本文關(guān)鍵詞：pAcGFP1-C1-Ngb真核表達(dá)載體的構(gòu)建及在SH-SY5Y細(xì)胞中的表達(dá)

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【摘要】：目的克隆SD大鼠腦紅蛋白(Ngb)基因至真核表達(dá)載體pAcGFP1-C1,構(gòu)建表達(dá)質(zhì)粒pAcGFP1-C1-Ngb,并轉(zhuǎn)染至人SH-SY5Y細(xì)胞表達(dá)Ngb蛋白。方法提取大鼠肝臟組織總RNA,采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)方法擴(kuò)增大鼠Ngb基因,與雙酶切的pAcGFP1-C1連接,從而構(gòu)建pAcGFP1-C1-Ngb真核表達(dá)質(zhì)粒。轉(zhuǎn)染SH-SY5Y細(xì)胞,并用Western blot的方法鑒定Ngb蛋白在SH-SY5Y細(xì)胞中的表達(dá)。結(jié)果獲得SD大鼠Ngb基因全長(zhǎng)序列和重組真核表達(dá)載體pAcGFP1-C1-Ngb。Western blot結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)染pAcGFP1-C1-Ngb后的SH-SY5Y細(xì)胞Ngb基因有穩(wěn)定的表達(dá)。結(jié)論成功地克隆了SD大鼠Ngb基因、構(gòu)建了pAcGFP1-C1-Ngb真核表達(dá)載體,并在人SH-SY5Y細(xì)胞中獲得Ngb蛋白的穩(wěn)定表達(dá),為進(jìn)一步研究Ngb基因在細(xì)胞中的功能奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 大連醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院眼科;中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院眼科;
【關(guān)鍵詞】： Ngb 載體構(gòu)建 SH-SYY細(xì)胞 轉(zhuǎn)染
【分類(lèi)號(hào)】：R346
【正文快照】： Construction of Eukaryotic Expression Vector pAcGFP1-C1-Ngb and Its Expression inHuman SH-SY5Y Cells腦紅蛋白(neuroglobin,Ngb)是2000年由德國(guó)Burmester等首先發(fā)現(xiàn)的一種攜氧球蛋白,是繼血紅蛋白(Hb)和肌紅蛋白(Mb)之后的第三種攜氧球蛋白[1]。主要在腦組織中表達(dá),故

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1 孫中義;靳風(fēng)爍;李彥鋒;張軍;;鼠受精素β亞單位胞外區(qū)的真核表達(dá)質(zhì)粒pSG.SS.YL-F_β.ECD的構(gòu)建與表達(dá)[J];重慶醫(yī)學(xué);2007年09期

2 徐軍發(fā);袁春雷;楊衡;趙坤;胡國(guó)艷;龔非力;;小鼠B7-H4基因克隆及真核表達(dá)載體的構(gòu)建[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2007年07期

3 張文峰;張巨峰;邵紅偉;王俊偉;牟艷芳;黃樹(shù)林;;人TCA-12-2/TCB-7.1真核雙表達(dá)載體的構(gòu)建與表達(dá)[J];中國(guó)病理生理雜志;2008年03期

4 郭永燦;羅春麗;顏令;歐俐蘋(píng);趙懿;蔡曉鐘;;PLCε shRNA質(zhì)粒構(gòu)建及功能鑒定[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2009年17期

5 田孝祥;韓雅玲;康建;閆承慧;齊巖梅;陶杰;吳光哲;;平滑肌細(xì)胞純化載體構(gòu)建及在小鼠胚胎干細(xì)胞中的表達(dá)[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2009年45期

6 李慧;彭?yè)P(yáng);牛慧彥;何平;;真核表達(dá)載體pEGFP-N1-Ubc9的構(gòu)建及表達(dá)[J];現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué);2011年05期

7 徐佳;劉志鋒;王娟;鄧鵬;姜勇;;人高遷移率族蛋白B1細(xì)胞內(nèi)定位及移位研究[J];中國(guó)危重病急救醫(yī)學(xué);2006年06期

8 洪思琦;畢楊;郭振華;陳鏡宇;李映良;;攜帶siANGPTL4重組腺病毒的構(gòu)建及其對(duì)MG63增殖的抑制作用[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2011年01期

9 方桂杰;喬憲鳳;;日本血吸蟲(chóng)谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶原核表達(dá)載體的構(gòu)建及序列分析[J];江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào);2010年11期

10 陶應(yīng)雙;戴長(zhǎng)柏;;脊髓灰質(zhì)炎病毒作載體構(gòu)建嵌合病毒的現(xiàn)狀及前景[J];醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)雜志;1991年05期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 傅新巧;張?zhí)K明;褚倩;肖文伍;;大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞轉(zhuǎn)染人TH基因的實(shí)驗(yàn)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2004年

2 師偉;裴雪濤;;HOXB4基因的表達(dá)譜初步研究與HOXB4基因的克隆及相關(guān)載體構(gòu)建[A];第九屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要匯編[C];2003年

3 童向民;金潔;徐偉來(lái);姚航平;;hTERT和hIL-18融合基因載體構(gòu)建及真核細(xì)胞表達(dá)的研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第八次全國(guó)血液學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2004年

4 李華;劉維全;王吉貴;江禹;王本旭;王萍;齊順章;殷震;;人胰島素基因桿狀病毒表達(dá)載體的構(gòu)建及其在Sf9細(xì)胞中表達(dá)的研究[A];中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)會(huì)青年科技協(xié)會(huì)第二屆學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2001年

5 余自強(qiáng);董寧征;白霞;阮長(zhǎng)耿;;人血小板糖蛋白Ⅵ真核表達(dá)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第八次全國(guó)血液學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2004年

