本文關(guān)鍵詞：Exendin-4對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激損傷的拮抗作用

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【摘要】：目的研究exendin-4(Ex-4)對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)凋亡的拮抗作用。方法 RPMI1640培養(yǎng)基培養(yǎng)HUVECs,待細(xì)胞長到培養(yǎng)瓶底部80%左右后,分4組干預(yù)細(xì)胞,每組8瓶,共32瓶。實(shí)驗分組:①正常對照組(n=8):不做任何處理;②Ex-4組(n=8):(Ex-4,8μg/mL,45 min);③EPBS組(n=8):(EPBS,100μL/mL,30 min);④雙藥組(n=8):Ex-4預(yù)處理(8μg/mL,45 min),后加EPBS(100μL/mL,30 min)。免疫熒光法檢測確認(rèn)HUVECs上存在胰高血糖素樣肽-1受體(glucagon-like peptide-1 receptor,GLP-1R);內(nèi)源性過氧化氫酶抑制物(endogenous peroxidase blocking solution;EPBS)誘導(dǎo)HUVECs的凋亡,流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡率變化;加入Ex-4預(yù)處理后,觀察EPBS誘導(dǎo)HUVECs凋亡率的變化。Western blot檢測細(xì)胞Calnexin、(C/EBP homologous protein,CHOP)和Bax表達(dá)情況,探討內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)凋亡的機(jī)制。結(jié)果①HUVECs上有GLP-1受體表達(dá);②與正常對照組相比,EPBS組HUVECs的凋亡率顯著增加[(52.27±3.66)%vs(7.25±0.62)%,P0.01)];與EPBS組比較,Ex-4的預(yù)處理可明顯降低EPBS誘導(dǎo)的HUVECs凋亡[(37.77±2.86)%vs(52.27±3.66)%,P0.01)]。與正常對照組相比,EPBS能增加Calnexin[(1.76±0.16)vs(1.00±0.05),P0.01]、CHOP[(4.58±0.32)vs(1.00±0.12),P0.01]和Bax[(2.25±0.10)vs(1.00±0.06),P0.01]的表達(dá);與EPBS組比較,Ex-4的預(yù)處理可顯著降低Calnexin[(0.42±0.05)vs(1.76±0.16),P0.01]、CHOP[(0.64±0.10)vs(1.65±0.12),P0.01]和Bax[(1.48±0.08)vs(2.25±0.10),P0.01)]的表達(dá)。結(jié)論 Ex-4對EPBS誘導(dǎo)的HUVECs凋亡有明顯抑制作用,其抑制作用可能與EX-4減少內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白Calnexin、CHOP和Bax相關(guān)。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院心血管內(nèi)科;
【分類號】：R363
【正文快照】： 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(ER Stress,ERS)可誘導(dǎo)多種細(xì)胞凋亡[1-2],內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分子伴侶鈣聯(lián)蛋白(Calnexin,CLNX)在ERS的促凋亡效應(yīng)中起重要作用[3-4]。C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)是一種內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相關(guān)促凋亡蛋白,發(fā)揮轉(zhuǎn)錄因子的作用,參與調(diào)控生存、死亡相關(guān)基因的表達(dá)[5]。Bax是

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