發(fā)布時間：2017-08-23 21:42

  本文關鍵詞：AP318在煙草煙霧引起的人支氣管上皮細胞和人肺微血管內(nèi)皮細胞氧化應激中的影響

  更多相關文章： AP318 慢性阻塞性肺病 香煙煙霧總提取物 氧化應激損傷

【摘要】：目的：探討環(huán)肽AP318在煙草煙霧引起的人支氣管上皮細胞(HBEpCs)和人肺微血管內(nèi)皮細胞(HPMVECs)氧化應激中的影響。環(huán)肽AP318是人工模擬合成源于人腫瘤壞死因子(TNF)上的類凝集素結構域(the lectin-like domain TIP)的一段肽鏈。該研究為進一步展開用實驗鼠做體內(nèi)試驗給予數(shù)據(jù)支持,并最終為治療慢性阻塞性肺病(COPD)找到一種更加安全的生物類藥物。方法：首先在培養(yǎng)的細胞中加入50ug/ml的AP318孵育30分鐘,然后加入5%含有香煙煙霧總提取物(TSE)原液的細胞培養(yǎng)液處理人支氣管上皮細胞5小時和24小時。同時設置陰性對照組(只有細胞培養(yǎng)液)；AP318組(只有AP318和培養(yǎng)液)；TSE陽性對照組(只有TSE和培養(yǎng)液)。通過檢測氧化損傷標志物8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)來驗證細胞氧化應激損傷的程度；通過脫氧核糖核苷酸末端轉移酶介導的缺口末端標記法(terminal-deoxynucleotidyl transf erase mediated nick end labeling, TUNEL)和檢測激活型半胱天冬酶-3(active caspase-3)來驗證TSE引起的細胞凋亡程度。結果：1、8-OHdG檢測結果顯示,5小時和24小時處理的細胞,陽性對照TSE組細胞氧化損傷程度較陰性對照組細胞的氧化損傷程度有顯著提高(P0.05)；同時,除了5小時處理的上皮細胞,AP318+TSE組細胞的氧化損傷程度較TSE組細胞的氧化損傷程度都有明顯降低,差異顯著(P0.05)或及其顯著(P0.005)。2、TUNEL檢測結果顯示,5小時和24小時處理的細胞,陽性對照TSE組細胞凋亡程度較陰性對照組細胞凋亡程度有顯著提高(P0.05);同時,AP318+TSE組細胞凋亡程度較TSE組細胞凋亡程度有明顯降低,差異顯著(P0.05)或及其顯著(P0.005)。3、激活型半胱天冬酶-3(active caspase-3)檢測結果顯示,5小時處理的細胞早期凋亡無顯著差異(P0.05)；24小時處理的細胞,TSE組細胞早期凋亡指數(shù)較陰性對照組細胞有顯著提高(P0.05)；同時,24小時處理的細胞,AP318+TS E組細胞早期凋亡指數(shù)較TSE組細胞早期凋亡指數(shù)有明顯降低,差異顯著(P0.05)。結論；1、香煙煙霧總提取物能夠引起人支氣管上皮細胞和人肺微血管內(nèi)皮細胞的氧化應激并造成細胞的死亡和凋亡。2、AP318能夠阻止或減弱香煙煙霧引起的人支氣管上皮細胞和人肺微血管內(nèi)皮細胞的氧化應激損傷。
【關鍵詞】：AP318 慢性阻塞性肺病 香煙煙霧總提取物 氧化應激損傷
【學位授予單位】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R56
【目錄】：

• 摘要3-4
• Abstract4-9
• 1 引言9-12
• 1.1 慢性阻塞性肺病概述9
• 1.2 國內(nèi)外研究現(xiàn)狀9-11
• 1.2.1 國外研究現(xiàn)狀9-11
• 1.2.2 國內(nèi)研究現(xiàn)狀11
• 1.3 研究內(nèi)容及意義11-12
• 2 材料與方法12-14
• 2.1 香煙煙霧總提取物的制備12-13
• 2.2 細胞培養(yǎng)及處理13
• 2.3 氧化損傷標志物8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)檢測13
• 2.4 脫氧核糖核苷酸末端轉移酶介導的缺口末端標記法(TUNEL)的檢測13
• 2.5 激活型半胱天冬酶-3(active caspase-3)的檢測13
• 2.6 統(tǒng)計分析13-14
• 3 結果分析14-22
• 3.1 TSE引起的人支氣管上皮細胞凋亡的早期檢測以及環(huán)肽AP318對細胞凋亡的影響14-15
• 3.2 TSE引起的人肺微血管內(nèi)皮細胞凋亡的早期檢測以及環(huán)肽AP318對細胞凋亡的影響15-16
• 3.3 TSE造成人支氣管上皮細胞的氧化損傷以及標志物檢測16-18
• 3.4 TSE造成人肺微血管內(nèi)皮細胞的氧化損傷以及標志物檢測18-19
• 3.5 通過脫氧核糖核苷酸末端轉移酶介導的缺口末端標記法再次證實TSE引起的人支氣管上皮細胞的凋亡,以及環(huán)肽AP318的作用19-21
• 3.6 通過脫氧核糖核苷酸末端轉移酶介導的缺口末端標記法再次證實TSE引起的人肺微血管內(nèi)皮細胞的凋亡,以及環(huán)肽AP318的作用21-22
• 4 討論與結論22-24
• 致謝24-25
• 參考文獻25-28
• 作者簡介28

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 ;慢性阻塞性肺疾病診治指南(2013年修訂版)[J];中國醫(yī)學前沿雜志(電子版);2014年02期

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本文編號：727511