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鈾礦塵對肺成纖維細(xì)胞合成膠原蛋白影響研究

發(fā)布時間:2017-08-06 04:25

  本文關(guān)鍵詞:鈾礦塵對肺成纖維細(xì)胞合成膠原蛋白影響研究


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【摘要】:目的觀察鈾礦塵對小鼠肺成纖維細(xì)胞合成膠原蛋白的影響并探討其機(jī)制。方法①取小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7細(xì)胞分為溶劑對照組和染塵組,分別以終濃度為0、120 mg/L的鈾礦塵混懸液處理0、2、4、8、16、24和32 h后,收集細(xì)胞上清液,采用酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)法檢測轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)水平,選擇最佳染塵時間,分離制備該時間點的2組細(xì)胞上清液作為條件培養(yǎng)液(CM)進(jìn)行后續(xù)實驗。②取小鼠肺成纖維細(xì)胞L929細(xì)胞分為對照組和鈾礦塵組,分別予溶劑對照組和染塵組的CM處理0、6、12、18、24、30、36 h后,采用免疫組化法檢測細(xì)胞內(nèi)α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)的表達(dá),ELISA法檢測細(xì)胞上清液中Ⅰ型膠原蛋白(COLⅠ)、III型膠原蛋白(COLⅢ)和羥脯氨酸(HYP)的水平。結(jié)果①染塵組RAW264.7細(xì)胞上清液中TGF-β1水平從染塵后4 h時間點起開始較溶劑對照組出現(xiàn)有統(tǒng)計學(xué)意義的升高(P0.05);在染塵后4~24 h呈隨染塵時間的增加而升高的時間-效應(yīng)關(guān)系(P0.05),至染塵后24 h達(dá)到峰值。取染塵后24 h時間點的2組細(xì)胞上清液作為CM進(jìn)行后續(xù)實驗。②相較同時間點對照組,鈾礦塵組在經(jīng)相應(yīng)CM處理后18~36 h,L929細(xì)胞中α-SMA表達(dá)水平均上調(diào)(P0.05),在CM處理后12~36 h,L929細(xì)胞上清液中COLⅠ、COLⅢ和HYP的水平均升高(P0.05),且α-SMA表達(dá)水平和COLⅢ、HYP的水平均不同程度地呈現(xiàn)隨CM作用時間的增加而升高的時間-效應(yīng)關(guān)系(P0.05)。結(jié)論鈾礦塵刺激巨噬細(xì)胞后可導(dǎo)致細(xì)胞分泌TGF-β1增加,繼而作用于成纖維細(xì)胞,上調(diào)α-SMA表達(dá),增加COLⅠ、COLⅢ和HPY合成,可能是鈾礦塵致肺纖維化的機(jī)制之一。
【作者單位】: 南華大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院預(yù)防醫(yī)學(xué)系;
【關(guān)鍵詞】鈾礦塵 肺纖維化 成纖維細(xì)胞 巨噬細(xì)胞 轉(zhuǎn)化生長因子-β α-平滑肌肌動蛋白 膠原蛋白 羥脯氨酸
【基金】:湖南省教育廳基金(15C1198)
【分類號】:R135.2
【正文快照】: expression,and increase the ColⅠ,ColⅢand HYP synthesis.These might be the important mechanisms of lungfibrosis.鈾礦塵屬于一種混合型粉塵,其主要成分是游離二氧化硅(Si O2,水平一般為20.00%~80.00%),其次還含有天然鈾及其衰變產(chǎn)物如鐳、釙和氡等放射性核素[1]。鈾

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