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負(fù)載人蛔蟲和豬蛔蟲抗原樹突狀細(xì)胞影響T細(xì)胞亞群活性研究

發(fā)布時(shí)間:2018-04-12 15:11

  本文選題:樹突狀細(xì)胞 + T細(xì)胞; 參考:《中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào)》2013年08期


【摘要】:目的探討人蛔蟲和豬蛔蟲抗原致敏樹突狀細(xì)胞(Dendritic Cell,DC)對(duì)T細(xì)胞亞群活性的調(diào)節(jié)作用差異。方法用IL-4和GM-CSF聯(lián)合體外誘導(dǎo)小鼠骨髓源性DC,分別負(fù)載兩種不同基因型蛔蟲抗原,由低到高各分3組,并設(shè)置空白對(duì)照進(jìn)行培養(yǎng)。負(fù)載了蛔蟲抗原的DC,按1∶25的比例分別與同源性脾淋巴細(xì)胞共培養(yǎng)。用流式細(xì)胞術(shù)、ELISA和qPCR分別檢測(cè)比較負(fù)載后DC表面分子表達(dá)變化及其混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)Th1/Th2類細(xì)胞因子表達(dá)的變化和FoxP3mRNA的表達(dá)水平。結(jié)果骨髓細(xì)胞誘導(dǎo)所得初始DC高表達(dá)表面分子CD86(85.5%)、CD83(38.24%)和CD80(94%),在負(fù)載蛔蟲抗原后,各組仍高表達(dá),但CD83和CD80較初始DC有所下降,且豬蛔蟲抗原組和人蛔蟲抗原組分別低和高于空白對(duì)照組。ELISA檢測(cè)顯示,各時(shí)間段實(shí)驗(yàn)組TNF-α的表達(dá)量都低于對(duì)照組,且差異都有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);IL-10在各組的表達(dá)量隨時(shí)間延長(zhǎng)而增加,各時(shí)間段的相同濃度除24h外,人蛔蟲抗原組高于豬蛔蟲抗原組(P0.05)。qPCR結(jié)果顯示,相對(duì)于人蛔蟲抗原組Foxp3mRNA的表達(dá)量,空白對(duì)照組和住蛔蟲抗原組各個(gè)時(shí)間段都較低,且都與前者存在差異性(P0.05);人蛔蟲抗原組的表達(dá)量在短期內(nèi)增加明顯,但又隨時(shí)間而減少;豬蛔蟲抗原組則先增后減,但都與空白對(duì)照組間無(wú)差異性(P0.05)。結(jié)論負(fù)載了人蛔蟲抗原的DC能更強(qiáng)促進(jìn)淋巴細(xì)胞Th2類反應(yīng)和Foxp3表達(dá),影響調(diào)節(jié)性T細(xì)胞功能。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of dendritic cells sensitized by human Ascaris lumbricoides and Ascaris suboides antigen on T cell subsets.Methods IL-4 and GM-CSF combination were used to induce bone marrow derived DCS in mice respectively. Two different genotypes of ascariasis antigen were loaded into three groups from low to high, and blank control was set up for culture.DCS loaded with Ascaris lumbricoides antigen was co-cultured with homologous splenic lymphocytes at 1:25.Flow cytometry (FCM) Elisa and qPCR were used to detect and compare the changes of surface molecules expression, Th1/Th2 cytokines expression and FoxP3mRNA expression level of DC after loading.Results the surface molecules CD8685.5and CD883 / 38.24) and CD80T9444 induced by bone marrow cells were still highly expressed in each group, but CD83 and CD80 were lower than those of the original DC.The expression of TNF- 偽 in the experimental group was lower than that in the control group, and the expression of IL-10 in each group was significantly higher than that in the control group, and the expression of TNF- 偽 in each group was increased with the prolongation of time, and the expression of TNF- 偽 in the experimental group was significantly lower than that in the control group, and the expression of IL-10 in the control group was significantly higher than that in the control group.The same concentration of Foxp3mRNA in human Ascaris lumbricoides antigen group was higher than that in pig Ascaris Ascaris antigen group after 24 hours. The results showed that compared with human Ascaris lumbricoides antigen group, the expression of Foxp3mRNA in blank control group and resident Ascaris antigen group was lower than that in control group.Conclusion DC loaded with human Ascaris lumbricoides antigen can promote Th2 reaction and Foxp3 expression in lymphocytes and affect the function of regulatory T cells.
【作者單位】: 江西省醫(yī)學(xué)研究院;南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(No.30960151)資助~~
【分類號(hào)】:R383

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本文編號(hào):1740268

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