本文關(guān)鍵詞：乙型肝炎病毒X蛋白抑制SFRP5啟動(dòng)子的活性　出處：《中國病理生理雜志》2013年02期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：目的:探討乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)抑制分泌型卷曲相關(guān)蛋白5(SFRP5)啟動(dòng)子活性的分子機(jī)制。方法:擴(kuò)增不同長度的SFRP5啟動(dòng)子區(qū)片段,構(gòu)建到螢光素酶報(bào)告基因載體pGL3-Basic上,并將構(gòu)建好的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入正常肝細(xì)胞系LO2細(xì)胞,再分別感染編碼HBx的腺病毒(Ad-HBx)或編碼綠色熒光蛋白的腺病毒(Ad-GFP),熒光顯微鏡下觀察病毒感染效率,檢測螢光素酶活性以觀察HBx對(duì)SFRP5啟動(dòng)子活性的影響。結(jié)果:(1)含不同長度的SFRP5啟動(dòng)子區(qū)截短突變報(bào)告質(zhì)粒構(gòu)建成功。(2)截短突變報(bào)告質(zhì)粒的螢光素酶活性與pGL3-Basic對(duì)照組相比,分別為(6.32±0.04)倍(-478 bp～+47 bp)、(5.79±0.32)倍(-811 bp～+47 bp)、(3.59±0.34)倍(-1 235 bp～+47 bp)、(3.86±0.39)倍(-1 677 bp～+47 bp)、(3.26±0.42)倍(-2 072 bp～+47 bp)(均P0.05)。過表達(dá)HBx可以明顯抑制SFRP5啟動(dòng)子活性,抑制率分別為44%(-478 bp～+47 bp)(P0.05)、46%(-811 bp～+47 bp)(P0.05)、28%(-1 235 bp～+47 bp)、24%(-1 677 bp～+47 bp)和40%(-2 072 bp～+47 bp)。結(jié)論:HBx可以明顯抑制SFRP5啟動(dòng)子區(qū)活性,可能導(dǎo)致SFRP5基因表達(dá)下調(diào)。
[Abstract]:Objective: to investigate the inhibitory effect of hepatitis B virus X protein (HBX) on secretory crimp associated protein 5 (SFRP5). Methods: SFRP5 promoter fragments of different lengths were amplified. Luciferase reporter gene vector pGL3-Basic was constructed and the constructed recombinant plasmid was transfected into normal liver cell line LO2 cells. Then the adenovirus encoding HBx (Ad-HBx) or the adenovirus encoding green fluorescent protein (Ad-GFPX) were infected respectively. The infection efficiency was observed under fluorescence microscope. Luciferase activity was detected to observe the effect of HBx on the activity of SFRP5 promoter. The luciferase activity of truncated mutant reporter plasmid was compared with that of pGL3-Basic control group. They were 6.32 鹵0.04) -478bp~ 47bp-579 鹵0.32) -811bp-47bprespectively. (3. 59 鹵0. 34) times (1 235 BP ~ 47 BP) and 3 86 鹵0 39) times (1 677 BP ~ 47 BP). The overexpression of HBx could significantly inhibit the activity of SFRP5 promoter. The inhibition rates were -478bp~ 47bpP0.05 / 46 and -811bp-47bpP0. 05 respectively. 28 ~ 1 235 BP ~ 47 BP). 1 677 BP ~ 47 BP) and 40 ~ 2 072 BP ~ 47 BP. Conclusion the activity of SFRP5 promoter can be significantly inhibited by 1: HBx. This may lead to down-regulation of SFRP5 gene expression.
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)感染性疾病分子生物學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.31171307;o.30972586)
【分類號(hào)】：R373
【正文快照】： 全世界大約有4億人感染乙型肝炎病毒(hepa-titis B virus,HBV),中國約占1/3[1]。乙型肝炎病毒屬于嗜肝DNA病毒科,全長3.2 kb,含有4個(gè)部分雙鏈的開放讀碼框,分別編碼核心蛋白、表面抗原、X蛋白以及病毒DNA聚合酶,其中乙型肝炎病毒X蛋白(hepatitis B virus X protein,HBx)的生

【參考文獻(xiàn)】

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2 李海英;張力;潘歡樂;方雅;吳建波;;Wnt信號(hào)通路在食管癌細(xì)胞放射抗拒性形成中的作用[J];中國病理生理雜志;2012年09期

【共引文獻(xiàn)】

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2 肖楚吟;潘云峰;郭興華;吳玉瓊;黃建林;古潔若;;氯化鋰對(duì)人滑膜成纖維細(xì)胞增殖影響[J];中國病理生理雜志;2010年08期

3 郭艷麗;郭煒;鄺鋼;楊植彬;董稚明;;食管鱗狀細(xì)胞癌中SFRP基因家族啟動(dòng)子區(qū)甲基化狀態(tài)的檢測[J];中國病理生理雜志;2011年02期

4 王巍;張冰;閻雪晶;王艦;張寧;趙成海;;Wnt拮抗因子SFRP1在結(jié)直腸癌發(fā)病機(jī)制中的作用[J];中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2012年05期

5 戴結(jié);劉暢;汪芳裕;;SFRP基因甲基化與消化系腫瘤相關(guān)性的研究進(jìn)展[J];世界華人消化雜志;2012年29期

6 周靜;袁偉杰;謝院生;陳香美;;siRNA沉默WT1對(duì)小鼠足細(xì)胞Wnt/β-catenin和nephrin表達(dá)的影響[J];中國病理生理雜志;2013年02期

7 王慧涵;胡榮;李迎春;趙成海;楊威;廖愛軍;劉卓剛;;SFRP5基因甲基化通過激活Wnt/β-catenin通路調(diào)節(jié)白血病細(xì)胞MDR1/P-gp的表達(dá)[J];中國病理生理雜志;2013年02期

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1 蘇華芳;萬秋燕;鄒燕;張力;李海英;景釗;吳式t;;具干細(xì)胞特性食管癌耐放射細(xì)胞株基因表達(dá)分析[J];腫瘤學(xué)雜志;2010年01期

2 郭志雷,左O,金惠銘;Wnt-frizzled信號(hào)通路與心血管疾病關(guān)系的研究進(jìn)展[J];中國病理生理雜志;2004年11期

3 陳金明;干建新;喻春釗;王沈華;伍峻松;易建華;楊檢新;周海波;;胃癌中RUNX3、cyclinE和P21蛋白表達(dá)與患者生存的關(guān)系[J];中國病理生理雜志;2006年09期

4 姚宏亮;楊竹林;李永國;劉國文;;胃癌和癌旁組織中PTTG和FHIT表達(dá)相關(guān)性及其與腫瘤侵潤、轉(zhuǎn)移的關(guān)系[J];中國病理生理雜志;2007年08期

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4 李勃;熊海燕;鄧?yán)^先;;豬血清白蛋白基因5′-端調(diào)控區(qū)的克隆與分析[J];武漢生物工程學(xué)院學(xué)報(bào);2006年02期

5 張萬里;李偉;吳川清;林學(xué)科;李航;王國斌;陶凱雄;;小鼠EDNRB基因啟動(dòng)子生物信息學(xué)分析[J];生物信息學(xué);2011年01期

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9 陶小紅!400010,任紅!400010,沈鼎明!400010,古柏燕!400010,張大志!400010,葉珈!400010;乙肝病毒X 基因真核表達(dá)載體的構(gòu)建及其表達(dá)[J];中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志;1999年05期

10 張p，

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