本文關鍵詞：shRNA特異性靜默大鼠肺泡巨噬細胞TLR2基因對染塵大鼠肺纖維化的抑制作用

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【摘要】：目的構建表達大鼠TLR2的shRNA慢病毒載體,并研究其在染塵大鼠肺組織內對巨噬細胞功能的抑制效應。方法設計并構建具有干擾效力的shRNA表達質粒,篩選出對TLR2干擾效果最好的一段序列,使用Gateway方法重組到慢病毒表達載體中進行包裝,采用包裝好的慢病毒感染大鼠肺泡巨噬細胞系NR8383,ELISA法檢測TGF-β1、IL-1β、IL-6的表達情況;而后,在大鼠矽肺模型中引入TLR2慢病毒載體,觀察矽肺發(fā)生和進展情況。結果成功篩選出具有良好TLR2表達干擾效果的shRNA,并成功包裝入慢病毒,慢病毒滴度為1.0×106TU/ml,轉染慢病毒的肺泡巨噬細胞釋放TGF-β1、IL-1β、IL-6均顯著減少(P0.05);轉導了干擾病毒載體的矽肺大鼠,其矽肺發(fā)生發(fā)展受抑情況均優(yōu)于對照組。結論成功構建了表達大鼠TLR2 shRNA的慢病毒,具有良好的抑制TGF-β1、IL-1β、IL-6功能,并能有效抑制矽肺的發(fā)生發(fā)展,揭示TLR2可能成為治療肺纖維化的潛在靶點。
【作者單位】： 同濟大學附屬上海市肺科醫(yī)院;第二軍醫(yī)大學研管大隊臨床十隊;第二軍醫(yī)大學免疫學教研室;
【分類號】：R363
【正文快照】： 一般認為,SiO2粉塵長期刺激肺泡,引發(fā)慢性肺泡炎癥,導致肺泡巨噬細胞(alveolar macrophage,AM)分泌多種細胞因子和炎性介質,作用于肺間質細胞和成纖維細胞,促使成纖維細胞大量增殖和膠原沉積[1～3]。因此作為塵肺的重要啟動細胞,AM觸發(fā)炎癥應答的作用一直受到重視[4]。Toll樣

【共引文獻】

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1 翁少凡;鐵礦接塵工人塵肺發(fā)病及死因的隊列研究[D];華中科技大學;2012年

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1 薛一雪,高驥援;SiO_2對體外培養(yǎng)大鼠肺泡巨噬細胞MDA生成的觀察[J];中國醫(yī)科大學學報;1989年04期

2 王力珩;;試驗性矽肺肺泡巨噬細胞對肺成纖維細胞增殖的調節(jié)[J];國外醫(yī)學.衛(wèi)生學分冊;1985年04期

3 周立人;段瑩瑩;陳躍進;;粉塵對肺泡巨噬細胞超微結構及功能影響的研究(摘要)[J];蘇州大學學報(醫(yī)學版);1985年01期

4 王之賢;祝品金;張留保;陳德蕙;;大鼠實驗矽肺的超微結構改變[J];軍事醫(yī)學科學院院刊;1983年02期

5 潘云;胡福定;嚴忠馥;郭壽延;;肺泡巨噬細胞在肺損傷機理中的作用[J];云南醫(yī)藥;1993年06期

6 陳非，，鄧鴻業(yè)，丁桂風，鄧玉蘭，黃大無，龍振洲;矽肺大鼠肺泡MΦ上清中生長因子的分離純化[J];免疫學雜志;1994年01期

7 張尚明,羅玲,戶萬秘,曹兆豐,徐建余;肺泡巨噬細胞培養(yǎng)上清液對肺成纖維細胞的作用[J];中華勞動衛(wèi)生職業(yè)病雜志;1997年04期

8 郭維新;李國華;鄭書勤;汪家梨;蘆秀卿;;矽肺大鼠脂質過氧化及抗氧化酶活性的動態(tài)觀察[J];福建醫(yī)科大學學報;1990年01期

9 陳非,鄧鴻業(yè),丁桂風,鄧玉蘭,龍振州;染矽塵大鼠肺泡巨噬細胞胰島素樣生長因子的研究[J];中華勞動衛(wèi)生職業(yè)病雜志;1993年05期

10 陳新石;卡介苗刺激的肺泡巨噬細胞上清液對肺成纖維細胞的作用[J];中華醫(yī)學信息導報;1995年05期

中國重要會議論文全文數據庫 前10條

1 錢小順;朱慶磊;楊潔;尹彤;丁秀云;王士雯;;老齡對大鼠多器官衰竭模型肺泡巨噬細胞炎癥反應的影響[A];第七屆全國老年醫(yī)學學術會議暨海內外華人老年醫(yī)學學術會議論文匯編[C];2004年

2 黃翠萍;楊和平;;p38蛋白激酶對脂多糖誘導肺泡巨噬細胞NF-κB活化的調控[A];中華醫(yī)學會第七次全國呼吸病學術會議暨學習班論文匯編[C];2006年

