本文關(guān)鍵詞： 轉(zhuǎn)基因小麥 HIV 單克隆杭體 胚乳 特異表達(dá)　出處：《華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)》2013年01期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：為了建立利用小麥生產(chǎn)抗人類免疫缺陷病毒(HIV)單克隆抗體的方法,將植物胚乳特異啟動子AsGlo分別與該抗體的重鏈(HC)和輕鏈(LC)連接構(gòu)建小麥表達(dá)載體,以基因槍法轉(zhuǎn)入小麥品種揚(yáng)麥158。轉(zhuǎn)基因T0～T3代PCR鑒定表明,HC和LC在小麥基因組中共整合和穩(wěn)定遺傳。RT-PCR分析表明,IgG重鏈和輕鏈基因可在小麥胚乳中正常轉(zhuǎn)錄。酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)進(jìn)一步證實(shí)了IgG在小麥胚乳中的積累和抗原結(jié)合活性,表明IgG蛋白能夠在小麥胚乳中穩(wěn)定表達(dá),可利用小麥種子生產(chǎn)抗HIV抗體。
[Abstract]:In order to establish a method for producing monoclonal antibody against human immunodeficiency virus (HIV) in wheat. The plant endosperm specific promoter (AsGlo) was linked with the heavy chain of the antibody and the light chain respectively to construct the wheat expression vector. The wheat variety Yangmai 158was transferred by gene gunshot method. The identification of transgenic T0 / T _ 3 generation PCR showed that HC and LC were co-integrated in wheat genome and stable heredity was analyzed by RT-PCR. IgG heavy chain and light chain genes can be transcribed normally in wheat endosperm. The accumulation and antigen-binding activity of IgG in wheat endosperm were further confirmed by enzyme linked immunosorbent assay (Elisa). The results showed that IgG protein could be expressed stably in wheat endosperm and could be used to produce anti HIV antibody from wheat seeds.
【作者單位】： 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院;華中農(nóng)業(yè)大學(xué)麥類作物分子生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)室;華中農(nóng)業(yè)大學(xué)植物科學(xué)技術(shù)學(xué)院;香港大學(xué)李嘉誠醫(yī)學(xué)院微生物系艾滋病研究所;
【基金】：“863”國家高技術(shù)發(fā)展專項(xiàng)(2007AA100505) 教育部博士點(diǎn)基金項(xiàng)目(20070504010)資助
【分類號】：R392
【正文快照】： 人類免疫缺陷病毒(HIV)會造成機(jī)體終身感染,使免疫系統(tǒng)失去抵抗力,最終導(dǎo)致艾滋病(AIDS)。艾滋病的發(fā)病率逐年上升,對人類健康造成嚴(yán)重威脅,因此HIV的預(yù)防和控制備受重視。隨著生物技術(shù)的發(fā)展,利用植物生物反應(yīng)器可以生產(chǎn)疫苗、抗體等多種具有重要功能的蛋白質(zhì)。Carrillo等[1

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本文編號：1462496