本文關(guān)鍵詞：分子伴侶促進(jìn)截短型人乳頭瘤病毒58亞型L1蛋白在大腸桿菌中的可溶性表達(dá)　出處：《生物技術(shù)通訊》2017年03期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：目的:采用分子伴侶pTf16共表達(dá)的形式促進(jìn)截短型人乳頭瘤病毒(HPV)58亞型L1蛋白在大腸桿菌中的可溶性表達(dá)。方法:將重組表達(dá)質(zhì)粒pGEX-6P-HPV58-L1轉(zhuǎn)入含有分子伴侶pTf16的大腸桿菌BL21感受態(tài)細(xì)胞中,在2.0 mg/mL L-阿拉伯糖誘導(dǎo)表達(dá)20 min之后加入1.0 mmol/L的IPTG,18℃誘導(dǎo)表達(dá)24 h,使目的蛋白與伴侶蛋白共表達(dá);重組蛋白經(jīng)GST親和純化后去除GST標(biāo)簽免疫昆明鼠,ELISA檢測免疫血清效價(jià)。結(jié)果:分子伴侶pTf16能顯著提高目的蛋白的可溶性表達(dá),經(jīng)純化及去除GST標(biāo)簽,用SDS-PAGE與Western印跡檢測,約在相對分子質(zhì)量50×103處出現(xiàn)特異性反應(yīng)條帶,該條帶與截短型HPV58 L1蛋白預(yù)期大小相符,免疫動物后經(jīng)ELISA檢測小鼠血清的抗體效價(jià)為1∶6400。結(jié)論:獲得了截短型HPV58 L1蛋白,動物免疫試驗(yàn)證實(shí)該蛋白具有較好的免疫原性,為進(jìn)一步研制HPV58預(yù)防型疫苗奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:Objective: to promote truncated human papillomavirus (HPV) by coexpression of molecular chaperone pTf16. Soluble expression of 58 subtype L1 protein in Escherichia coli. Methods:. The recombinant expression plasmid pGEX-6P-HPV58-L1 was transferred into Escherichia coli BL21 competent cells containing molecular chaperone pTf16. The expression was induced by 2.0 mg/mL L-arabinose for 20 min, then the expression was induced at 18 鈩，

本文編號：1365789