本文關鍵詞：小鼠哮喘模型中IL-25和IL-33對氣道結構和功能影響的差異性研究

  更多相關文章： 哮喘 IL-25 IL-33 氣道炎癥 氣道重塑

【摘要】：目的:白細胞介素-25(Interleukin-25,IL-25)和白細胞介素-33(Interleukin-33,IL-33)屬于不同的細胞因子家族,均能誘導和促進Th2型氣道炎癥反應。這兩種細胞因子在哮喘發(fā)生發(fā)展中都起到重要作用,但尚無直接證據(jù)證明兩者作用的差異性。本實驗通過比較IL-25和IL-33誘導的小鼠哮喘樣氣道炎癥反應、氣道重塑和氣道高反應性等檢測指標以明確兩者間的差異。方法:建立周期為70天的慢性哮喘小鼠模型,設立(1)生理鹽水組(陰性對照組);(2)OVA模型組(陽性對照組);(3)IL-25模型組(實驗組);(4)IL-33模型組(實驗組)。收集小鼠肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)進行細胞計數(shù)和分類計數(shù);采用蘇木精-伊紅染色(hematoxylin-eosin staining,HE)染色,過碘酸-希夫(periodic acid-schiff,PAS)染色等方法觀察氣道炎癥細胞浸潤,黏液分泌等指標的變化。收集小鼠BALF上清,并制作肺組織勻漿,采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)檢測上述樣品中Ⅱ型輔助性T細胞(T helper cell type 2,Th2)細胞因子產(chǎn)生水平以及可溶性膠原纖維含量。免疫組化法觀察氣道平滑肌肥大、增生和新生血管形成情況,行激發(fā)試驗評估小鼠氣道高反應性。并且采用流式細胞術檢測肺組織、BALF、縱膈淋巴結、腸系膜淋巴結、脾臟、骨髓和胸腺中固有淋巴樣2型細胞(type 2 innate lymphoid cell,ILC2)的表達。結果:1.IL-25和IL-33模型組小鼠BALF中炎癥細胞總數(shù)和分類計數(shù):IL-25組小鼠BALF中細胞總數(shù)、嗜酸性粒細胞和中性粒細胞計數(shù)在36 d達到高峰后,迅速降低;IL-33組小鼠BALF中細胞總數(shù)、嗜酸性粒細胞和中性粒細胞計數(shù)在36 d達到高峰后,可持續(xù)至54 d,停止給藥后細胞數(shù)才緩慢降低。2.IL-25和IL-33模型組對小鼠肺組織病理學的改變:實驗24~70 d,IL-33組小鼠肺泡壁、肺泡腔、支氣管壁及伴行血管周圍有大量炎性細胞特別是嗜酸性粒細胞浸潤;支氣管粘膜皺襞增多、延長,管腔內(nèi)存有大量黏液性痰栓;氣道粘液腺增生,粘蛋白染色成強陽性反應,其炎癥改變較IL-25組小鼠更加持久。3.IL-25和IL-33模型組細胞因子和Ig E的表達:IL-25和IL-33單獨滴鼻給藥,均可引起小鼠肺組織勻漿中Th2型細胞因子及嗜酸性粒細胞趨化因子含量增加,但IL-33的作用更加顯著及持久。同時,IL-25和IL-33都不能增加小鼠血清中Ig E的表達水平。4.IL-25和IL-33在小鼠肺組織氣道重塑中的作用:實驗第48~70 d,IL-25組和IL-33組小鼠肺組織膠原沉積明顯,氣道平滑肌肥大、增生顯著,氣道黏膜下新生血管形成明顯,較生理鹽水組有統(tǒng)計學意義。但是,在實驗第70 d,IL-33組小鼠肺組織膠原沉積和血管形成程度都顯著高于IL-25組。5.IL-25和IL-33對小鼠氣道高反應性的影響:IL-25組和IL-33組小鼠接受乙酰甲膽堿激發(fā)后,表現(xiàn)出顯著的氣道高反應性。但是,與IL-25相比,IL-33誘導的小鼠氣道組織阻力的增加更加持久。6.IL-25和IL-33對小鼠不同組織器官中ILC2細胞的影響:IL-25直接滴鼻和IL-33直接滴鼻都可以誘導小鼠肺組織、BALF、縱膈淋巴結、腸系膜淋巴結、脾臟、骨髓中ILC2細胞數(shù)目增加,但IL-33滴鼻還可以誘導胸腺組織中ILC2細胞數(shù)目的增加,且IL-33的作用更加明顯且持久。結論:IL-25和IL-33單獨滴鼻都可以引起過敏原非依賴的小鼠氣道炎癥、氣道重塑和氣道高反應性以及多組織器官ILC2細胞的增多,但IL-33以低于IL-25 20倍的劑量即可引起相似的改變,且其作用更加明顯而持久。因此,深入研究IL-25和IL-33在哮喘發(fā)生發(fā)展中的作用機制尤為重要,兩者作為哮喘干預治療靶標的探索實驗尚需進一步開展。
【關鍵詞】：哮喘 IL-25 IL-33 氣道炎癥 氣道重塑
【學位授予單位】：首都醫(yī)科大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R562.25;R-332
【目錄】：

