本文關(guān)鍵詞：定點突變和隨機突變PCR構(gòu)建噬菌體突變次級抗體庫方法的比較

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【摘要】：目的以突變Tomlinson I庫中篩選的抗細胞黏附分子L1的胞外區(qū)單鏈抗體為例,對定點突變和隨機突變兩種構(gòu)建噬菌體抗體次級庫的方法進行比較。方法設(shè)計定點突變和隨機PCR引物在基因水平經(jīng)PCR、酶切、連接將已有噬菌粒引入突變后轉(zhuǎn)染大腸桿菌構(gòu)建噬菌體次級抗體庫;之后使用噬菌體ELISA確定陽性單克隆比例,采用皮爾森χ2檢驗進行比較。結(jié)果兩種方法構(gòu)建的次級抗體庫庫容分別為1.4×106pfu/mL和2.5×106pfu/mL,兩庫陽性單克隆比例分別為32.5%和35.5%,二者相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論兩種突變方法都有望獲得高親和力的抗體。
【作者單位】： 汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院神經(jīng)科學(xué)中心;
【關(guān)鍵詞】： 定點突變PCR 隨機突變PCR 噬菌體次級抗體庫 單克隆
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81171138)
【分類號】：R392.11
【正文快照】： 隨著人們對抗體研究的不斷深入,基因工程抗體以其可規(guī)�；a(chǎn)等優(yōu)點得到越來越廣泛的應(yīng)用。人源抗體庫篩選技術(shù)作為基因工程抗體的一種,能夠高效快速的在體外找到與特異性抗原結(jié)合的抗體。細胞黏附分子L1(cell adhesion molecule L1,L1CAM)作為免疫球蛋白超家族分子中的重要

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

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本文編號：1105976