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溫針灸對制動引起的KOA模型兔膝關節(jié)軟骨MMP-1和IL-1β的影響

發(fā)布時間:2017-10-14 13:34

  本文關鍵詞:溫針灸對制動引起的KOA模型兔膝關節(jié)軟骨MMP-1和IL-1β的影響


  更多相關文章: 膝骨關節(jié)炎 基質(zhì)金屬蛋白酶-1 白細胞介素-1β 溫針灸 膝關節(jié)軟骨


【摘要】:溫針灸(warming needle moxibustion)是針刺和艾灸結合的一種治療手段,適用于既需要留針又需要艾灸的病癥,具有操作方便,省時省力等優(yōu)點。對于膝骨關節(jié)炎,溫針灸有獨特的治療作用,可通過針刺疏通局部氣血,并結合艾灸的溫熱作用疏散寒邪。兔膝骨關節(jié)炎制動造模法制備的膝骨關節(jié)炎(knee osteoarthritis,KOA)模型可有效模擬膝關節(jié)在長期負重受壓狀態(tài)下造成的病理改變,與KOA發(fā)病中隨著年齡增長、膝關節(jié)負荷增大等情況造成軟骨退行性病變機制相符合。并規(guī)避了手術建立KOA模型造成的炎性并發(fā)癥影響實驗指標的情況。膝關節(jié)軟骨代謝是一個復雜的動態(tài)平衡,一旦失衡,就會發(fā)展為KOA。其中,破壞性細胞因子是打破平衡的關鍵,在眾多導致KOA的細胞因子中,以白介素1β(IL-1β)為始動環(huán)節(jié)、以基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)為主導因子,IL-1β可激活基質(zhì)金屬蛋白酶原,而后者通過酶的生物活性作用催化軟骨基質(zhì)的降解,加重KOA表現(xiàn)。本文主要通過三部分來探討溫針灸治療膝骨關節(jié)炎的機制和效果。第一部分是理論研究,綜述一主要闡述KOA中西醫(yī)機制和中西醫(yī)治療方法。中醫(yī)方面:KOA和古代痹證的關系;古代醫(yī)家對痹證的認識包括病因、病機、證型等;中醫(yī)方藥的治療,西醫(yī)方面:膝關節(jié)解剖結構;KOA流行病學調(diào)查;KOA發(fā)生機制學說;KOA的影響因素;西醫(yī)臨床治療方法。綜述二主要是針對針灸理論和針灸療法和KOA關系的探討,通過對古代針灸醫(yī)家的理論研究,結合針灸治療的現(xiàn)代機理,探討針灸治療KOA的機制,并初步探討了近5年內(nèi)針灸相關的治療方法。綜述三探討細胞因子和KOA的關系,并概述關于針灸改變KOA細胞因子表達的實驗研究。第二部分為實驗操作。第三部分是討論,主要探討動物模型選擇的理由、對細胞因子指標選擇的理由和取穴理念。目的:本課題以膝關節(jié)制動法復制的KOA模型兔為研究對象,以溫針灸為干預手段,干預后觀察膝關節(jié)大體形態(tài),以MMP-1和IL-1β為主要指標,探討溫針灸在KOA中降低炎性因子表達的相關機制,以期為臨床提供一定實驗依據(jù)。方法:①選用雄性日本大耳白兔30只,適應性飼養(yǎng)1周后,采用隨機數(shù)字表法分為正常組、模型組、治療組,每組各10只。②除正常組外,其余2組兔通過膝關節(jié)強迫伸直位制動6周建立膝骨關節(jié)炎模型。將兔的右下肢膝關節(jié)伸直呈150-180°,踝關節(jié)背屈60-90°,并用石膏繃帶固定,外纏繞紗布防止磨損,腳趾端露出以便于觀察血流是否通暢,防止缺血壞死,共計6周。第7周末日結束造模。③第8周首日,肉眼觀察各組兔膝關節(jié)大體形態(tài),并比較各組間差別。④正常組兔常規(guī)飼養(yǎng),不做干預;治療組兔肉眼觀察后針刺“內(nèi)膝眼”、“外膝眼”、“陽陵泉”、“足三里”,并搓艾絨于針柄上點燃,行溫針灸,計20min,1日1次共4周;模型組同治療組一樣每天抓取后固定于兔臺,但不做溫針灸干預。