骨形成蛋白家族成員2、7對小鼠胚胎肝干細(xì)胞分化的體外研究
發(fā)布時(shí)間:2017-10-19 09:26
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【摘要】:目的探討骨形成蛋白2、7(BMP2、BMP7)對小鼠胚胎肝干細(xì)胞(HP14.5)定向誘導(dǎo)分化為肝細(xì)胞樣細(xì)胞的影響。方法將表達(dá)BMP2、BMP7、肝細(xì)胞生長因子(HGF)和綠色熒光蛋白(GFP)的重組腺病毒作為4個(gè)組分別感染HP14.5,誘導(dǎo)其分化,在病毒感染后的第1、4、7天通過檢測熒光素酶報(bào)告基因讀數(shù),在第7天通過細(xì)胞免疫熒光染色,觀察肝細(xì)胞標(biāo)志物白蛋白(ALB)的表達(dá)情況;并在第4、7、10天通過PAS染色、尿素氮合成功能檢測,觀察誘導(dǎo)后HP14.5向肝細(xì)胞方向的分化成熟度。結(jié)果 BMP2組、HGF組熒光素酶讀數(shù)較GFP對照組明顯上升;免疫熒光染色顯示,誘導(dǎo)7d后BMP2組、HGF組細(xì)胞質(zhì)內(nèi)表達(dá)肝細(xì)胞特有的ALB,而GFP對照組幾乎無表達(dá);糖原染色可見BMP2組、HGF組胞質(zhì)存在紫紅色顆粒,呈陽性反應(yīng);尿素合成功能檢測顯示BMP2組、HGF組培養(yǎng)液中尿素氮隨時(shí)間而升高。BMP7組誘導(dǎo)后,細(xì)胞免疫熒光染色、熒光素酶活性、PAS染色和尿素合成檢測均呈陰性或弱陽性反應(yīng)。結(jié)論 BMP2具有一定的誘導(dǎo)HP14.5向成熟肝細(xì)胞分化的作用,并初步具備肝細(xì)胞的合成分泌功能,而BMP7對其無誘導(dǎo)作用。
【作者單位】: 兒童發(fā)育疾病研究省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室、兒科學(xué)重慶市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室、重慶市兒童發(fā)育重大疾病診治與預(yù)防國際科技合作基地、重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院肝膽外科;
【關(guān)鍵詞】: 骨形態(tài)發(fā)生蛋白質(zhì)類 胚胎肝干細(xì)胞 細(xì)胞分化 重組腺病毒
【基金】:國家自然科學(xué)基金(30973062、81172545) 重慶市自然科學(xué)基金(CSTC2012jjA10120) 重慶醫(yī)科大學(xué)校際重點(diǎn)課題(XBZD201015)~~
【分類號】:R329.21
【正文快照】: 自Wilson等[1]在小鼠營養(yǎng)性肝損傷修復(fù)機(jī)制研究中提出肝內(nèi)可能存在肝干細(xì)胞的假說以來,有關(guān)肝干細(xì)胞的研究受到了廣泛關(guān)注。目前認(rèn)為肝干細(xì)胞主要包括肝卵圓細(xì)胞[2]、小肝細(xì)胞和胚胎肝干細(xì)胞(hepatic progenitor cells,HP)。胚胎肝干細(xì)胞是肝臟生長發(fā)育、再生的重要細(xì)胞來源,
【參考文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條
1 何忠杰;方馳華;馬俊勛;楊麗萍;;肝細(xì)胞生長因子與表皮細(xì)胞生長因子聯(lián)合誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為類肝細(xì)胞[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2006年05期
【相似文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條
1 袁恒鋒;何崇儒;高金巍;徐衛(wèi)東;;Smurf1調(diào)節(jié)因子在骨形態(tài)發(fā)生蛋白誘導(dǎo)骨生成中的作用[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2011年07期
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,本文編號:1060310
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