發(fā)布時(shí)間：2017-10-15 16:24

  本文關(guān)鍵詞：直接鋪種結(jié)合改良組織塊培養(yǎng)法可有效分離人骨髓中的間充質(zhì)干細(xì)胞

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【摘要】：骨髓是間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)的重要來源。研究顯示,標(biāo)準(zhǔn)密度梯度離心法分離骨髓MSC的效率不高,骨髓小粒是造成該法低效的原因。通過組織塊法分離骨髓小粒,再結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)法,可從單份骨髓標(biāo)本分離獲得更多MSC,然而這種方法費(fèi)時(shí)費(fèi)力。本研究探求分離骨髓MSC更簡單、更有效的方法。收集7例正常人骨髓標(biāo)本,低速離心沉降,用改良組織塊法培養(yǎng)漂浮在液面上層骨髓小粒中的MSC,用直接鋪種法培養(yǎng)沉降在底層的MSC。然后對(duì)MSC進(jìn)行免疫表型和分化能力鑒定。結(jié)果表明:在7例標(biāo)本中,有3例骨髓小粒漂浮在液面上層,其余骨髓細(xì)胞包括部分小粒沉降在底層;漂浮小粒中的MSC可用改良組織塊法獲得,沉降在底層的MSC可用直接鋪種法獲得。分離的MSC傳代3次后不表達(dá)CD45、CD34,表達(dá)CD105、CD73、CD44、CD90、CD49e,能向軟骨和脂肪細(xì)胞分化。結(jié)論:以直接鋪種法為主、改良組織塊培養(yǎng)法為輔,可簡單、高效地分離人骨髓中MSC。
【作者單位】： 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院血液病醫(yī)院血液學(xué)研究所實(shí)驗(yàn)血液學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;遼寧醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院血液科;
【關(guān)鍵詞】： 間充質(zhì)干細(xì)胞 骨髓 直接鋪種法 改良組織塊培養(yǎng)法
【基金】：國家自然科學(xué)基金(編號(hào)81270575) 天津市自然科學(xué)基金(編號(hào)11JCYBJC10500,09JCYBJC11000)資助
【分類號(hào)】：R329
【正文快照】： 骨髓是間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)的主要來源。目前,從人骨髓中分離MSC的方法可分為三種:①先用密度梯度離心法分離單個(gè)核細(xì)胞(MNC),再培養(yǎng)和擴(kuò)增得到MSC———即所謂的標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)法[1-3];②采用全骨髓直接鋪種法[4,5];③用特異性抗體篩選陽性或陰性細(xì)胞群,然后進(jìn)行培養(yǎng)和擴(kuò)增[5,6]。這

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 陳穎;張黎;郭瓊行;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在普通外科中的應(yīng)用[J];中國現(xiàn)代普通外科進(jìn)展;2009年12期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 張偉;組織工程化人工神經(jīng)修復(fù)長節(jié)段周圍神經(jīng)損傷的實(shí)驗(yàn)研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2011年

2 楊菊林;功能化殼聚糖組成及表面形態(tài)與干細(xì)胞的相互作用[D];暨南大學(xué);2008年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 韓楓;山羊骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外分離培養(yǎng)與鑒定的實(shí)驗(yàn)研究[D];鄭州大學(xué);2010年

2 黃家志;兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離培養(yǎng)及誘導(dǎo)多向分化的實(shí)驗(yàn)研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2011年

3 范鍥;釩酸鹽對(duì)地塞米松誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞凋亡的抑制作用的研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2011年

4 李巍;堿性成纖維細(xì)胞生長因子對(duì)兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化影響的研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2011年

5 張福麗;間充質(zhì)干細(xì)胞治療肺動(dòng)脈高壓研究進(jìn)展（附肺動(dòng)脈高壓發(fā)病機(jī)制進(jìn)展）[D];山西醫(yī)科大學(xué);2011年

6 徐靜;Wistar大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及鑒定[D];吉林大學(xué);2011年

7 張亞楠;GATA-4基因促進(jìn)5-氮雜胞苷誘導(dǎo)的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌分化[D];河北醫(yī)科大學(xué);2011年

8 任瑞芳;大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外分離、誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化為成纖維細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[D];鄭州大學(xué);2011年

