主生殖”的中醫(yī)理論,本研究通過(guò)構(gòu)建去勢(shì)致骨質(zhì)疏松小鼠模型、D-半乳糖致亞急性衰老小鼠及自然衰老小鼠模型,分別探討鐵皮石斛“壯筋骨、益智、強(qiáng)陰益精、補(bǔ)五臟輕身延年”等功效。方法：一、從“腎主骨”的角度探討鐵皮石斛“補(bǔ)腎益力、壯筋骨”的功效昆明小鼠,雌性,1月齡。進(jìn)行去勢(shì)手術(shù),術(shù)后1個(gè)月將造模組小鼠隨機(jī)分為：去勢(shì)模型組、雌二醇組(0.17mg/kg)、鐵皮石斛榨汁組(2 g生藥(鮮品)/kg,含多糖約130mg/kg)、鐵皮石斛多糖組(140mg/kg,含多糖約130mg/kg),另取同批空白小鼠作為假手術(shù)組,連續(xù)給藥1個(gè)月。檢測(cè)指標(biāo)包括：(1)血清生化指標(biāo)：鈣(Ca)、磷(P)、堿性磷酸酶(AKP)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量；(2)組織病理檢查：子宮組織；(3)骨組織形態(tài)學(xué)觀察：骨組織計(jì)量學(xué)及骨密度考察。二、從“腎生髓”的角度探討鐵皮石斛“益智”的功效昆明小鼠,雌性,1月齡。通過(guò)皮下注射1g/kg D-半乳糖連續(xù)8周建立D-半乳糖致亞急性衰老小鼠模型,造模2周后隨機(jī)分為D-半乳糖模型組、雌二醇組(0.17mg/kg)、鐵皮石斛榨汁組(2 g生藥(鮮品)/kg,含多糖約130mg/kg)、鐵皮石斛多糖組(140mg/kg,含多糖約130mg/kg)。另取同批空白小鼠作為正常組,連續(xù)給藥3個(gè)月。去勢(shì)模型采用上一章節(jié)中同樣造模方法進(jìn)行模型構(gòu)建,術(shù)后6個(gè)月進(jìn)行分組給藥,給藥劑量不變,給藥周期為13個(gè)月。檢測(cè)指標(biāo)包括：(1)行為學(xué)考察：Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)；(2)臟器病理檢查：腦組織。三、從“腎藏精”探討鐵皮石斛“補(bǔ)五臟、延年益壽”的功效采用第三章第二節(jié)D-半乳糖致亞急性雌性衰老模型小鼠；將9月齡衰老動(dòng)物隨機(jī)分為：自然衰老模型組、鐵皮石斛榨汁組(2 g生藥(鮮品)/kg,含多糖約130mg/kg)、鐵皮石斛多糖組(140mg/kg,含多糖約130mg/kg),連續(xù)給藥至小鼠全部死亡；野生型黑腹果蠅,由廣州中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院李耿老師饋贈(zèng),收集8h內(nèi)羽化的果蠅隨機(jī)分為空白對(duì)照組、3%紅景天組、雌二醇組、1%鐵皮石斛榨汁組、3%鐵皮石斛榨汁組、9%鐵皮石斛榨汁組、0.1%鐵皮石斛多糖組、0.3%鐵皮石斛多糖組、0.9%鐵皮石斛多糖組。將藥液配于基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,每5天更換培養(yǎng)基,連續(xù)培養(yǎng)至果蠅全部死亡。檢測(cè)指標(biāo)包括：(1)D-半乳糖致亞急性衰老小鼠：體溫變化,臟器病理檢查：心、肝、脾、胸腺、肺、腎、腎上腺,重要臟器線粒體膜電位檢測(cè)：腦、脾、胸腺、腎上腺；(2)自然衰老小鼠：體重、體溫變化,壽命觀察；(3)黑腹果蠅：壽命觀察。四、從“腎主生殖”的角度初步探討鐵皮石斛“補(bǔ)腎、強(qiáng)陰益精”功效的作用機(jī)制昆明小鼠,雌性,1月齡。D-半乳糖致亞急性衰老模型采用第三章第二節(jié)中同樣造模方法進(jìn)行模型構(gòu)建,造模兩周后隨機(jī)分為：D-半乳糖模型組、雌二醇組(0.17 mg/kg)、鐵皮石斛榨汁組(2g生藥(鮮品)/kg,含多糖約130mg/kg)、鐵皮石斛多糖組(140mg/kg,含多糖約130mg/kg),另取同批空白小鼠作為正常組,連續(xù)給藥4個(gè)月。檢測(cè)指標(biāo)包括：(1)臟器病理檢查：子宮及卵巢組織；(2)子宮及卵巢線粒體功能檢測(cè)：ATP含量、線粒體膜電位分析及線粒體介導(dǎo)凋亡相關(guān)基因及線粒體融合蛋白-2基因表達(dá)檢測(cè)；(3)子宮及卵巢組織mTOR通路相關(guān)基因表達(dá)檢測(cè)。結(jié)果：一、從“腎主骨”的角度探討鐵皮石斛“補(bǔ)腎益力、壯筋骨”的功效鐵皮石斛能提高血清磷、鈣、堿性磷酸酶含量,對(duì)鈣磷平衡具有一定的調(diào)節(jié)作用,并能降低MDA含量,提高SOD活性,對(duì)子宮組織、骨小梁骨皮質(zhì)變薄、形態(tài)結(jié)構(gòu)性差等病變程度也具有改善作用,榨汁液更能顯著升高子宮系數(shù),增加骨小梁面積百分比、骨小梁數(shù)目以及降低骨小梁分離度,多糖亦能不同程度地改善上述骨小梁形態(tài)變化,提示鐵皮石斛能促進(jìn)骨形成,可能通過(guò)增強(qiáng)機(jī)體的抗氧化能力,有效改善氧自由基代謝異常,從而起到抗骨質(zhì)疏松作用。二、從“腎生髓”的角度探討鐵皮石斛“益智”的功效D-半乳糖造模8周后,小鼠血清SOD活性明顯下降,MDA含量明顯升高,表明機(jī)體造成氧化損傷,模型建立成功。去勢(shì)老年小鼠與青年組比較,學(xué)習(xí)能力明顯低下,與去勢(shì)青年小鼠比較差異不明顯,提示經(jīng)過(guò)去勢(shì)手術(shù)后會(huì)對(duì)定位搜索及空間搜索學(xué)習(xí)能力均有一定的影響,進(jìn)一步說(shuō)明雌激素缺乏可以導(dǎo)致學(xué)習(xí)記憶功能減退、加重腦衰老。