本文關(guān)鍵詞：BslA蛋白在減毒炭疽芽孢桿菌中的表達(dá)和功能分析　出處：《軍事醫(yī)學(xué)》2013年05期 　論文類型：期刊論文

  更多相關(guān)文章： 芽孢桿菌 炭疽 BslA蛋白 表達(dá) 細(xì)菌黏附

【摘要】：目的在減毒炭疽芽孢桿菌AP422中表達(dá)BslA蛋白,并分析其生物學(xué)活性。方法利用PCR方法從炭疽芽孢桿菌中擴(kuò)增出bslA基因,克隆至穿梭質(zhì)粒pDG148,采用電轉(zhuǎn)化方法將表達(dá)載體轉(zhuǎn)入減毒炭疽芽孢桿菌AP422后誘導(dǎo)表達(dá)重組BslA。并利用SDS-PAGE電泳、Western印跡、間接免疫熒光實(shí)驗(yàn)和流式細(xì)胞術(shù)分析目標(biāo)蛋白的表達(dá),并對(duì)其進(jìn)行空間定位,最后用細(xì)菌黏附實(shí)驗(yàn)分析其生物學(xué)功能。結(jié)果 BslA蛋白在AP422中獲得成功表達(dá),且目標(biāo)蛋白主要表達(dá)于菌體表面。表達(dá)BslA蛋白的AP422(pDG-BslA)菌株具有黏附宿主細(xì)胞表面的能力,該黏附能力與陽性對(duì)照A16R菌株基本一致。結(jié)論在減毒炭疽芽孢桿菌AP422中實(shí)現(xiàn)了BslA蛋白的功能性表達(dá),為進(jìn)一步研究該蛋白的功能和構(gòu)建新的疫苗候選株奠定了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
【作者單位】： 沈陽藥科大學(xué)生命科學(xué)與生物制藥學(xué)院;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院生物工程研究所病原微生物生物安全國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【分類號(hào)】：R378.7
【正文快照】： 炭疽芽孢桿菌S層蛋白A(B.anthracis S-layer protein A,BslA蛋白)是炭疽芽孢桿菌S層的組成部分,既是一種S層蛋白,又是一種黏附素。BslA由位于毒力大質(zhì)粒pXO1中的pXO1-90基因編碼,共652個(gè)氨基酸殘基。BslA蛋白N端45～210位氨基酸殘基之間是3個(gè)連續(xù)的保守SLH基序(surface layer

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