本文關鍵詞：CCK-8法與FACS對抗CD3抗體誘導小鼠Treg細胞免疫抑制作用的比較

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【摘要】：用非放射性同位素方法檢測抗CD3抗體誘導的小鼠調(diào)節(jié)性T細胞(Treg)對效應性T細胞(Teff)增殖的抑制作用。本實驗用絲裂霉素C處理脾細胞獲得抗原遞呈細胞(APC),用免疫磁珠分離BALB/c小鼠脾臟CD4~+CD25~+的Treg和CD4~+CD25~-的Teff,二者按1:2比例與APC共培養(yǎng),并加入anti-CD3抗體刺激3 d,加CCK-8孵育檢測細胞增殖。另外,CFSE標記Teff,與Treg共同培養(yǎng),加入anti-CD3抗體刺激3 d,流式細胞儀分析Treg對Teff增殖的抑制作用。流式分析表明,0.1 mg/L、1 mg/L的anti-CD3抗體均能明顯促進Teff細胞增殖,加Treg細胞能明顯減低細胞增殖的比例和減少增殖的代數(shù)。anti-CD3抗體劑量增加到1 mg/L,Teff的增殖較0.1 mg/L劑量刺激時沒有明顯改變,但Treg的抑制功能減弱了。CCK-8法與流式檢測得出的結(jié)果一致。CCK-8法和流式細胞術(FACS)均可以用來檢測Treg細胞的免疫抑制作用,并且采用0.1 mg/L anti-CD3抗體刺激,對Treg細胞免疫抑制作用的檢測效果更好。
【作者單位】： 南方醫(yī)科大學藥學院;廣州醫(yī)學院附屬腫瘤醫(yī)院藥學部;
【關鍵詞】： 調(diào)節(jié)性T細胞 anti-CD 免疫抑制 流式細胞儀 CCK-
【基金】：國家自然科學基金資助項目(30801413;81073119)
【分類號】：R392
【正文快照】： CD4+CD25+Foxp3+調(diào)節(jié)性T細胞(regulato-ryT。ells，，Treg)是免疫系統(tǒng)一群重要的執(zhí)行細胞，可通過維持自身耐受、抑制免疫細胞活化而改善自身免疫性疾病和炎癥等〔’〕;但過強又能抑制腫瘤免疫，促進腫瘤生長和侵襲[z.’〕。具有免疫調(diào)節(jié)功能的CD4+CD25+T細胞于1995年由Sakagueh

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4 王弘s

本文編號：1037302