• 中文摘要5-8
• 英文摘要8-11
• 前言11-15
• 材料與方法15-33
• 實驗結果33-63
• 討論63-69
• 結論69-70
• 參考文獻70-77
• 文獻綜述77-99
• 參考文獻90-99
• 附錄：英文縮寫詞表99-102
• 攻讀學位期間發(fā)表文章情況102-107
• 致謝107-109
• 個人簡歷109-110

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李勝梅;沈朝斌;陸磊;夏尤佳;謝匡成;;小鼠哮喘模型肺部白介素17和白介素6的表達[J];臨床兒科雜志;2011年09期

2 梁成結,陳江華,劉金保,羅燦嶠;建立豚鼠哮喘模型的一種新方法[J];熱帶醫(yī)學雜志;2005年03期

3 李良昌;李宜丹;金東洙;;血管內(nèi)皮生長因子受體抑制劑對哮喘模型小鼠的抗肺部炎癥作用[J];延邊大學醫(yī)學學報;2008年03期

4 王桂蘭;魯繼榮;;逆轉錄病毒介導的基因轉染對哮喘模型炎癥機制的抑制作用[J];中國科學(C輯:生命科學);2009年03期

5 林敏娟;劉曉妍;馬洪明;劉升明;;小鼠哮喘模型頸靜脈-結狀神經(jīng)節(jié)內(nèi)參基因的篩選[J];中國臨床解剖學雜志;2012年04期

6 杜捷夫,崔德健,田東華,郭英江,呂國平;哮喘患者和哮喘模型血漿及肺組織中一氧化氮的研究[J];中華內(nèi)科雜志;1997年12期

7 杜云鵬;動物哮喘模型的DNA反義治療[J];國外醫(yī)學(分子生物學分冊);1997年04期

8 金美玲,蔡映云,任濤,鄭玲潔;草分支桿菌疫苗治療哮喘模型小鼠的實驗研究[J];復旦學報(醫(yī)學版);2002年06期

9 許淑云;徐永健;張珍祥;倪望;陳士新;;核因子κB在蛋白激酶C誘導哮喘模型大鼠氣道平滑肌細胞增殖中的作用[J];中國病理生理雜志;2007年11期

10 姜洪芳;白雪;王佳賀;;吸煙與戒煙對哮喘模型大鼠的影響[J];中國老年學雜志;2012年22期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 黃華瓊;王嬌莉;沈華浩;;不同致敏和激發(fā)時間對哮喘模型的影響[A];中華醫(yī)學會第11屆全國內(nèi)科學術會議論文匯編[C];2007年

