本文關鍵詞：吸入硫化氫對大鼠棉花煙霧吸入性肺損傷的干預作用

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【摘要】：煙霧吸入性損傷是火災后人群死亡的重要原因，火災后超過30%的燒傷病人合并有煙霧吸入性損傷，煙霧吸入性損傷使燒傷相關病死率增加20%，使煙霧吸入/燒傷合并傷的病死率達到30-90%。煙霧吸入性損傷重者發(fā)生中毒性肺炎或肺水腫，嚴重者極易導致急性肺損傷/急性呼吸窘迫綜合征(acute lung injury/acute respiratorydistress syndrome，ALI/ARDS)。因臨床尚無特異性治療方法，病死率很高，是呼吸及危重病科治療中的難題，同時也是戰(zhàn)傷研究的熱點之一。 近些年的研究中，內源性硫化氫(hydrogen sulfide，H2S)一改既往“有臭雞蛋氣味的廢氣”形象，被稱為繼一氧化氮(nitric oxide，NO)、一氧化碳(carbon monoxide，CO)之后的第三種氣體信號分子，具有抗氧化應激、調節(jié)炎癥反應、舒張血管、抗纖維化、參與調節(jié)內分泌及生殖系統(tǒng)功能等作用。實驗證實，低劑量的外源性H2S氣體吸入(對于小鼠有效且無副損傷的吸入方式為80ppm6h)或低劑量的H2S供體應用于多種原因所致的肺損傷動物模型，可起到減輕肺損傷、保護肺臟的作用。但吸入H2S氣體干預煙霧吸入性肺損傷的研究尚無報道。因此本課題設計吸入H2S氣體應用于棉花煙霧吸入性肺損傷的大鼠模型，觀察其干預效果并探討相關的機制。研究目的 1、設計制作大鼠棉花煙霧吸入性肺損傷模型。 2、觀察吸入H2S氣體80ppm6h對棉花煙霧吸入性肺損傷大鼠的干預效果，并完善相關指標的檢測。 3、觀察吸入H2S氣體80ppm3h或6h對棉花煙霧吸入性肺損傷大鼠干預效果的差異，同時探討在這一過程中的相關分子機制。研究方法 1、參考既往文獻，設計制作大鼠棉花煙霧吸入性肺損傷模型，，行血氣分析，觀察肺大體及肺組織病理學，ELISA法檢測大鼠支氣管肺泡灌洗液(bronchoalveolarlavage fluid，BALF)中總蛋白、白介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）、白介素-8(IL-8)濃度、肺組織丙二醛(malondialdehyde，MDA)、髓過氧化物酶(myeloperoxidase，MPO)濃度。 2、復制棉花煙霧吸入性肺損傷的大鼠模型，吸入H2S氣體80ppm6h，行前述指標檢測，同時ELISA法檢測肺組織中誘導型一氧化氮合酶(inducible nitric oxidesynthase，iNOS)、核因子-κBp65片段(the p65subunit of nuclear factor kappaB，NF-κBp65)濃度，熒光定量PCR法行肺組織iNOS mRNA定量。 3、復制棉花煙霧吸入性肺損傷的大鼠模型，分別吸入H2S氣體80ppm3h或6h，行前述指標及肺濕干重比檢測，同時ELISA法檢測肺組織中NO、谷胱甘肽(glutathione，GSH）、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-glutamyl cysteine synthetase，γ-GCS)濃度，免疫組化檢測肺組織NF-κBp65、核因子-E2相關因子(nuclear factor-E2relatedfactor，Nrf2)并進行半定量分析，熒光定量PCR法行肺組織γ-GCS mRNA定量。 結果 1、與正常對照組比較，大鼠棉花煙霧吸入致傷后6h肺組織可見明顯充血、水腫，表面大部分區(qū)域有鮮紅色至深紅色出血，鏡下見肺泡結構彌漫性破壞，腔內可見透明膜及漏出的紅細胞，肺泡間隔增厚，炎癥細胞明顯浸潤等典型的肺損傷表現(xiàn)，BALF中總蛋白、IL-1β、IL-8濃度明顯升高，肺組織MDA、MPO濃度均升高，也支持急性肺損傷的診斷。 2、煙霧吸入后立即予以80ppm H2S氣體吸入6h，大鼠肺損傷的組織病理學表現(xiàn)明顯減輕，氧合指數升高，BALF中總蛋白、IL-1β、IL-8濃度降低，肺組織中MDA、MPO、iNOS、NF-κBp65濃度、iNOS mRNA相對表達量均降低。但健康大鼠吸入80ppmH2S氣體6h有輕度的肺損傷表現(xiàn)。 3、煙霧+H2S3h組和煙霧+H2S6h組兩組大鼠的肺組織病理學、動脈血氧分壓、肺濕干重比、MDA等指標對比無明顯差別，可認為兩者減輕肺損傷的效果相似，并且兩組大鼠肺組織中NF-Bp65或Nrf2的累積光密度、iNOS mRNA或γ-GCS mRNA的相對表達量、NF-Bp65、iNOS、NO、GSH濃度均降低，γ-GCS濃度無明顯差異。但健康大鼠單純吸入80ppmH2S氣體3h無明顯肺損傷表現(xiàn)。 結論 1、棉花煙霧吸入可導致大鼠急性肺損傷，吸入致傷后6h大鼠的氧合指數、肺濕干重比、BALF中總蛋白、IL-1β、IL-8濃度、肺組織中MDA、MPO濃度等檢測指標與人類急性肺損傷的表現(xiàn)相似。 2、吸入H2S80ppm6h可通過抑制氧化應激和炎癥反應而減輕大鼠棉花煙霧吸入性肺損傷，但吸入H2S80ppm6h也可能導致大鼠輕度肺損傷。 3、吸入H2S減輕大鼠棉花煙霧吸入性肺損傷的機制可能是吸入H2S抑制了NF-κBp65的激活，使iNOS mRNA的轉錄合成減少，減少了iNOS的表達和NO的合成，從而減輕氧化應激反應，減輕了大鼠的肺損傷。吸入80ppm H2S可減輕大鼠煙霧吸入性肺損傷，但時間不可過長，3h是適宜時間，6h可導致肺損傷。
【關鍵詞】：煙霧吸入性損傷 硫化氫 氧化應激 急性肺損傷 核因子-κB
【學位授予單位】：第二軍醫(yī)大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R563.8
【目錄】：

• 摘要5-8
• Abstract8-11
• 英文縮略詞表11-12
• 前言12-17
• 參考文獻15-17
• 第一部分 大鼠棉花煙霧吸入性肺損傷模型的建立17-31
• 一、材料與方法17-21
• 二、結果21-29
• 三、討論29-30
• 參考文獻30-31
• 第二部分 吸入硫化氫對大鼠煙霧吸入性肺損傷的干預作用31-53
• 一、材料與方法31-34
• 二、結果34-48
• 三、討論48-50
• 參考文獻50-53
• 第三部分 吸入硫化氫干預大鼠煙霧吸入性肺損傷中的氧化/抗氧化反應53-75
• 一、材料與方法53-55
• 二、結果55-69
• 三、討論69-72
• 參考文獻72-75
• 全文總結75-76
• 綜述一 ALI/ARDS 與細胞信號轉導76-87
• 參考文獻84-87
• 綜述二 煙霧吸入性 ALI/ARDS 與細胞應激87-95
• 參考文獻92-95
• 綜述三 火災后煙霧吸入性損傷的救治95-105
• 參考文獻102-105
• 論文發(fā)表情況105-106
• 致謝106

【參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前7條

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本文編號：787008