在D-半乳糖模型中,與模型組相比,榨汁組潛伏期和搜索距離均明顯縮短,且空間探索實(shí)驗(yàn)中的目標(biāo)象限停留時(shí)間比及游泳距離比均顯著增加,提示鐵皮石斛對(duì)D-半乳糖模型定位航行的學(xué)習(xí)能力有一定增強(qiáng)作用,對(duì)空間探索中的記憶鞏固能力作用更為明顯；在去勢(shì)模型中,鐵皮石斛榨汁液能縮短去勢(shì)初老小鼠搜索距離,對(duì)去勢(shì)初老模型定位航行中的學(xué)習(xí)能力有一定作用,對(duì)去勢(shì)老年模型的學(xué)習(xí)記憶能力改善不明顯。提示鐵皮石斛對(duì)氧化損傷及激素缺失造成的腦記憶功能障礙有一定改善作用,可能通過(guò)清除自由基,改善氧化損傷造成的腦組織神經(jīng)元細(xì)胞數(shù)量減少及神經(jīng)元纖維纏結(jié)現(xiàn)象,促進(jìn)受損神經(jīng)元的恢復(fù),提高腦神經(jīng)元的細(xì)胞活力,改善腦組織和延緩腦的老化,從而激發(fā)和提高腦的智能,使動(dòng)物的學(xué)習(xí)能力提高。但對(duì)激素缺失的老年機(jī)體作用不明顯,提示在激素缺乏及年齡增長(zhǎng)雙重刺激下所導(dǎo)致的腦記憶功能障礙程度較嚴(yán)重,鐵皮石斛對(duì)此改善作用不明顯。三、從“腎藏精”探討鐵皮石斛“補(bǔ)五臟、延年益壽”的功效鐵皮石斛對(duì)D-半乳糖致亞急性衰老小鼠局部溫度影響并不明顯,而多糖則對(duì)自然衰老小鼠的肩胛部、背部及腹部溫度升高較明顯,表明鐵皮石斛多糖對(duì)老年基礎(chǔ)代謝生命活動(dòng)有一定的增強(qiáng)作用。鐵皮石斛對(duì)D-半乳糖致亞急性衰老雌鼠中各重要臟器病變均有不同程度的改善作用,對(duì)腦、脾臟及腎上腺組織ATP含量有升高的作用,并能明顯升高腦及脾臟組織線粒體膜電位,改善去極化現(xiàn)象,對(duì)臟器的凋亡壞死有一定的保護(hù)作用。在自然衰老小鼠模型及黑腹果蠅模型中,鐵皮石斛平均壽命及半數(shù)死亡時(shí)間均有一定的延長(zhǎng)；且以榨汁組在自然衰老小鼠模型中延長(zhǎng)最為明顯。表明鐵皮石斛具有一定補(bǔ)五臟功效及延長(zhǎng)壽命的作用。四、從“腎主生殖”的角度初步探討鐵皮石斛“補(bǔ)腎、強(qiáng)陰益精”功效的作用機(jī)制鐵皮石斛可升高子宮系數(shù),改善子宮萎縮現(xiàn)象；臟器病理檢查分析表明能改善子宮、卵巢等病理變化。鐵皮石斛可升高雌性衰老小鼠子宮及卵巢組織ATP含量,通過(guò)下調(diào)卵巢組織Mfn2、上調(diào)子宮及卵巢組織Bcl-2、下調(diào)子宮組織Bax基因表達(dá)水平,增加Bcl-2/Bax的表達(dá)比率,保護(hù)線粒體膜并升高線粒體膜電位,緩解D-半乳糖對(duì)子宮及卵巢組織線粒體的損傷,抑制子宮及卵巢組織的凋亡從而延緩衰老。鐵皮石斛對(duì)卵巢組織mTOR基因表達(dá)水平也具有下調(diào)作用,但目前對(duì)mTOR信號(hào)通路的了解不十分完全且細(xì)胞凋亡機(jī)制尚未研究明確,因此鐵皮石斛是否通過(guò)抑制mTOR信號(hào)通路發(fā)揮抗凋亡保護(hù)作用仍需進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究。結(jié)論：本研究以鐵皮石斛為研究對(duì)象,采用去勢(shì)致骨質(zhì)疏松小鼠模型、D-半乳糖致亞急性衰老小鼠模型、自然衰老小鼠模型及黑腹果蠅模型,從“腎主藏精、主骨、生髓、主生殖”多角度探討鐵皮石斛“強(qiáng)陰益精、壯筋骨、益智、補(bǔ)五臟、輕身延年”等功效,發(fā)現(xiàn)鐵皮石斛可能通過(guò)補(bǔ)益腎臟系統(tǒng),改善生殖功能的衰退,而使精力增強(qiáng),強(qiáng)健筋骨,增強(qiáng)人的智力清醒頭腦,延緩骨質(zhì)疏松癥、老年性癡呆和更年期綜合征等多種老年疾病的相關(guān)進(jìn)程,從而延長(zhǎng)一定的生存時(shí)間來(lái)達(dá)到抗衰老的目的,其通過(guò)調(diào)控mTOR信號(hào)通路及線粒體介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡延緩生殖器官衰老的作用可能是其對(duì)機(jī)體整體發(fā)揮抗衰老的作用基礎(chǔ)之一。本研究為鐵皮石斛“補(bǔ)腎、延年益壽”的功效提供科學(xué)性依據(jù)并為其在老年保健品中的開(kāi)發(fā)應(yīng)用闡明價(jià)值。
[Abstract]:Aging is a natural law that is inevitable and complex in life . As the age increases , the body ' s metabolism decreases and the functions of organs gradually fade , and the appearance of the body and the signs of visceral aging become more obvious . Traditional Chinese medicine has a profound effect on aging theory and delaying aging , and it is pointed out that the body ' s " life , long , strong , old and old " is the main cause of aging .