9 張振;酒精對(duì)兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞神經(jīng)遞質(zhì)表達(dá)的影響[D];鄭州大學(xué);2011年

10 張勇;GDF-5與兔椎間盤體外模型聯(lián)合誘導(dǎo)兔BMSCs向類髓核細(xì)胞分化的實(shí)驗(yàn)研究[D];華中科技大學(xué);2011年

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 馮濱,劉迎龍,馮凱,龔茹,陳虎;Tie-2單克隆抗體鑒定人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外定向誘導(dǎo)分化的內(nèi)皮細(xì)胞[J];中國應(yīng)用生理學(xué)雜志;2005年03期

2 王俊芳;羅永湘;方煌;陳安民;;大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的體外培養(yǎng)及初步鑒定[J];實(shí)用手外科雜志;2006年03期

3 楊雷;李薇;姜震宇;王冠軍;;堿性成纖維細(xì)胞生長因子對(duì)羊骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外增殖和分化的影響[J];吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2007年03期

4 李正章;程應(yīng)樟;;人骨髓及臍血間充質(zhì)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)及鑒定[J];心血管病學(xué)進(jìn)展;2008年S1期

5 史明霞;李靜;廖聯(lián)明;陳斌;李炳宗;陳磊;趙春華;;胎兒骨髓源Flk1~+間充質(zhì)干細(xì)胞的歸巢機(jī)制[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2009年14期

6 何曉霞;白海;楊國嶸;薛永杰;蘇亞楠;;人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中Toll樣受體的表達(dá)特征[J];中國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志;2009年03期

7 汪浩文;何志旭;王志華;劉俊峰;;定向誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為脂肪細(xì)胞及神經(jīng)元樣細(xì)胞的研究[J];實(shí)用兒科臨床雜志;2009年15期

8 李偉偉;張蕾;田力;李鵬飛;;卵泡抑素誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為神經(jīng)元樣細(xì)胞[J];神經(jīng)解剖學(xué)雜志;2009年06期

9 胡峰;趙勁民;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞定向分化研究中蛋白質(zhì)組學(xué)的地位與應(yīng)用[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2010年14期

10 高文玲;柳發(fā)鏗;胡開順;朱雙林;;反轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)基質(zhì)金屬蛋白酶特異性組織抑制劑1基因轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的成骨能力[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2011年19期

中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 郭振興;鄭翠玲;陳振萍;董文川;楊仁池;;胚胎骨髓來源的間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)人Th17細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)作用的研究[A];第12屆全國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要[C];2009年

2 楊少光;池穎;戎麗娟;邢文;盧士紅;趙欽軍;馬鳳霞;韓忠朝;;不同來源間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化成血管內(nèi)皮細(xì)胞的比較[A];第13屆全國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要[C];2011年

3 岑建農(nóng);陳子興;錢軍;王瑋;傅建新;潘金蘭;;人骨髓和動(dòng)員外周血中的間充質(zhì)干細(xì)胞的研究[A];第九屆全國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要匯編[C];2003年

4 欒希英;劉同慎;曹奇志;;人胎盤源間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)T細(xì)胞周期及其活化的抑制作用研究[A];第六屆全國免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2008年

5 孫愛紅;盧士紅;馮四洲;韓忠朝;;臍血間充質(zhì)干細(xì)胞促進(jìn)骨髓來源單個(gè)核細(xì)胞造血作用研究[A];2005年華東六省一市血液病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議暨浙江省血液病學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2005年

6 朱亞姝;趙春華;;脂肪來源的間充質(zhì)干細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)作用[A];第11次中國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文匯編[C];2007年

7 王晶;張洹;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨的實(shí)驗(yàn)研究[A];第11次中國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文匯編[C];2007年

8 陳麗;井緒東;何冬梅;張洹;房寶英;;體外誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向多巴胺能神經(jīng)樣細(xì)胞分化的研究[A];第11次中國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文匯編[C];2007年

9 王永濤;;流式細(xì)胞儀檢測氫醌誘導(dǎo)的造血間充質(zhì)干細(xì)胞凋亡[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第八次全國檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議暨中華醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)分會(huì)成立30周年慶典大會(huì)資料匯編[C];2009年

