本文關(guān)鍵詞：人水甘油通道蛋白9重組質(zhì)粒的構(gòu)建及表達(dá)

  更多相關(guān)文章： 水甘油通道蛋白 非酒精性脂肪肝病 重組質(zhì)粒

【摘要】：目的:構(gòu)建人水甘油通道蛋白9(aquaglyceroporin9,AQP9)重組質(zhì)粒,并檢測其融合蛋白在真核細(xì)胞COS-7中的表達(dá),為闡明AQP9在非酒精性脂肪肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)中的作用奠定基礎(chǔ)。方法:通過RT-PCR方法從人肝臟組織中獲得AQP9基因,插入pEGFP-N1質(zhì)粒,構(gòu)建重組質(zhì)粒pEGFP-N1-AQP9,轉(zhuǎn)染COS-7細(xì)胞,通過熒光顯微鏡檢測其轉(zhuǎn)染情況,RT-PCR和Western blot檢測AQP9在真核細(xì)胞中的表達(dá)。結(jié)果:PCR及酶切鑒定顯示插入人AQP9大小正確。測序鑒定顯示,1個堿基發(fā)生突變,45位:A→G,為無義突變。通過RT-PCR和Western blot檢測到AQP9表達(dá),說明AQP9基因在COS-7細(xì)胞中表達(dá)并與綠色熒光蛋白融合,且具有免疫原性。結(jié)論:成功構(gòu)建了pEGFP-N1-AQP9重組質(zhì)粒,并在COS-7細(xì)胞中表達(dá),為進(jìn)一步研究AQP9在NAFLD發(fā)生發(fā)展中的作用奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院消化內(nèi)科;
【關(guān)鍵詞】： 水甘油通道蛋白 非酒精性脂肪肝病 重組質(zhì)粒
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(編號:81070318) 重慶市衛(wèi)生局科研資助項(xiàng)目(編號:渝衛(wèi)科教2010-2-100)
【分類號】：R341
【正文快照】： 隨著我國人民生活水平提高和西方化的飲食方式,非酒精性脂肪肝病(nonalcoholic fatty liver dis-ease,NAFLD)患病率迅速增加,已經(jīng)成為主要消化系統(tǒng)疾病之一[1-2]。NAFLD與脂肪重新分布有關(guān),而水甘油通道蛋白9(aquaglyceroporin9,AQP9)正是參與脂肪動員運(yùn)輸和肝臟攝取的重要膜

【共引文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號：1134721