本文關(guān)鍵詞：依達(dá)拉奉對(duì)COPD大鼠氧化應(yīng)激及肺泡上皮細(xì)胞凋亡的影響

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【摘要】：目的:探索依達(dá)拉奉(EDA)對(duì)COPD大鼠氧化應(yīng)激及肺泡上皮細(xì)胞凋亡的影響。方法:采用隨機(jī)數(shù)字法將30只雄性SD大鼠分為3組,即正常對(duì)照組(Control組)、COPD組及依達(dá)拉奉干預(yù)組(EDA組)。COPD組:分別在實(shí)驗(yàn)的第1、14天給予脂多糖200ug/200ul氣道滴入,并于第2至13天、第15至第28天暴露于香煙煙霧中,腹腔注射藥物用生理鹽水代替;依達(dá)拉奉干預(yù)組:采用同樣的方法復(fù)制大鼠COPD模型,于每次煙熏前給予依達(dá)拉奉20mg/kg腹腔注射;正常對(duì)照組:不進(jìn)行煙熏,氣道滴入及腹腔注射藥物均以生理鹽水替代。造模4周后取大鼠支氣管肺泡灌洗液(BALF)進(jìn)行細(xì)胞總數(shù)計(jì)數(shù)及細(xì)胞分類,分別使用WST-1及TBA法檢測(cè)各組大鼠血漿超氧化物歧化酶活力(SOD)及丙二醛(MDA)水平。蘇木素-伊紅(HE)染色觀察肺組織病理變化,在顯微鏡下(×200)下測(cè)量肺泡數(shù)及肺泡間隔數(shù)并通過(guò)公式計(jì)算出平均內(nèi)襯間隔和平均肺泡數(shù),免疫組化檢測(cè)CHOP、Caspase-12在肺組織的表達(dá),TUNEL法檢測(cè)肺泡上皮細(xì)胞凋亡。結(jié)果:(1)一般情況:COPD組大鼠食欲下降、體重下降、活動(dòng)減少、毛色暗淡,呼吸變的淺快,口唇及四肢紫紺,煙熏時(shí)呼吸加快、伴有明顯喘息,驅(qū)趕時(shí)反應(yīng)遲鈍,部分大鼠出現(xiàn)嗜睡、煩躁等癥狀;Control組食欲好,體重增加明顯,反應(yīng)迅速,毛色光澤度好,口唇及四肢紅潤(rùn);EDA組大鼠一般情況較COPD組大鼠好。(2)各組大鼠支氣管肺泡灌洗液中細(xì)胞總數(shù)及中性粒細(xì)胞比例:COPD組(4.54±0.11×10~8/L、20.39±2.34%)與Control組(1.53±0.08×10~8/L、4.95±0.83%)相比有明顯升高(P0.05),而經(jīng)過(guò)依達(dá)拉奉治療后,EDA組(2.55±0.18×10~8/L、10.6±2.42%)較COPD組明顯下降(P0.05)。(3)與Control組(4.38±0.63nmol/L)相比,COPD組(8.14±0.79nmol/L)MDA水平顯著升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),EDA組(5.67±0.82nmol/L)大鼠血漿MDA水平較COPD組明顯降低,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與Control組(24.54±1.08 U/ml)相比,COPD組(14.94±2.25U/ml)SOD活性明顯降低(P0.05),經(jīng)過(guò)依達(dá)拉奉治療后,EDA組(19.66±1.68U/ml)SOD活性較COPD組升高,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(4)蘇木素-伊紅(HE)染色COPD組大鼠肺組織及氣道可見(jiàn)大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)及肺泡變大、肺泡結(jié)構(gòu)破壞等表現(xiàn),EDA組大鼠肺氣腫表現(xiàn)及氣道炎癥程度較COPD組減輕;肺組織形態(tài)學(xué)分析結(jié)果顯示,COPD組平均內(nèi)襯間隔(MLI)及平肺泡數(shù)(MAN)分別為(81.99±6.39×10~(-6)m、89.523±6.99×10~6/m~2),與Control組(46.14±2.55×10~(-6)m、161.99±7.86×10~6/m~2)比,MLI明顯增加,MAN明顯減少(P0.05);經(jīng)過(guò)依達(dá)拉奉治療后,EDA組平均內(nèi)襯間隔(MLI)及平肺泡數(shù)(MAN)分別是(63.01±4.85×10~(-6)m、112.85±9.36×10~6/m~2),與COPD組比,MLI明顯減小、MAN明顯增加,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(5)肺組織Caspase-12及CHOP免疫組化測(cè)定:主要表達(dá)在肺泡上皮細(xì)胞上,COPD組大鼠肺組織Caspase-12及CHOP積分光密度(IOD)值分別為(10150.9±273.9、9884.1±265.9)比Control組(1456.9±87.5、1072.4±136.2)明顯增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);經(jīng)過(guò)依達(dá)拉奉治療后,EDA組(6443.9±312.4、6128.9±195.4)IOD值較COPD組明顯下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(6)TUNEL法檢測(cè)肺泡上皮細(xì)胞凋亡情況:COPD組凋亡指數(shù)(AI)為(40.61±1.86%),較Control組(10.4±1.17%)明顯升高(P0.01),經(jīng)過(guò)依達(dá)拉奉治療后,EDA組(24.75±1.71%)凋亡指數(shù)(AI)較COPD組降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:依達(dá)拉奉可以減輕COPD大鼠氧化應(yīng)激和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激,使肺泡上皮細(xì)胞凋亡減少,其機(jī)制可能與依達(dá)拉奉抗氧化作用有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：依達(dá)拉奉 氧化應(yīng)激 細(xì)胞凋亡 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激 慢性阻塞性肺疾病
【學(xué)位授予單位】：西南醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R563.9
【目錄】：

• 中文摘要3-6
• 英文摘要6-9
• 前言9-13
• 材料與方法13-23
• 結(jié)果23-33
• 討論33-39
• 結(jié)論39-40
• 參考文獻(xiàn)40-48
• 主要縮略詞對(duì)照表48-50
• 致謝50-51
• 慢性阻塞性肺疾病中氧化應(yīng)激及抗氧化治療的研究進(jìn)展（綜述）51-63
• 參考文獻(xiàn)57-63

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本文編號(hào)：611615