本文關(guān)鍵詞：培養(yǎng)條件對(duì)小鼠髓源性樹(shù)突狀細(xì)胞生物特性影響的觀察

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【摘要】：目的:明確GM-CSF濃度、IL-4及細(xì)胞起始培養(yǎng)密度對(duì)培養(yǎng)的小鼠髓源性DC生物特性的影響。方法:分離小鼠骨髓細(xì)胞,用100、20和2ng/mL GM-CSF聯(lián)合或不聯(lián)合IL-4以及起始細(xì)胞培養(yǎng)密度為2.5×105和7.5×105 mL-1進(jìn)行體外誘導(dǎo)DC細(xì)胞培養(yǎng),培養(yǎng)7d后收集細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù),同時(shí)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)CD11c+及CD11c+CD80+細(xì)胞的比例,并對(duì)GM-CSF聯(lián)合或不聯(lián)合IL-4培養(yǎng)的DC細(xì)胞吞噬腫瘤細(xì)胞的能力進(jìn)行檢測(cè)。此外以混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)(MLR)檢測(cè)培養(yǎng)的DC細(xì)胞對(duì)淋巴細(xì)胞的剌激能力。結(jié)果:2ng/mL GM-CSF擴(kuò)增的DC細(xì)胞為起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度的0.21±0.05倍,與100ng/mL的0.52±0.10倍(t=10.311,P0.001)及20ng/mL的0.46±0.04倍(t=6.934,P0.001)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,但100ng/mL與20ng/mL組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,t=1.333,P=0.152。此外,100ng/mL GM-CSF組CD11c細(xì)胞的比例低于低2ng/mL組,t=2.571,P=0.034;但100ng/mL與20ng/mL組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,t=0.913,P=0.39。在20ng/mL GM-CSF時(shí),IL-4的加入與否對(duì)培養(yǎng)的DC細(xì)胞擴(kuò)增、純度、成熟、吞噬及活化淋巴細(xì)胞的能力均無(wú)影響,起始培養(yǎng)細(xì)胞密度可影響細(xì)胞的擴(kuò)增。結(jié)論:小鼠髓源DC細(xì)胞的培養(yǎng)中,GM-CSF濃度對(duì)細(xì)胞的擴(kuò)增及成熟均很重要,高濃度GM-CSF有利于DC的擴(kuò)增及成熟,而在GM-CSF為20ng/mL時(shí),IL-4對(duì)DC細(xì)胞的培養(yǎng)并不是必需的。
【作者單位】： 湖北文理學(xué)院醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院腫瘤中心;
【關(guān)鍵詞】： 樹(shù)突狀細(xì)胞 骨髓 細(xì)胞因子 動(dòng)物 實(shí)驗(yàn)
【基金】：湖北省衛(wèi)生廳青年科技人才項(xiàng)目(QJX2012-40)
【分類(lèi)號(hào)】：R329
【正文快照】： 樹(shù)突狀細(xì)胞(dendritic cell,DC)是體內(nèi)最有效的專(zhuān)職抗原提呈細(xì)胞,在機(jī)體免疫調(diào)節(jié)中發(fā)揮極為重要的作用,不僅具有免疫剌激作用,還可通過(guò)活化誘導(dǎo)免疫抑制性T細(xì)胞在維持外周免疫耐受中發(fā)揮重要的作用[1-2]。DC治療方法的研究為腫瘤治療及器官移植等提供了新的研究領(lǐng)域[3]。小鼠

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6 張罕;呂U，

本文編號(hào)：1006316