本文關(guān)鍵詞：依賴FMN的硝基還原酶Rv3368c的晶體結(jié)構(gòu)學(xué)和功能學(xué)研究　出處：《山東大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 結(jié)核分枝桿菌 硝基還原酶 結(jié)合實(shí)驗(yàn) 位點(diǎn)突變 酶活實(shí)驗(yàn)

【摘要】：結(jié)核分枝桿菌是人類重要的致病細(xì)菌,可導(dǎo)致結(jié)核病。Rv3368c是結(jié)核分枝桿菌H37Rv中的一種硝基還原酶。Rv3368c硝基還原酶是一類以FMN為輔基而且依賴NADPH的黃素蛋白,能夠?qū)⒑邢趸鶊F(tuán)的底物進(jìn)行還原,在生物修復(fù)和前藥激活方面具有良好的應(yīng)用前景。我們利用NCBI提供的Rv3368c基因序列設(shè)計(jì)引物,將大腸桿菌進(jìn)行PCR擴(kuò)增獲得目的基因后,將其克隆到PSUMHO載體上,轉(zhuǎn)化到BL21(DE3)大腸桿菌中,經(jīng)過(guò)對(duì)表達(dá)純化條件優(yōu)化,獲得重組蛋白。我們利用硒代甲硫氨酸的方法首次獲得Rv3368c蛋白的結(jié)構(gòu),并通過(guò)ITC結(jié)合實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證Rv3368c和小分子FMN有較強(qiáng)的結(jié)合,通過(guò)浸泡實(shí)驗(yàn)得到了 Rv3368c-FMN的復(fù)合物結(jié)構(gòu)。進(jìn)而與FMN結(jié)合相關(guān)殘基的突變進(jìn)行分析,確定了 18Arg、157Trp、202Arg殘基對(duì)FMN結(jié)合的重要性。BTZ043是一種新型的的治療結(jié)核病的藥物,通過(guò)酶活實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證Rv3368c可以對(duì)底物BTZ043進(jìn)行作用催化。雖然Rv3368c的生物學(xué)功能和催化機(jī)制還需要進(jìn)一步探索,但I(xiàn)TC結(jié)合實(shí)驗(yàn)和酶活實(shí)驗(yàn)在幫助我們理解Rv3368c的工作機(jī)制中是非常有意義的。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R378.911

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 ;檢測(cè)硝基還原酶及細(xì)胞缺氧的新型熒光探針[J];分析化學(xué);2013年06期

2 滕隔玲;楊業(yè)鵬;李載權(quán);周梅;李五嶺;;硝基還原酶/CB1954自殺基因系統(tǒng)對(duì)宮頸癌Hela細(xì)胞殺傷效應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究[J];現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué);2009年08期

3 聶新民,周鳴,唐珂,張必成,向娟娟,熊煒,呂紅斌,李小玲,李桂源;一個(gè)與化學(xué)因素致鼻咽癌相關(guān)的硝基還原酶基因的克隆與鑒定(英文)[J];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2003年04期

相關(guān)會(huì)議論文 前1條

1 陳潔;戴榮繼;佟斌;孟薇薇;;硝基還原酶催化還原對(duì)-硝基苯酚的研究[A];中國(guó)化學(xué)會(huì)第二十五屆學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集（上冊(cè)）[C];2006年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 謝波;鏈霉菌催化芳香硝基還原及其關(guān)鍵酶的分離與克隆表達(dá)[D];大連理工大學(xué);2010年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前5條

1 劉培瑜;大腸桿菌硝基還原酶可控合成芳香羥胺的性質(zhì)研究[D];大連理工大學(xué);2015年

2 楊智雅;依賴FMN的硝基還原酶Rv3368c的晶體結(jié)構(gòu)學(xué)和功能學(xué)研究[D];山東大學(xué);2017年

3 薛章榮;微生物源硝基還原酶催化化學(xué)單元反應(yīng)的研究[D];華東理工大學(xué);2011年

4 阮陳孝輝（Nguyen Tran Hieu Huy）;硝基還原酶的資源挖掘及其在芳香羥胺可控合成中的應(yīng)用研究[D];華東理工大學(xué);2014年

5 丁朋舉;分枝桿菌系統(tǒng)進(jìn)化及其硝基還原酶基因克隆表達(dá)[D];河南工業(yè)大學(xué);2013年

，

本文編號(hào)：1355284