According to the invention , the dendrobium stem is used as a kidney medicine , and is a lung medicine , and is used as a stomach - stomach medicine ;
The fresh or dried stem of Dendrobium nobile is used as medicine for nourishing yin , clearing away heat , invigorating kidney and replenishing essence , and is mainly used for treating weakness of waist and foot , deficiency of bone , tonifying kidney and essence , nourishing kidney and qi , and tonifying kidney .
Objective : To evaluate the effect of Dendrobium officinale " on strengthening yin and replenishing essence , invigorating kidney and tonifying body , strengthening muscles and bones , benefiting intelligence , relieving convulsion , tonifying five viscera , and losing weight , and prolonging life ;
Objective : To study the effect of Dendrobium officinale on aging in mice by inhibiting the activation of NF - 魏B and pro - inflammatory factors . The serum biochemical indexes were as follows : ( 1 ) serum biochemical indexes : calcium ( Ca ) , phosphorus ( P ) , alkaline phosphatase ( ALP ) , superoxide dismutase ( SOD ) and malondialdehyde ( MDA ) ;
( 2 ) histopathological examination : uterine tissue ;
( 3 ) Bone histomorphology observation : Bone histometrology and bone mineral density were investigated . The effect of Dendrobium officinale on " intelligence " of Dendrobium officinale was investigated from the angle of " kidney marrow " . The model of D - galactose - induced subacute aging mice was established by subcutaneous injection of 1 g / kg D - galactose for 8 weeks . The same batch of blank mice were taken as the normal group and the drug was administered for 3 months . The castration model was constructed by the same method as in the previous chapter . After 6 months of operation , the dose of the drug was unchanged . The administration period was 13 months . The detection index included : ( 1 ) Behavior study : Morris water maze test ;
( 2 ) pathological examination of organs : brain tissue . 3 . The effect of " tonifying the five viscera and prolonging the life " of Dendrobium officinale from " kidney essence " was used to study the efficacy of the second section of D - galactose - induced subacute female aging model mice ;
Nine - month - old aging animals were randomly divided into : natural aging model group , Dendrobium officinale juice group ( 2 g crude drug ( fresh ) / kg , polysaccharide ( about 130mg / kg ) , Dendrobium officinale polysaccharide group ( 140mg / kg , polysaccharide containing about 130mg / kg ) , continuous administration to all mice dead ;
