本文關(guān)鍵詞：依達(dá)拉奉對(duì)急性肺損傷大鼠肺組織細(xì)胞凋亡的影響

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【摘要】：目的在臨床工作中,急性肺損傷患者病死率很高。研究發(fā)現(xiàn)細(xì)胞凋亡可以發(fā)生在急性肺損傷的任何時(shí)期。在臨床治療中,依達(dá)拉奉用于腦梗塞的臨床治療,但是其對(duì)肺部的作用機(jī)制還沒(méi)有具體的報(bào)道,本文以大鼠實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型為基礎(chǔ),從細(xì)胞凋亡的角度去探討依達(dá)拉奉可能的作用機(jī)制。方法本課題選用Wistar大鼠,體重(200±10)g,雄性。隨機(jī)分為3組,。對(duì)照組(con組):一次性靜脈注射1 m L生理鹽水;急性肺損組(ALI組):一次性給予5mg/kg脂多糖靜脈注射。依達(dá)拉奉治療組(Edaravone,EDA治療組),一次性給予5mg/kg脂多糖靜脈注射造模后,之后給予0.5mg/kg/天依達(dá)拉奉腹腔注射。7天后留取各組肺組織,行HE染色觀察各組形態(tài),免疫組織化學(xué)染色和Western blot檢測(cè)各組肺組織Bcl-2、Bax和Caspase3的分布及表達(dá)情況。結(jié)果:1.HE染色結(jié)果顯示:對(duì)照組細(xì)胞形態(tài)正常,肺泡結(jié)構(gòu)清晰;ALI組肺泡壁出現(xiàn)塌陷且水腫嚴(yán)重,伴有大量炎性細(xì)胞的浸潤(rùn),肺泡隔顯著增厚,并有局部出血;與ALI組相比,EDA治療組肺組織結(jié)構(gòu)破壞及水腫較輕,炎性細(xì)胞浸潤(rùn)較少。2.免疫印跡結(jié)果顯示:與Con組相比,ALI組中的抗凋亡蛋白Bcl-2的表達(dá)水平明顯降低,同時(shí)觀察到促凋亡蛋白Bax表達(dá)水平明顯增加,且肺組織中Cleaved-caspase3蛋白的表達(dá)明顯增高。與ALI組相比,EDA治療組中的抗凋亡蛋白Bcl-2的表達(dá)水平明顯增高,促凋亡蛋白Bax表達(dá)水平顯著降低,肺組織中Cleaved-caspase3蛋白的表達(dá)顯著降低。3.免疫組化結(jié)果顯示:Con組中的抗凋亡蛋白Bcl-2在核漿中表達(dá),促凋亡蛋白Bax在正常的肺組織中幾乎沒(méi)有表達(dá),而且Caspase3在正常的肺組織中幾乎沒(méi)有表達(dá)。但是,在ALI組中我們發(fā)現(xiàn)了核漿中Bcl-2的表達(dá)水平明顯降低,同時(shí)還發(fā)現(xiàn)了ALI組中Bax和Caspase3在核漿和細(xì)胞質(zhì)中表達(dá)水平明顯高于Con組。在EDA治療組中我們發(fā)現(xiàn):與ALI組相比,核漿中的Bcl-2的表達(dá)水平明顯增高,核漿中的Bax明顯降低,胞質(zhì)中的Bax和Caspase3幾乎沒(méi)有表達(dá),同時(shí)還發(fā)現(xiàn)EDA治療組中的Caspase3蛋白幾乎不表達(dá),與con組沒(méi)有區(qū)別。結(jié)論:依達(dá)拉奉在急性肺損傷大鼠肺組織中通過(guò)上調(diào)Bcl-2和下調(diào)Bax蛋白水平來(lái)降低細(xì)胞凋亡。同時(shí),其可能通過(guò)減少Caspase3依賴途徑的凋亡來(lái)保護(hù)肺組織。
【關(guān)鍵詞】：急性肺損傷 依達(dá)拉奉 凋亡 Bcl-2 Caspase3
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R563
【目錄】：

• 摘要4-6
• abstract6-11
• 第1章 緒論11-12
• 第2章 文獻(xiàn)綜述12-16
• 2.1 急性肺損傷的研究現(xiàn)狀12
• 2.2 依達(dá)拉奉的研究及應(yīng)用12-13
• 2.2.1 依達(dá)拉奉的理化性質(zhì)12-13
• 2.2.2 依達(dá)拉奉的藥物作用特點(diǎn)13
• 2.3 細(xì)胞凋亡信號(hào)途徑13-15
• 2.3.1 外源性死亡受體通路14
• 2.3.2 內(nèi)源性線粒體通路14
• 2.3.3 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與細(xì)胞凋亡14-15
• 2.4 依達(dá)拉奉與急性肺損傷引起的細(xì)胞凋亡15-16
• 第3章 實(shí)驗(yàn)材料16-19
• 3.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物16
• 3.2 主要藥品與來(lái)源16-17
• 3.3 需配制的試劑17
• 3.4 儀器17-19
• 第4章 實(shí)驗(yàn)方法19-23
• 4.1 急性肺損傷大鼠動(dòng)物模型制備19
• 4.2 實(shí)驗(yàn)步驟19-22
• 4.2.1 石蠟切片制作基本過(guò)程19
• 4.2.2 HE染色19-20
• 4.2.3 免疫組織化學(xué)法檢測(cè)Bcl-2、Bax和Caspase3的蛋白表達(dá)20
• 4.2.4 Western blot檢測(cè)Bcl-2、Bax和Caspase3的蛋白表達(dá)20-22
• 4.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理22-23
• 第5章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果23-28
• 5.1 急性肺損傷大鼠肺部 HE 染色23
• 5.2 大鼠肺組織中 Bcl-2 和 Bax 蛋白的表達(dá)23-26
• 5.2.1 Western Blot 檢測(cè)肺組織中 Bcl-2 和 Bax 蛋白的表達(dá)23-24
• 5.2.2 免疫組化法檢測(cè)急性肺損傷大鼠肺組織中Bcl-2 蛋白的表達(dá)24-25
• 5.2.3 免疫組化法檢測(cè)急性肺損傷大鼠肺組織中Bax蛋白的表達(dá)25-26
• 5.3 急性肺損傷大鼠肺組織中Caspase3蛋白的表達(dá)檢測(cè)26-28
• 第6章 討論28-31
• 第7章 結(jié)論31-32
• 參考文獻(xiàn)32-36
• 作者簡(jiǎn)介及在學(xué)期間所取得的科研成果36-37
• 致謝37

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