本文選題：代謝綜合征　切入點：心肌梗死　出處：《天津醫(yī)科大學》2017年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：目的本實驗采用自發(fā)性高血糖(otsuka long-evans tokushima fatty,OLETF)大鼠高脂喂養(yǎng)的方法制作代謝綜合征大鼠模型,在該模型的基礎上結扎大鼠冠狀動脈分支左前降支制作代謝綜合征合并心肌梗死大鼠模型。本實驗旨在:1、建立一種更具穩(wěn)定性、更易復制且更接近臨床實際情況的代謝綜合征合并心肌梗死大鼠模型;2、從氧化應激角度研究代謝綜合征合并心肌梗死對心肌損傷的影響并探討硫氧還蛋白及硫氧還蛋白相互作用蛋白在心肌損傷過程中可能發(fā)揮的作用。方法4周齡SPF級雄性OLETF大鼠18只,同品系、同周齡、同性別對照組LETO(long-evans tokushima otsuka,LETO)大鼠18只,實驗動物總共36只,體重在170-185g之間,均購于日本大冢制藥株式會社德島研究所(日本SLC公司),于中國醫(yī)學科學院放射醫(yī)學研究所屏障環(huán)境內飼養(yǎng)。標準飼料適應性飼養(yǎng)2周后分組,即對照(N)組LETO大鼠飼繼續(xù)標準飼料喂養(yǎng),代謝綜合征(MS)組OLETF大鼠改為高脂飼料喂養(yǎng)。每周于大鼠空腹(禁食12h后)行口服葡萄糖耐量試驗(oral glucose tolerance test,OGTT);每周測收縮壓和舒張壓;每兩周稱一次體重;每兩周取內眥靜脈血,測血清總膽固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)水平,判斷造模是否成功。待MS模型建立后,采用隨機數(shù)字法將MS組和N組各分為兩組,即:MS大鼠假手術組(MS組,n=9)、MS大鼠心肌梗死組(MS-MI組,n=9);對照大鼠假手術組(Sham組,n=9)、對照大鼠心肌梗死組(MI組,n=9);分組后采用結扎心臟左前降支近端的方法制作心肌梗死模型�？紤]到MS大鼠成模率及建立心梗模型時的死亡率,另備同批次同周齡OLETF、LETO大鼠各9只同條件喂養(yǎng),必要時補足每組大鼠數(shù)量以減少誤差。超聲心動圖評價大鼠心臟功能,蘇木素-伊紅(hematoxylin eosin,HE)染色光鏡下觀察心肌形態(tài),結合炎癥評分對其炎癥反應進行半定量評估,透射電鏡下觀察心肌超微結構變化。分光光度法測定心肌組織谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、總抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、髓過氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)水平;熒光法檢測NADPH氧化酶(NOX)含量;Western blot和RT-PCR法分別檢測心梗交界區(qū)心肌組織的硫氧還蛋白(thioredoxin,TRX)和硫氧還蛋白相互作用蛋白(thioredoxin interacting protein,TXNIP)蛋白及mRNA表達。使用SPSS17.0和Graphpad Prism6.0軟件完成統(tǒng)計、分析數(shù)據(jù)并作圖。結果1、MS組和N組比較:24周齡MS組大鼠OGTT試驗結果顯示MS組大鼠各時間點血糖值及胰島素水平均高于N組(P0.05);MS組大鼠TC、TG明顯高于N組(P0.05);MS組大鼠收縮壓、舒張壓與N組相比顯著升高(P0.05)。2、MI大鼠模型左室功能超聲心動圖評價:MI組及MS-MI組大鼠左心室舒張末期內徑(LVEDD)、左心室收縮末期內徑(LVESD)較Sham組及MS組顯著增加(P0.05),左心室短軸縮短率(LVFS)、左心室射血分數(shù)(LVEF)比Sham組及MS組均顯著下降(P0.05);MS-MI組與MI組比較結果顯示LVEDD、LVESD增加更明顯(P0.05);LVFS、LVEF下降更顯著(P0.05)。3、大體標本、HE染色及炎癥半定量評估:(1)觀察大體標本顯示Sham組及MS組外觀無明顯差異,MI組及MS-MI組心肌梗死區(qū)域顏色蒼白。(2)光鏡和電鏡下Sham組無明顯變化,MS組出現(xiàn)輕微損傷,MI組及MS-MI組心肌細胞損傷明顯;炎癥評分顯示,Sham組及MS組評分差異不明顯;MI組及MS-MI組評分較Sham組及MS顯著升高(P0.05),且MS-MI組評分高于MI組(P0.05)。4、心肌組織氧化應激指標:MI組及MS-MI組抗氧化應激指標GSH、T-AOC、SOD水平較Sham組及MS組顯著下降(P0.05),氧化應激指標MPO、NOX及MDA含量較Sham組及MS組顯著升高(P0.05)。MS-MI組GSH、T-AOC、SOD水平顯著低于MI組(P0.05),而MPO、NOX及MDA含量較MI組顯著升高(P0.05)。5、心肌組織RX、TXNIP蛋白和mRNA表達:(1)Western blot結果:MI組及MS-MI組TRX蛋白表達低于Sham組及MS組,TXNIP蛋白表達高于Sham組及MS組(均P0.05);MS-MI組與MI組相比TRX蛋白表達更低,TXNIP蛋白表達更高(均P0.05)。(2)RT-PCR結果:與Sham組及MS組相比,MI組及MS-MI組TRX mRNA表達降低,TXNIP mRNA增加(均P0.05);MS-MI組較MI組TRX mRNA表達更低,TXNIP mRNA表達更高(均P0.05)。結論1、通過高脂喂養(yǎng)的方法成功建立了OLETF大鼠代謝綜合征動物模型,模型大鼠血糖、胰島素水平、血清TC、TG及血壓顯著升高。2、采用結扎MS模型大鼠心臟左前降支的方法成功建立了MS合并MI動物模型,模型大鼠左心功能明顯下降,炎癥及氧化應激水平明顯升高。3、心肌梗死時TRX對心肌的保護減弱,TXNIP對心肌的損傷增強,并且MS可通過下調TRX表達和上調TXNIP表達來加重氧化應激,進一步加重心肌損傷。
[Abstract]:The purpose of this experiment was spontaneous (Otsuka Long-Evans Tokushima Fatty high glucose, OLETF) method in high fat fed rats making rat model of metabolic syndrome, was based on the model of rat left branch of anterior descending coronary artery to make metabolic syndrome complicated with myocardial infarction model rats. This experiment aims to establish: 1. A more stable, more easy to copy and more close to the actual clinical situation of the metabolic syndrome complicated with myocardial infarction model rats; 2, from the perspective of oxidative stress metabolic syndrome complicated with myocardial infarction on myocardial infarction and explore the thioredoxin and thioredoxin interacting protein may play in myocardial injury the role of SPF. Methods 4 week old male OLETF 18 rats of the same strain, the same age, the same sex control group LETO (Long-Evans Tokushima Otsuka, LETO) 18 rats, a total of 36 animal experiments, weight 鍦，

本文編號：1575492