10 肖宏濤;劉毅;;人臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞研究近況及其在脂肪組織工程中的應(yīng)用[A];第七屆全國創(chuàng)傷學(xué)術(shù)會(huì)議暨2009海峽兩岸創(chuàng)傷醫(yī)學(xué)論壇論文匯編[C];2009年

中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 胡德良;來自骨髓的嬰兒？[N];健康報(bào);2007年

2 王艷紅;美科學(xué)家用骨髓成體干細(xì)胞培育出血管[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2007年

3 劉霞;減少骨髓脂肪細(xì)胞可提高造血能力[N];科技日?qǐng)?bào);2009年

4 記者 毛黎;科學(xué)家首次培養(yǎng)出人造骨髓[N];科技日?qǐng)?bào);2008年

5 副主任醫(yī)師 唐軍;捐獻(xiàn)骨髓對(duì)身體有何影響[N];衛(wèi)生與生活報(bào);2003年

6 第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院介入放射科 郭衛(wèi)平　朱舜明 朱立明 整理;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞帶來的希望[N];健康報(bào);2008年

7 記者 白毅;間充質(zhì)干細(xì)胞可促進(jìn)成熟樹突狀細(xì)胞增殖分化[N];中國醫(yī)藥報(bào);2009年

8 英國《每日郵報(bào)》 王金元 譯;科學(xué)家將女人骨髓變精子[N];北京科技報(bào);2008年

9 記者 馮衛(wèi)東;科學(xué)家誘使骨髓釋放額外成體干細(xì)胞[N];科技日?qǐng)?bào);2009年

10 劉鋼;癌癥克星——骨髓免疫細(xì)胞[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2001年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 楊禮慶;胰島素樣生長因子-1基因轉(zhuǎn)染對(duì)兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向軟骨細(xì)胞分化的影響[D];中國醫(yī)科大學(xué);2006年

2 李東杰;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞促進(jìn)創(chuàng)面愈合及體外誘導(dǎo)分化為表皮樣細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2011年

3 彭飛;620nm非相干紅光對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的光生物調(diào)節(jié)作用[D];華中科技大學(xué);2011年

4 趙迎澤;BMP9通過MAPKs通路調(diào)控間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化及其機(jī)制的初步研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2010年

5 王海濤;大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)同種異體心臟移植免疫耐受[D];復(fù)旦大學(xué);2007年

6 孫昭;間充質(zhì)干細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)功能及其機(jī)制的研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2007年

7 謝姜;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化成神經(jīng)干細(xì)胞及其移植治療腦出血的研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2010年

8 劉麗輝;獼猴間充質(zhì)干細(xì)胞聯(lián)合非清髓單倍體造血干細(xì)胞移植的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2005年

9 李靜遠(yuǎn);人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞端粒調(diào)控機(jī)制的研究[D];浙江大學(xué);2006年

10 蘇永鋒;間充質(zhì)干細(xì)胞調(diào)控選擇性活化樹突狀細(xì)胞發(fā)育[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2009年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李斌;大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向軟骨細(xì)胞誘導(dǎo)分化的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2005年

2 王利霞;5-氮胞苷體外誘導(dǎo)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌樣細(xì)胞分化的實(shí)驗(yàn)研究[D];鄭州大學(xué);2005年

3 陸琰;誘導(dǎo)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向胰島β樣細(xì)胞分化的實(shí)驗(yàn)研究[D];暨南大學(xué);2006年

4 石丹;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化為胰島樣細(xì)胞的研究[D];吉林大學(xué);2007年

5 陳麗;體外誘導(dǎo)大鼠骨髓及人胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞向多巴胺能樣細(xì)胞分化[D];暨南大學(xué);2008年

6 井緒東;體外誘導(dǎo)大鼠骨髓及人胎盤間質(zhì)干細(xì)胞向膽堿能樣神經(jīng)元分化的實(shí)驗(yàn)研究[D];暨南大學(xué);2008年

7 汲晶;脂肪與骨髓來源的間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為神經(jīng)細(xì)胞的比較[D];山西醫(yī)科大學(xué);2010年

8 王廣斌;不同分離方法對(duì)兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨分化影響的研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2005年

9 姜玉峰;用人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)抗砷細(xì)胞[D];石河子大學(xué);2005年

10 龐云;人臍帶膠質(zhì)間充質(zhì)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)與特性研究[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

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