本文關(guān)鍵詞： 煙曲霉 二肽基肽酶Ⅴ 肽段 原核表達(dá)　出處：《臨床檢驗(yàn)雜志》2013年09期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的篩選抗原性強(qiáng)的煙曲霉二肽基肽酶Ⅴ(dipeptidyl peptidasesⅤ,DPPⅤ)肽段并進(jìn)行原核細(xì)胞表達(dá)。方法通過生物信息學(xué)分析技術(shù),從DPPⅤ全長序列中選取抗原決定簇密集的片段,采用生物合成和PCR技術(shù),獲得其肽段相應(yīng)的DNA序列,并克隆至測序載體;DNA測序驗(yàn)證后構(gòu)建重組表達(dá)質(zhì)粒,轉(zhuǎn)染原核表達(dá)宿主菌BL21(DE3),IPTG誘導(dǎo)表達(dá)后用Talon親和層析柱純化;western blot分析產(chǎn)物免疫反應(yīng)性。結(jié)果 DPPⅤ19～144p及DPPⅤ145～447p在大腸埃希菌中均以包涵體形式表達(dá),DPPⅤ19～447p以可溶性蛋白質(zhì)形式表達(dá)。western blot結(jié)果表明篩選出的DPPⅤ肽段均可與侵襲性曲霉病(IA)患者血清發(fā)生抗原抗體反應(yīng)。結(jié)論成功表達(dá)煙曲霉二肽基肽酶不同抗原決定簇分布的3個(gè)肽段,且重組片段均具有良好免疫反應(yīng)性。
[Abstract]:Objective to screen the peptide fragment of dipeptidyl peptidases 鈪，

本文編號：1516019