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ICAM-1編碼基因對乙型腦炎DNA疫苗樹突狀細胞功能的影響

發(fā)布時間:2017-11-24 01:13

  本文關鍵詞:ICAM-1編碼基因對乙型腦炎DNA疫苗樹突狀細胞功能的影響


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【摘要】:目的:研究細胞間粘附分子1(ICAM-1)編碼基因對日本腦炎(JE)DNA疫苗脾臟樹突狀細胞功能的影響。方法:套式RT-PCR法獲取BALB/c鼠ICAM-1編碼基因,構建重組子pJME/ICAM-1和pICAM-1,脂質體法轉染上述質粒于CHO細胞,Western blot法檢測轉染的CHO細胞中目的蛋白表達。實驗分5組,包括:pJME/ICAM-1、pJME+PICAM-1、pJME、JE滅活疫苗和pcDNA3.1(+)免疫組,以不同免疫原肌注免疫BALB/c小鼠,流式細胞儀檢測經不同免疫原免疫鼠后脾臟DC表型、抗原吞噬功能以及混合淋巴細胞反應。結果:融合表達重組質粒pJME/ICAM-1和單質粒pICAM-1經鑒定構建正確。pJME/ICAM-1組CD11c+CD86+DC和CD11c+ICAM-1+DC比例分別為(6.92±1.40)%、(7.18±0.57)%,高于其它免疫組(均P0.05);pJME/ICAM-1和pJME+pICAM-1組DC表面CD80和MHCⅡ表達水平比較差異無統(tǒng)計學意義(P0.05);pJME/ICAM-1與pJME+pICAM-1組內吞能力明顯增強,平均熒光強度分別為437.11±47.60、416.67±29.12,顯著高于其它組(P0.05)。比較不同免疫原對細胞分裂的作用,以pJME/ICAM-1組最強,(73.69±7.32)%CD4+T細胞發(fā)生分裂,(45.40±2.57)%CD8+T細胞發(fā)生分裂,顯著高于對照組(P0.05)。結論:ICAM-1編碼基因能夠促進JE DNA疫苗脾臟樹突狀細胞的成熟,能夠提供獨立或放大B7分子的協(xié)同刺激信號。
【作者單位】: 中國醫(yī)科大學附屬盛京醫(yī)院感染科;
【基金】:國家自然科學基金資助項目(30471547) 遼寧省自然科學基金資助項目(20042072) 遼寧省教育廳基礎研究計劃資助項目(05L498) 遼寧省教育廳高�?蒲谢鹳Y助項目(L2010589)
【分類號】:R392.4
【正文快照】: 日本腦炎(Japanese encephalitis,JE)DNA疫苗誘導的細胞免疫和體液免疫仍達不到預期效果,一系列措施用來增強JE DNA疫苗的免疫效果[1]。目前越來越多的研究表明,樹突狀細胞(Dendriticcells,DCs)是DNA疫苗免疫應答的中心環(huán)節(jié),質粒DNA可直接轉染注射部位抗原提呈細胞,質粒DNA直

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