The wild type black flies were donated by the Chinese Academy of Traditional Chinese Medicine ( TCM ) of Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine ( Chinese Academy of Traditional Chinese Medicine ) . The flies were randomly divided into blank control group , 3 % salidrotic group , estradiol group , 1 % Dendrobium nobile juice group , 3 % dendrobium stem juice group , 9 % dendrobium stem juice group , 0.1 % Dendrobium officinale polysaccharide group , 0.3 % Dendrobium officinale polysaccharide group and 0.9 % Dendrobium officinale polysaccharide group .
( 2 ) natural aging mice : body weight , body temperature change and life observation ;
( 3 ) The effect mechanism of Dendrobium officinale " kidney tonifying , strengthening yin and replenishing essence " was preliminarily discussed from the angle of " kidney main reproduction " . The model was constructed by the same molding method as in section II of chapter III . The model was divided into two groups : D - galactose model group , estradiol group ( 0.17 mg / kg ) , Dendrobium officinale polysaccharide group ( 140mg / kg , polysaccharide about 130mg / kg ) , Dendrobium officinale polysaccharide group ( 140mg / kg , polysaccharide about 130mg / kg ) , and the same batch of blank mice as normal group .
( 2 ) Detection of mitochondrial function in uterus and ovary : ATP content , mitochondrial membrane potential analysis and mitochondria - mediated apoptosis - related genes and mitochondrial fusion protein - 2 gene expression detection ;
The results showed that Dendrobium nobile could improve the content of serum phosphorus , calcium and alkaline phosphatase and improve the content of serum phosphorus , calcium and alkaline phosphatase .
The effect of Dendrobium officinale on brain memory dysfunction caused by oxidative damage and hormone deficiency is not obvious . It is suggested that Dendrobium officinale has some effects on brain memory dysfunction caused by oxidative damage and hormone deficiency .
The results show that Dendrobium officinale has the functions of tonifying kidney and strengthening yin and replenishing essence , and can raise the uterine factor and improve the uterine contraction .
Objective To study the effect of D - galactose on the expression of Mfn2 in uterus and ovary , and to decrease the expression of Bcl - 2 / Bax .

