本文關(guān)鍵詞：不同參數(shù)滾壓模式對(duì)兔BMSCs向軟骨細(xì)胞分化促進(jìn)作用的研究

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【摘要】：目的觀察在不同滾壓參數(shù)下,滾壓載荷生物反應(yīng)器對(duì)BMSCs-瓊脂糖復(fù)合體中兔BMSCs向軟骨細(xì)胞誘導(dǎo)分化的作用。方法分離2.5月齡新西蘭兔BMSCs,培養(yǎng)至第3代后與低熔點(diǎn)瓊脂糖復(fù)合成凝膠塊,并在自制模具中形成直徑4 mm、高4 mm的圓柱形BMSCs-瓊脂糖復(fù)合體。將樣本分別在0.4 Hz、3 h/d基本參數(shù)下比較壓縮量10%、20%、30%(分別為A1、A2、A3組),以及0.4 Hz、20%壓縮量基本參數(shù)下比較20 min、3 h、12 h滾壓時(shí)間(分別為B1、B2、B3組)對(duì)BMSCs向軟骨細(xì)胞分化的作用,以靜態(tài)培養(yǎng)作為對(duì)照組。在培養(yǎng)24 h及7、14、21 d時(shí)取各組標(biāo)本進(jìn)行死活細(xì)胞檢測(cè)、實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)、糖胺聚糖(glycosaminoglycan,GAG)含量檢測(cè)及組織學(xué)染色觀察。結(jié)果死活細(xì)胞檢測(cè):14、21 d時(shí),A1、A2組活細(xì)胞比率均顯著高于A3組,B1、B2組活細(xì)胞比率均顯著高于B3組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè):各實(shí)驗(yàn)組7、14、21 dⅡ型膠原及蛋白聚糖(Aggrecan)mRNA表達(dá)均高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);14、21 d時(shí),A1、A2組Ⅱ型膠原、Aggrecan mRNA表達(dá)均高于A3組,B1、B2組均高于B3組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。以上指標(biāo)A1、A2組間及B1、B2組間比較,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。GAG含量檢測(cè):14、21 d時(shí),A1、A2組GAG含量均顯著高于對(duì)照組和A3組,B1、B2組GAG含量也顯著高于對(duì)照組和B3組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);21 d時(shí)A1、A2組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.830,P=0.027)。組織學(xué)觀察:21 d時(shí),A2組和B2組出現(xiàn)明顯藍(lán)染,可見(jiàn)軟骨陷窩樣結(jié)構(gòu);而A1、A3組和B1、B3組藍(lán)染效果較差,分布稀少。結(jié)論滾壓載荷生物反應(yīng)器在0.4 Hz、20%壓縮量、3 h滾壓時(shí)間參數(shù)下,能更有效地促進(jìn)BMSCs-瓊脂糖復(fù)合體中兔BMSCs向軟骨細(xì)胞誘導(dǎo)分化。
【作者單位】： 武警后勤學(xué)院附屬醫(yī)院骨科;天津理工大學(xué)機(jī)械工程學(xué)院;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(11072087、11172208) 天津市自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(09JCYBJC1400)~~
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 由于關(guān)節(jié)軟骨缺乏血管和神經(jīng)分布,關(guān)節(jié)軟骨損傷后的再生能力很弱,至今臨床上未能完全修復(fù)受損的關(guān)節(jié)軟骨[1]。BMSCs來(lái)源于骨髓,它具有多向分化潛能,在一定的局部力學(xué)及生化環(huán)境下可以分化為軟骨細(xì)胞、成骨細(xì)胞等[2]。BMSCs同時(shí)具有易獲得的特性,成為軟骨組織工程研究的熱點(diǎn)種

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本文編號(hào)：1203230