骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2誘導(dǎo)骨髓源性心肌干細(xì)胞向心肌細(xì)胞分化過程中形態(tài)和電生理特性的變化
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【摘要】:目的研究骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2(BMP-2)誘導(dǎo)骨髓源性心肌干細(xì)胞(MCSCs)向心肌分化中細(xì)胞形態(tài)變化、特異性蛋白的表達以及電生理學(xué)特征變化。方法從SD大鼠骨髓中篩選MCSCs,用10 ng/mL BMP-2誘導(dǎo)培養(yǎng)24 h后,換成含10%胎牛血清的DMEM繼續(xù)培養(yǎng)。相差顯微鏡下觀察細(xì)胞的形態(tài)變化,免疫細(xì)胞化學(xué)染色觀察誘導(dǎo)后細(xì)胞心肌特異性蛋白cTnT的表達。以正常大鼠心室肌細(xì)胞為對照,用全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)記錄誘導(dǎo)后細(xì)胞的動作電位(AP)和L型鈣電流(ICa-L)。結(jié)果 BMP-2誘導(dǎo)后MCSCs的形態(tài)和排列方式發(fā)生變化。誘導(dǎo)后4周,可見多個細(xì)胞相互連接形成肌管樣結(jié)構(gòu),cTnT表達呈現(xiàn)密集的橫紋樣。誘導(dǎo)后3周,可記錄到具有心室肌細(xì)胞特點的AP,但平臺期不明顯;4周細(xì)胞的AP出現(xiàn)明顯的平臺期,類似于成年大鼠心室肌細(xì)胞的AP。誘導(dǎo)后3周可記錄到ICa-L,但電流值較小;4周細(xì)胞ICa-L的電流值增大,激活電位為-40 mV,最大激活電位為0 mV,反轉(zhuǎn)電位為+60 mV,與成年大鼠心室肌細(xì)胞的ICa-L相似。結(jié)論 BMP-2能夠誘導(dǎo)MCSCs向心肌分化,分化后的細(xì)胞在形態(tài)和電生理學(xué)方面具有功能性心肌細(xì)胞的特征。
【作者單位】: 上海醫(yī)藥高等專科學(xué)校解剖生理教研室;上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬新華醫(yī)院心血管內(nèi)科;
【關(guān)鍵詞】: 骨形態(tài)發(fā)生蛋白- 骨髓源性心肌干細(xì)胞 cTnT 動作電位 L型鈣電流 大鼠
【基金】:上海高校青年教師資助培養(yǎng)計劃~~
【分類號】:R329.1
【正文快照】: 從骨髓中篩選出的同時表達干細(xì)胞標(biāo)志c-kit和心肌早期轉(zhuǎn)錄因子Nkx2.5的一類具有心肌特異性分化潛能的干細(xì)胞稱為骨髓源性心肌干細(xì)胞(marrow-derived cardiac stem cells,MCSCs)。骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)是轉(zhuǎn)化生長因子(transforming growth fac
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