⑤采用Lequesne MG法評分并記錄各組兔膝關節(jié)腫脹程度、疼痛程度、活動范圍和步態(tài)。⑥采用HE染色法觀察膝關節(jié)軟骨。⑦采用放射免疫法檢測各組兔膝關節(jié)軟骨組織中IL-1β和MMP-1含量。結果:①膝關節(jié)大體形態(tài):正常組兔膝關節(jié)無變形,活動度好,兔驅(qū)趕時行動正常;模型組及治療組兔膝關節(jié)腫脹明顯,備皮后可觀察到膝關節(jié)軟骨變形,兔驅(qū)趕時跛行。②膝關節(jié)軟骨形態(tài):正常組軟骨細胞分布均勻,結構清楚,層次清晰;模型組可見排列散亂的軟骨細胞,部分細胞呈簇狀排列,結構層次不明晰;治療組可見軟骨細胞排列較規(guī)則,偶見少量簇集的軟骨細胞。③ Lequesne MG評分:治療后,與正常組相比,模型組、治療組膝關節(jié)腫脹程度、疼痛程度、活動范圍和步態(tài)四項評分均升高(均為P0.05);與模型組相比,治療組膝關節(jié)腫脹程度、活動范圍評分降低(均為P0.05)。④IL-1 β含量:與正常組相比,模型組、治療組含量顯著升高(分別為P0.01、P0.01);與模型組相比,治療組含量顯著降低(P0.01)。⑤MMP-1含量:與正常組相比,模型組、治療組均顯著升高,差異有統(tǒng)計學意義(分別為P0.01,P0.01);與模型組相比,治療組含量顯著降低(P0.01)。結論:①溫針灸能降低軟骨組織中IL-1 β和MMP-1的含量。②溫針灸能改善膝關節(jié)軟骨細胞簇集現(xiàn)象。③溫針灸能降低膝關節(jié)腫脹程度,增大膝關節(jié)活動范圍。④溫針灸治療KOA的作用機制可能與降低軟骨組織中IL-1β和MMP-1的含量有關。
【關鍵詞】:膝骨關節(jié)炎 基質(zhì)金屬蛋白酶-1 白細胞介素-1β 溫針灸 膝關節(jié)軟骨
【學位授予單位】:北京中醫(yī)藥大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R245;R-332
【目錄】:
  • 中文摘要5-7
  • Abstract7-10
  • 英文縮略詞表10-11
  • 綜述一 中西醫(yī)對膝骨關節(jié)炎的研究探討11-23
  • 1. 中醫(yī)對膝骨關節(jié)炎的研究探討11-14
  • 1.1 簡述古代中醫(yī)對膝骨關節(jié)炎的研究探討11-12
  • 1.2 古代醫(yī)家對膝骨關節(jié)炎的中藥治療12-13
  • 1.3 現(xiàn)代中醫(yī)對膝骨關節(jié)炎的中藥治療13-14
  • 2. 西醫(yī)對膝骨關節(jié)炎的研究探討14-21
  • 2.1 膝關節(jié)的結構和生理特點15
  • 2.2 膝骨關節(jié)炎的流行病學研究15
  • 2.3 病因和影響因素15-16
  • 2.4 膝骨關節(jié)炎的機制研究16-17
  • 2.5 臨床表現(xiàn)和診斷17-18
  • 2.6 現(xiàn)代醫(yī)學治療方法18-21
  • 參考文獻21-23
  • 綜述二 針灸治療膝骨關節(jié)炎的研究進展23-30
  • 1. 針灸治療KOA機制23-24
  • 1.1 針灸治療KOA機制傳統(tǒng)中醫(yī)理論研究23
  • 1.2 針灸治療KOA機制現(xiàn)代醫(yī)學理論研究23-24
  • 2. 針灸治療KOA方法24-28
  • 2.1 毫針療法24-25
  • 2.2 電針療法25
  • 2.3 火針療法25-26
  • 2.4 溫針灸療法26-27
  • 2.5 針刀及其他療法27-28
  • 參考文獻28-30
  • 綜述三 細胞因子在KOA機制中的作用和針灸對細胞因子含量的影響30-38
  • 1. 細胞因子在KOA機制中的作用30-33
  • 1.1 白介素30-31
  • 1.2 前列腺素E231
  • 1.3 基質(zhì)金屬蛋白酶131
