本文關(guān)鍵詞：EDTA法純化成年大鼠許旺細(xì)胞的實驗研究

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【摘要】：目的探討乙二醇-雙-(2-氨基乙醚)四乙酸(EDTA)純化成年大鼠許旺細(xì)胞的可行性。方法取SD成年大鼠的雙側(cè)坐骨神經(jīng),高倍顯微鏡下剝除神經(jīng)外膜及束膜。復(fù)合膠原酶NB4消化30 min,600g離心去除上清液。加入含神經(jīng)生長因子的培養(yǎng)液,置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中預(yù)變性1周。胰蛋白酶消化預(yù)變性的神經(jīng)獲得原代細(xì)胞。培養(yǎng)至亞融合狀態(tài),EDTA-PBS溶液作用3 min,顯微鏡下觀察許旺細(xì)胞的變化。離心去上清,加入許旺細(xì)胞培養(yǎng)液懸浮,種植于培養(yǎng)瓶,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。培養(yǎng)至亞融合,P75免疫熒光法檢測許旺細(xì)胞的純度。結(jié)果通過兩次EDTA法純化,許旺細(xì)胞純度已經(jīng)達到99%以上。結(jié)論 EDTA可以高效純化成年大鼠的許旺細(xì)胞。
【作者單位】： 山東醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校內(nèi)科學(xué)教研室;
【分類號】：R329.28
【正文快照】： 許旺細(xì)胞作為外周神經(jīng)的膠質(zhì)細(xì)胞,不僅支持、營養(yǎng)和保護神經(jīng)軸突,在周圍神經(jīng)損傷修復(fù)與再生過程中也起著非常重要的作用[1-2]。構(gòu)建組織工程神經(jīng)導(dǎo)管、細(xì)胞移植治療神經(jīng)損傷及許旺細(xì)胞的分子生物學(xué)研究需要大量高純度的許旺細(xì)胞,但是許旺細(xì)胞在體外分離培養(yǎng)過程中,容易混雜成

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