本文關鍵詞：人絲氨酸蛋白酶抑制因子Hespintor的基因克隆與序列分析

  更多相關文章： 絲氨酸蛋白酶抑制因子 Hespintor 逆轉錄PCR 基因克隆 生物信息學

【摘要】：目的:克隆得到人絲氨酸蛋白酶抑制因子Hespintor基因,并應用生物信息學方法進行序列分析。方法:提取HepG2細胞總RNA,RT-PCR擴增Hespintor基因片段,連接至pMD 20-T克隆載體中,轉化JM109宿主菌,藍白斑法篩選陽性克隆菌落,菌落PCR及測序鑒定。利用在線工具軟件對Hespintor進行信號肽預測、亞細胞定位、結構域、三級結構、基因染色體定位及組織分布表達分析。結果:人絲氨酸蛋白酶抑制因子Hespintor基因全長285bp,共編碼94aa,其中1-23aa編碼信號肽,符合亞細胞定位于細胞外的預測;53-93aa編碼一個典型的Kazal結構域。Hespintor基因的染色體定位于5號染色體短臂3區(qū)3帶1亞帶(5q33.1);正常組織中僅在睪丸有表達,而腫瘤組織中僅在生殖細胞瘤有表達。結論:Hespintor是一個在機體中靜止表達的Ka-zal型絲氨酸蛋白酶抑制因子家族的分泌型新成員。
【作者單位】： 大連大學醫(yī)學院遼寧省高校生物物理學重點實驗室;大連大學生命科學與技術學院;
【關鍵詞】： 絲氨酸蛋白酶抑制因子 Hespintor 逆轉錄PCR 基因克隆 生物信息學
【基金】：大連市科技計劃項目(“基因重組人絲氨酸蛋白酶抑制因子Hespintor抗肝細胞癌的藥效學研究”,編號:2010E13SF138)資助~~
【分類號】：R346
【正文快照】： 0引言Hespintor是利用抑制性差減扣除雜交技術研究乙型肝炎病毒DNA聚合酶反式調節(jié)作用,從人肝母細胞瘤HepG2細胞中篩選得到的一未知功能新基因,經Real Time PCR驗證后,結合生物信息學方法確定該基因是一種新的Kazal型絲氨酸蛋白酶抑制因子(serine proteinase inhibitor,SERPIN

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