  • 1.4 一氧化氮31-32
  • 1.5 腫瘤壞死因子α32
  • 1.6 轉(zhuǎn)化生長因子β32-33
  • 1.7 胰島素樣生長因子133
  • 1.8 骨形態(tài)發(fā)生蛋白33
  • 2. 針灸對細胞因子含量的影響33-36
  • 2.1 針灸對白介素含量的影響34
  • 2.2 針灸對金屬蛋白酶含量的影響34
  • 2.3 針灸對生長因子含量的影響34-36
  • 參考文獻36-38
  • 前言38-39
  • 實驗39-50
  • 1. 實驗材料39-40
  • 1.1 實驗動物39
  • 1.2 主要試劑及設備39-40
  • 1.3 溫針灸器具40
  • 2. 實驗方法40-43
  • 2.1 動物分組40
  • 2.2 模型制備40
  • 2.3 實驗干預40-41
  • 2.4 標本的采集與保存41-42
  • 2.5 膝關節(jié)腫脹、疼痛程度觀察42
  • 2.6 指標檢測42-43
  • 2.7 統(tǒng)計學方法43
  • 2.8 誤差控制43
  • 3. 結果43-50
  • 3.1 各組兔膝關節(jié)外觀肉眼觀察和運動步態(tài)觀察44
  • 3.2 各組兔膝關節(jié)治療前后Lequesne MG評估44-46
  • 3.3 各組兔膝關節(jié)軟骨觀察46-47
  • 3.4 光鏡下膝關節(jié)軟骨形態(tài)47
  • 3.5 關節(jié)軟骨中IL-1β含量47
  • 3.6 關節(jié)軟骨中MMP-1含量47-50
  • 討論50-60
  • 1 KOA動物模型的討論50-53
  • 1.1 改良Hulth模型50-51
  • 1.2 膝關節(jié)腔內(nèi)木瓜蛋白酶注射模型51-52
  • 1.3 骸韌帶內(nèi)側(cè)缺損構建模型52
  • 1.4 關節(jié)制動模型52
  • 1.5 本實驗模型選則的討論52-53
  • 2 細胞因子的討論53-56
  • 2.1 損傷性細胞因子54-55
  • 2.2 保護性細胞因子55-56
  • 2.3 本實驗選取指標的討論56
  • 3 穴位選取的討論56-57
  • 4 干預方法的討論57
  • 5 對膝關節(jié)、軟骨組織的觀察57-58
  • 6 溫針灸對膝關節(jié)腫脹程度、疼痛程度、活動范圍和步態(tài)的影響58
  • 7 溫針灸對KOA模型兔關節(jié)軟骨IL-1β、MMP-1含量的影響58
  • 8 存在的問題與展望58-60
  • 結論60-61
  • 參考文獻61-63
  • 附錄63-67
  • 致謝67-68
  • 個人簡歷68

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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3 薛延,李東,姚力,周乙雄,肖迪,郭三巧,王芊;雌激素受體等位基因多態(tài)性與骨關節(jié)炎的關系[J];中華風濕病學雜志;2004年10期

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6 許紅兵;;溫針灸在老年膝關節(jié)骨性關節(jié)炎治療中的應用[J];大家健康(學術版);2014年08期

7 董春江;;火針療法治療增生性膝骨關節(jié)炎256例療效觀察[J];臨床醫(yī)藥文獻電子雜志;2015年02期

8 岑祖怡;周劍鵬;;獨活寄生湯治療膝關節(jié)骨性關節(jié)炎50例療效觀察[J];新中醫(yī);2010年08期

9 邵俊杰,蔣W,

本文編號:1031381


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