2 黃華瓊;王嬌莉;沈華浩;;不同致敏和激發(fā)時間對哮喘模型的影響[A];華東地區(qū)第6屆中青年呼吸醫(yī)師論壇暨浙江省第29屆呼吸疾病學術年會論文匯編[C];2007年

3 李靜;李玉琴;;哮喘模型嗜酸粒細胞趨化因子及受體的研究[A];中華醫(yī)學會第十四次全國兒科學術會議論文匯編[C];2006年

4 范欣生;童黃錦;王露;顧鵬程;許惠琴;;一種病毒性哮喘模型方法的建立及評價[A];中華中醫(yī)藥學會中藥實驗藥理分會第七屆學術會議論文摘要匯編[C];2007年

5 張英蘭;吳銀根;;咳喘落對小鼠哮喘模型嗜酸細胞凋亡影響的實驗研究[A];第三屆海峽兩岸中西醫(yī)結合學術研討會論文集[C];2005年

6 蔣萍;鄭洪;戴嗣宏;;重組人血管內(nèi)皮抑制素對小鼠哮喘模型氣道重建的影響[A];第四屆中國中西醫(yī)結合變態(tài)反應學術會議論文匯編[C];2009年

7 劉暢;劉先勝;徐永健;趙建平;楊丹蕾;熊維寧;謝敏;;ERK信號通道在慢性哮喘模型大鼠肺泡巨噬細胞凋亡中的調控作用[A];中華醫(yī)學會第七屆全國哮喘學術會議暨中國哮喘聯(lián)盟第三次大會論文匯編[C];2010年

8 李文嘉;趙海金;董航明;宋甲富;;活性維生素D對甲苯二異氰酸酯哮喘模型氣道屏障功能的影響及機制探討[A];中華醫(yī)學會呼吸病學年會——2013第十四次全國呼吸病學學術會議論文匯編[C];2013年

9 蘇斌哠;倪殿濤;;肺表面活性物質對小鼠哮喘模型樹突細胞功能的調節(jié)機制研究[A];中華醫(yī)學會第七次全國呼吸病學術會議暨學習班論文匯編[C];2006年

10 鄧昱;劉恩梅;;IL-12+重組卡介苗新生期接種調節(jié)小鼠Th17/Th1平衡對實驗性哮喘模型的影響[A];中華醫(yī)學會第十五次全國兒科學術大會論文匯編（上冊）[C];2010年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前9條

1 李艷;小鼠哮喘模型中IL-25和IL-33對氣道結構和功能影響的差異性研究[D];首都醫(yī)科大學;2016年

2 馬建新;1，25-二羥維生素D_3聯(lián)合特異性免疫療法對小鼠哮喘模型的作用及其機制[D];第三軍醫(yī)大學;2010年

3 王桂蘭;IL-4RA基因轉染阻止了哮喘模型的炎癥發(fā)展[D];吉林大學;2006年

4 李英;咳喘寧對病毒誘發(fā)哮喘模型大鼠STAT6蛋白及其mRNA表達的影響[D];湖南中醫(yī)藥大學;2012年

5 鄧昱;IL-12~+重組卡介苗新生期接種干預實驗性哮喘模型的作用及其機制研究[D];重慶醫(yī)科大學;2010年

6 胡作為;止哮平喘方對哮喘豚鼠T淋巴細胞免疫功能影響的實驗研究[D];湖北中醫(yī)學院;2002年

7 楊君莉;口服Lal對正常新生鼠、成年鼠脾臟Th1/Th2平衡及誘導哮喘模型的影響[D];山東大學;2011年

8 盧珊;Th17細胞及IL-17A在哮喘模型小鼠氣道血管重塑中的作用及其機制研究[D];浙江大學;2015年

9 金華良;若干補腎與益氣中藥對大鼠哮喘模型的作用與機制研究[D];復旦大學;2013年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張艷蕊;三拗湯對哮喘模型大鼠氣道重塑過程中TGF-β1及NGF指標的影響[D];遼寧醫(yī)學院;2015年

2 魏s，

本文編號：812860