微小RNA-486在造血細(xì)胞紅系分化中的表達(dá)研究
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【摘要】:目的微小RNA(microRNA,miRNA)參與造血干細(xì)胞增殖分化的調(diào)節(jié)。微小RNA-486(microRNA-486,miR-486)是人胎肝組織中表達(dá)豐度較高的miRNA,但其在造血細(xì)胞分化的表達(dá)及其對(duì)分化的調(diào)控作用并不清楚。本研究旨在觀察miR-486在造血細(xì)胞分化中的表達(dá)變化及調(diào)控。方法利用實(shí)時(shí)定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-QPCR)方法檢測(cè)了小鼠各組織miR-486的表達(dá)情況。分離人臍帶血CD34+細(xì)胞,并在含有不同造血生長(zhǎng)因子組合的培養(yǎng)體系中進(jìn)行分化誘導(dǎo):利用流式細(xì)胞儀檢測(cè)造血細(xì)胞分化效率,并用RT-QPCR檢測(cè)miR-486的表達(dá)。采用慢病毒介導(dǎo)的GATA1沉默策略抑制CD34+細(xì)胞的紅系分化并檢測(cè)miR-486的表達(dá)。結(jié)果 RT-QPCR檢測(cè)了miR-486在正常小鼠各組織的表達(dá)情況,證明其在造血細(xì)胞中表達(dá)量最高。在臍帶血CD34+細(xì)胞的體外定向誘導(dǎo)分化過程中,隨著細(xì)胞向紅系分化,miR-486表達(dá)增高。慢病毒介導(dǎo)的GATA1-小發(fā)夾RNA(shRNA)轉(zhuǎn)染能夠沉默臍帶血CD34+細(xì)胞GATA1的表達(dá),并阻斷其向紅系分化,同時(shí),miR-486的表達(dá)水平也明顯降低。結(jié)論 miR-486是一種與紅系造血分化密切相關(guān)的miRNA。
【作者單位】: 安徽醫(yī)科大學(xué);軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射與輻射醫(yī)學(xué)研究所;
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81170460)
【分類號(hào)】:R331.2
【正文快照】: 人胎肝組織是造血增殖分化最旺盛的組織之一。胎肝組織中高豐度微小RNA(microRNA,miRNA)很有可能參與造血生成過程的調(diào)節(jié)。付漢江等[1]首先利用經(jīng)典方法在人胎肝組織中鑒定了微小RNA-486(microRNA-486,miR-486)。miR-486基因組學(xué)分析表明其基因(Gene ID:619554)位于8號(hào)染色體
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,本文編號(hào):1272598
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