【學(xué)位授予單位】：廣州中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R285.5;R-332

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7 本報(bào)記者 施仁潮;他讓瀕危中藥鐵皮石斛重獲新生[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2008年

8 中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì) 莊乾竹;寶寶能喝鐵皮石斛水嗎？[N];健康時(shí)報(bào);2008年

9 王英;“工廠”里種出鐵皮石斛[N];蘇州日?qǐng)?bào);2008年

10 收集整理 軍野;鐵皮石斛的文化淵源[N];世界報(bào);2008年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 孫婧;鐵皮石斛提取物及其活性成分毛蘭素對(duì)人乳腺癌細(xì)胞抑制作用的研究[D];吉林大學(xué);2016年

2 梁楚燕;基于衰老雌鼠模型探討鐵皮石斛“補(bǔ)腎”功效的科學(xué)內(nèi)涵[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2016年

3 徐程;鐵皮石斛種質(zhì)資源與組培工廠化生產(chǎn)研究[D];浙江大學(xué);2006年

4 包英華;鐵皮石斛種質(zhì)資源的鑒定與評(píng)價(jià)研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2014年

5 嚴(yán)亮;中國(guó)傳統(tǒng)蘭科藥用植物鐵皮石斛基因組及其生物學(xué)特性研究[D];吉林大學(xué);2014年

6 張澤錦;鐵皮石斛的光合碳同化途徑及其對(duì)環(huán)境變化的生理響應(yīng)[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

7 趙興兵;超微鐵皮石斛對(duì)脾虛便秘小鼠腸道微生物的影響研究[D];湖南中醫(yī)藥大學(xué);2014年

8 李標(biāo);聲波刺激對(duì)鐵皮石斛生長(zhǎng)代謝的影響及其相關(guān)基因表達(dá)和克隆研究[D];重慶大學(xué);2007年

9 滕建北;鐵皮石斛與美花石斛莖尖生長(zhǎng)機(jī)理及其多糖累積規(guī)律研究[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2009年

10 關(guān)杰敏;鐵皮石斛良種繁育與GAP種植關(guān)鍵技術(shù)研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2014年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 諸燕;鐵皮石斛種質(zhì)資源收集與評(píng)價(jià)[D];浙江農(nóng)林大學(xué);2010年

2 辛甜;組培鐵皮石斛的品質(zhì)評(píng)價(jià)研究[D];遼寧中醫(yī)藥大學(xué);2011年

3 戴燕萍;鐵皮石斛生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范研究[D];浙江農(nóng)林大學(xué);2012年

4 王俊潔;鐵皮石斛體細(xì)胞無(wú)性變異的生藥學(xué)初步研究[D];云南中醫(yī)學(xué)院;2012年

5 李東賓;冷脅迫下鐵皮石斛抗寒基因的克隆與表達(dá)研究[D];浙江農(nóng)林大學(xué);2013年

6 馮云;鐵皮石斛儲(chǔ)藏與加工特性研究[D];華南理工大學(xué);2015年

7 鄧星燕;鐵皮石斛紫外指紋圖譜研究[D];云南民族大學(xué);2015年

8 朱夢(mèng)麗;鐵皮石斛甘露糖結(jié)合凝集素的分子建模與對(duì)接研究，及NAC基因組序列的克隆[D];西南交通大學(xué);2015年

9 陳爾;鐵皮石斛組培快繁技術(shù)的優(yōu)化[D];中南林業(yè)科技大學(xué);2015年

10 任潔;鐵皮石斛組培苗培養(yǎng)及叢生芽增殖體系的建立[D];南京師范大學(xué);2015年

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本文編號(hào)：1855941