發(fā)布時(shí)間：2017-11-02 15:01

  本文關(guān)鍵詞：小鼠骨髓來(lái)源巨噬細(xì)胞體外培養(yǎng)及極化相關(guān)實(shí)驗(yàn)方法的建立

  更多相關(guān)文章： 巨噬細(xì)胞 巨噬細(xì)胞極化 體外培養(yǎng)

【摘要】：目的建立小鼠骨髓來(lái)源巨噬細(xì)胞體外培養(yǎng),并將其極化為M1和M2型巨噬細(xì)胞的方法。方法獲取小鼠骨髓細(xì)胞,以GM-CSF誘導(dǎo)其中單核細(xì)胞向巨噬細(xì)胞分化發(fā)育,并輔以LPS和IFN-γ以及IL-4刺激巨噬細(xì)胞分別向M1型和M2型分化。采用流式細(xì)胞術(shù)、實(shí)時(shí)定量PCR和ELISA的實(shí)驗(yàn)檢測(cè)極化后細(xì)胞內(nèi)以及細(xì)胞培養(yǎng)上清中的標(biāo)志性細(xì)胞因子如IL-12、IL-10、Arg1、Ym1、MMR等的表達(dá)情況。結(jié)果形態(tài)學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)骨髓獲取的細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)分化后呈現(xiàn)巨噬細(xì)胞特征性的貼壁形態(tài);流式細(xì)胞術(shù)行胞內(nèi)染色表明,極化后的M1型與M2型巨噬細(xì)胞各自表達(dá)其特征性的細(xì)胞因子IL-12和Arg1;實(shí)時(shí)定量PCR和ELISA分別檢測(cè)所培養(yǎng)細(xì)胞胞內(nèi)以及培養(yǎng)上清中的細(xì)胞因子,結(jié)果表明所刺激的M1型巨噬細(xì)胞高表達(dá)IL-12、iNOS、TNF-α等炎性因子,而M2型巨噬細(xì)胞表達(dá)MMR、Arg1、Ym1等標(biāo)志因子。結(jié)論建立了穩(wěn)定的M1和M2型巨噬細(xì)胞體外培養(yǎng)體系。
【作者單位】： 第四軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)部醫(yī)學(xué)遺傳與發(fā)育生物學(xué)教研室;第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院呼吸內(nèi)科;
【關(guān)鍵詞】： 巨噬細(xì)胞 巨噬細(xì)胞極化 體外培養(yǎng)
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(31130019)
【分類號(hào)】：R392.1
【正文快照】： 巨噬細(xì)胞是一類在體內(nèi)發(fā)揮重要免疫效應(yīng)的細(xì)胞,為體內(nèi)的穩(wěn)態(tài)維持和組織防御提供保障。一方面它可以通過(guò)吞噬作用直接吞噬降解病原微生物和異源物質(zhì),另一方面其可通過(guò)與多種其他的免疫細(xì)胞如NK細(xì)胞、T細(xì)胞相互作用從而發(fā)揮進(jìn)一步的防御功能[1]。巨噬細(xì)胞的極化是近年來(lái)提出的

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1132025