3 劉永平;管茶香;白洪波;劉惠君;張長青;;降鈣素基因相關肽下調LPS誘導肺泡巨噬細胞MMP-9的表達及機制探討[A];湖南省生理科學學會2004年度學術年會論文摘要匯編[C];2004年

4 尚利宏;羅自強;鄧小丹;岳少杰;;NMDA誘導的大鼠肺泡巨噬細胞TNF-α的變化[A];全國圍產醫(yī)學專題學術研討會論文匯編[C];2007年

5 張艷淑;姚林;李清釗;劉英莉;徐應軍;王廣增;趙伯陽;Arthur H.K Djang;;Oncolyn對石英粉塵所致肺泡巨噬細胞氧化損傷的緩解作用[A];新世紀預防醫(yī)學面臨的挑戰(zhàn)——中華預防醫(yī)學會首屆學術年會論文摘要集[C];2002年

6 譚波;王興勇;許峰;盧仲毅;;MODS大鼠模型的建立及其發(fā)病機制[A];中華醫(yī)學會第十四次全國兒科學術會議論文匯編[C];2006年

7 孫樹勛;付定一;周珍;李繼倫;廉樂賢;王志明;;吸入煤塵顆粒對大鼠體內肺泡區(qū)噬細胞的影響[A];第六次全國電子顯微學會議論文摘要集[C];1990年

8 李云超;管茶香;孫國瑛;陳雨絲;黃禾;唐春燕;鄒麗蘋;;肺內調節(jié)肽對LPS誘導肺泡巨噬細胞TREM-1表達的影響[A];湖南省生理科學會2008年度學術年會論文摘要匯編[C];2008年

9 孟愛宏;;p38MAPK和STAT3在LPS刺激小鼠肺泡巨噬細胞中的作用[A];中國病理生理學會第九屆全國代表大會及學術會議論文摘要[C];2010年

10 胡建利;;過氯酸銨對肺泡巨噬細胞作用的實驗研究[A];第三屆廣西青年學術年會論文集（自然科學篇）[C];2004年

中國博士學位論文全文數據庫 前10條

1 曹蕾;發(fā)育肺炎癥損傷和信號傳導途徑的研究[D];復旦大學;2004年

2 王世鑫;二氧化硅粉塵致肺纖維化機制及早期生物標記物研究[D];重慶大學;2004年

3 王萬宗;體外三維培養(yǎng)條件下轉化生長因子β1基因轉染的兔骨髓間充質干細胞促成軟骨細胞分化的實驗研究[D];第二軍醫(yī)大學;2006年

4 韓曉男;實驗性肺氣腫、肺動脈高壓發(fā)病機理及中藥814防治的進一步研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2000年

5 湯旭日;低強度脈沖式超聲波（LIPU）對體外兔BMSCs的生物學效應及作用機制研究[D];第二軍醫(yī)大學;2008年

6 喬俊華;大鼠煤工塵肺動物模型的研究[D];吉林大學;2009年

7 張增峰;人呼吸道甲型流感病毒受體的分布和感染H5N1流感病毒的病理變化[D];汕頭大學;2007年

8 劉海峰;Ku80在石英致DNA雙鏈斷裂修復的DNA-PK/JNK信號轉導通路中的作用[D];中國疾病預防控制中心;2010年

9 黃宏;細菌內毒素、脂蛋白、DNA的協(xié)同效應研究[D];第三軍醫(yī)大學;2004年

10 許順江;CCK-8抗炎作用的受體及信號轉導機制的研究[D];河北醫(yī)科大學;2004年

中國碩士學位論文全文數據庫 前10條

1 李宏云;脂多糖誘導大鼠肺泡巨噬細胞NF-κB活化及TNF-α 釋放的實驗研究[D];鄭州大學;2003年

2 孫佳寅;堿性成纖維細胞生長因子在鼠矽肺纖維化過程中作用的研究[D];暨南大學;2004年

3 董�，�;大鼠肺泡巨噬細胞ERG鉀通道的表達及其功能的初步研究[D];第三軍醫(yī)大學;2009年

4 姜昌麗;人TGFβ1自體疫苗的構建及其免疫原性的鑒定[D];第四軍醫(yī)大學;2006年

5 楊琴;TNF-α、IL-1β誘導人角質形成細胞β防御素表達的實驗研究[D];山西醫(yī)科大學;2008年

6 上官志敏;應用TGF-β_1從rhG-CSF動員的外周血采集物中誘導產生CD4+CD25+調節(jié)性T細胞[D];安徽醫(yī)科大學;2009年

7 王應莉;人轉化生長因子β1RNA干擾真核表達載體的構建[D];昆明醫(yī)學院;2007年

8 周敏;重度煙霧吸入后大鼠的免疫應答對肺損傷以及MOF的影響及其機制的初步探討[D];安徽醫(yī)科大學;2006年

9 于珊玲;TGF-β_1、MMP-2、TIMP-1在百草枯染毒大鼠肺組織中的表達及丹參單體IH764-3對其表達的影響[D];河北醫(yī)科大學;2007年

10 張連霞;GM-CSF對肥大細胞蛋白酶激活受體表達和介質分泌的影響及其信號轉導通路探討[D];汕頭大學;2008年

本文編號：1231872