本文關(guān)鍵詞：布魯氏菌部分毒力相關(guān)調(diào)控因子免疫原性檢測(cè)與保護(hù)性評(píng)價(jià)

  更多相關(guān)文章： 布魯氏菌 轉(zhuǎn)錄因子 細(xì)胞免疫原性 疫苗

【摘要】：目的檢測(cè)部分布魯氏菌毒力相關(guān)調(diào)控因子刺激機(jī)體產(chǎn)生細(xì)胞免疫反應(yīng)的能力,并對(duì)具有細(xì)胞免疫原性蛋白的免疫保護(hù)性進(jìn)行初步評(píng)價(jià)。方法利用Gateway的方法將9個(gè)布魯氏菌毒力相關(guān)轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子克隆至表達(dá)載體pHXGWA上并利用Ni-NAT層析的方法純化重組蛋白。構(gòu)建布魯氏菌疫苗株S19株免疫的BALB/c小鼠模型,免疫35d后分離小鼠脾細(xì)胞并用體外重組蛋白再刺激,ELISA方法檢測(cè)蛋白體再刺激后小鼠脾細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子IFN-γ水平,了解毒力相關(guān)調(diào)控因子刺激機(jī)體產(chǎn)生細(xì)胞免疫反應(yīng)情況。以CpG-ODN為免疫佐劑,用具有細(xì)胞免疫活性蛋白免疫小鼠,觀察對(duì)布魯氏菌強(qiáng)毒株544攻擊感染的免疫保護(hù)作用。結(jié)果 7個(gè)布魯氏菌毒力相關(guān)調(diào)控因子在大腸埃希菌中得以表達(dá)。其中BMEⅠ1573及BMEⅡ0475再刺激下S19免疫小鼠脾細(xì)胞產(chǎn)生的IFN-γ水平高于PBS對(duì)照小鼠。而在以CpG-ODN為免疫佐劑時(shí),兩者均不具有免疫保護(hù)性。結(jié)論布魯氏菌LysR家族及GntR家族的轉(zhuǎn)錄因子BMEⅠ1573及BMEⅡ0475具有細(xì)胞免疫原性,初步檢測(cè)無免疫保護(hù)作用。
【作者單位】： 湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬人民醫(yī)院感染性疾病科;湖北醫(yī)藥學(xué)院微生物教研室;
【基金】：湖北省衛(wèi)生廳青年科技人才項(xiàng)目(No.QJX2010-24) 湖北省教育廳重點(diǎn)項(xiàng)目(No.D20122407)
【分類號(hào)】：R392
【正文快照】： 布魯氏菌病是由布魯氏菌引起的能夠在人和動(dòng)物中傳播的一類人獸共患病,近幾年發(fā)病人數(shù)有所增加[1,2]。亞單位疫苗是布魯氏菌疫苗研究的一個(gè)重要方向。布魯氏菌為胞內(nèi)寄生菌,細(xì)菌侵入機(jī)體后能夠進(jìn)入單核巨噬細(xì)胞系并在其吞噬溶酶體里繁殖。因此像許多其他胞內(nèi)菌一樣,細(xì)胞介導(dǎo)的

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本文編號(hào)：1173193