6 李振宇;徐開(kāi)林;潘秀英;鹿群先;主鴻鵠;何徐彭;;含綠色熒光蛋白的慢病毒載體的構(gòu)建及表達(dá)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第八次全國(guó)血液學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2004年

7 王利華;張淼;石朔;;治療基因VEGF和報(bào)告基因NIS共表達(dá)載體的構(gòu)建和鑒別[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第九次全國(guó)核醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2011年

8 何勇;沈艷霞;雷萍;蘭曉莉;曹衛(wèi);詹浩;孫遜;安銳;張永學(xué);;HSV1-TK及hSSTr2a雙順?lè)醋又亟M腺病毒的構(gòu)建及核素報(bào)告基因顯像研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第九次全國(guó)核醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2011年

9 李成仁;蔡文琴;李巍;蘇炳銀;;NOV基因轉(zhuǎn)染對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞增殖、分化的影響[A];解剖學(xué)雜志——中國(guó)解剖學(xué)會(huì)2002年年會(huì)文摘匯編[C];2002年

10 傅躍先;張強(qiáng);康權(quán);甘立強(qiáng);羅慶;劉燕;;腺病毒介導(dǎo)骨形態(tài)蛋白-9基因轉(zhuǎn)染脂肪干細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)燒傷外科學(xué)分會(huì)2009年學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2009年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 白毅;上海創(chuàng)建大規(guī)模細(xì)胞DNA轉(zhuǎn)染技術(shù)平臺(tái)[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2005年

2 張中橋;NDRG2可誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞HepG2凋亡[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2004年

3 王全楚;組織工程化血管離臨床有多遠(yuǎn)[N];健康報(bào);2005年

4 馬昕皓;癌癥基因治療傳遞系統(tǒng)現(xiàn)狀[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2004年

5 吳軍　楊太成;主動(dòng)特異性免疫療法治療腫瘤[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2003年

6 李杰;抗原特異TCR基因修飾T細(xì)胞技術(shù)的建立和應(yīng)用[N];科技日?qǐng)?bào);2007年

7 吳一福;川大成功建立人新基因PCIA1細(xì)胞株[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2006年

8 余志平;腫瘤聚糖新藥研發(fā)瞄準(zhǔn)聚糖形成[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2005年

9 婁彥艷 魏于全;腫瘤基因與分子疫苗面面觀[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2001年

10 張中橋;納米微囊載體具有基因治療潛能[N];保健時(shí)報(bào);2005年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 徐尤年;血管生成素1腺病毒載體的構(gòu)建及其對(duì)內(nèi)毒素性肺損傷炎癥消退的影響[D];華中科技大學(xué);2010年

2 胡澤斌;溶瘤腺病毒載體系統(tǒng)的構(gòu)建及其功能研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2008年

3 饒小泉;MBD2基因缺陷促進(jìn)血管生成并改善小鼠下肢缺血損傷[D];華中科技大學(xué);2011年

4 張貴星;光誘導(dǎo)表達(dá)載體的構(gòu)建及其在鹽藻除草劑抗性轉(zhuǎn)化中的應(yīng)用[D];鄭州大學(xué);2003年

5 劉家云;siRNA對(duì)HepG2 2.2.15細(xì)胞和轉(zhuǎn)基因小鼠中HBV的基因表達(dá)及復(fù)制的抑制作用研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2005年

6 馬天容;對(duì)新型內(nèi)皮脂酶價(jià)值的初步研究[D];山東大學(xué);2005年

7 王丁丁;重組人抗狂犬病毒抗體的實(shí)驗(yàn)研究[D];吉林大學(xué);2007年

8 黃清玲;乙型肝炎病毒全基因水平對(duì)HepG2細(xì)胞的影響及其機(jī)制的初步研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2008年

9 江n;低強(qiáng)度脈沖超聲波對(duì)大鼠脂肪干細(xì)胞增殖和成骨分化的影響及成骨機(jī)制的初步研究[D];華中科技大學(xué);2012年

10 張利軍;IQGAP1在肺炎衣原體感染誘導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞粘附和遷移中的作用[D];天津醫(yī)科大學(xué);2011年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 劉向陽(yáng);慢病毒載體表達(dá)人B型利鈉肽的方法學(xué)探討[D];華中科技大學(xué);2006年

2 于曉明;人乳鐵蛋白乳腺真核表達(dá)載體pBC1-hLF的構(gòu)建[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2006年

3 劉春江;大鼠胎腦神經(jīng)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)及電穿孔轉(zhuǎn)染[D];中南大學(xué);2009年

4 周懷瑜;弓形蟲(chóng)表面抗原P30與免疫佐劑CTA2/B復(fù)合基因在畢赤酵母中的分泌表達(dá)、純化與鑒定[D];山東大學(xué);2005年

5 閆德雄;整合素β1在人表皮細(xì)胞分化中作用的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2006年

6 宋曉妍;人生長(zhǎng)激素真核表達(dá)載體的構(gòu)建及其瞬時(shí)表達(dá)[D];鄭州大學(xué);2006年

7 唐文琴;人生長(zhǎng)激素受體的定點(diǎn)突變及其真核表達(dá)[D];江西師范大學(xué);2007年

8 譚琪;SV40T熒光真核表達(dá)載體構(gòu)建及轉(zhuǎn)染大鼠胰島細(xì)胞的研究[D];暨南大學(xué);2008年

9 張文豪;人CD154基因真核表達(dá)載體的構(gòu)建及在Eca109細(xì)胞中的表達(dá)[D];鄭州大學(xué);2003年

10 陳建輝;針對(duì)HLA-G基因的siRNA的載體構(gòu)建與表達(dá)及效應(yīng)檢測(cè)[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2007年

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