發(fā)布時間：2024-05-20 23:21

　　目的:急性肺損傷(acute lung injury,ALI)是一種發(fā)病率和死亡率較高的疾病,其特征之一是嚴重的肺水腫,位于肺泡Ⅱ型上皮細胞(alveolar typeⅡepithelial cells,ATⅡ)頂膜側的上皮鈉通道(epithelail sodium channels,ENaC)對完成肺泡腔內鈉水轉運和水腫液清除至關重要。間充質干細胞(mesenchymal stem cells,MSCs)具有調節(jié)組織損傷的免疫反應并促進體內修復的能力,并已被建議作用于多種肺疾病(其中包括ALI),MSCs能夠釋放多種細胞因子和生長因子,外泌體和微小RNA(microRNAs,miRNAs)等。MiRNAs在生物過程中發(fā)揮重要調控作用,此外,它們還與一些肺部疾病的發(fā)病機制有關。我們推測小鼠骨髓間充質干細胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)可能通過miRNAs影響ATⅡ中ENaC的功能,從而對ALI發(fā)揮治療作用。本實驗旨在探討miRNAs與ENaC之間的關系,明確其是否影響Na+的跨膜轉運并探討其可能的分子機制。研究方法:1、通過CCK-...

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
1 前言
2 材料和方法
    2.1 材料
        2.1.1 動物和細胞
        2.1.2 試劑
        2.1.3 儀器和材料
        2.1.4 主要溶液配制
    2.2 實驗方法
        2.2.1 小鼠BMSCs的分離與培養(yǎng)
        2.2.2 胎鼠ATⅡ的分離與培養(yǎng)
        2.2.3 H441細胞培養(yǎng)
        2.2.4 CCK-8細胞增殖實驗
        2.2.5 Western Blot分析
        2.2.6 qRT-PCR分析
        2.2.7 尤斯灌流實驗
        2.2.8 qRT-PCR測定轉染效率
        2.2.9 MiRNAs轉染ATⅡ
        2.2.10 MiRNAs轉染BMSCs及 BMSCs與 ATⅡ細胞共培養(yǎng)
        2.2.11 siRNA特異性敲減PTEN
        2.2.12 統(tǒng)計學分析
3 實驗結果
    3.1 BMSCs對 H441 細胞生存能力的影響
    3.2 BMSCs對 ATⅡ細胞中ENaC和 PTEN蛋白表達水平的影響
    3.3 BMSCs對 ATⅡ細胞中ENaC mRNA表達水平的影響
    3.4 BMSCs對 H441 單層細胞短路電流的影響
    3.5 BMSCs對 ATⅡ細胞中miR-130b表達水平的影響
    3.6 MiR-130b的轉染效率
    3.7 MiR-130b對 ATⅡ中PTEN和 ENaC蛋白表達的影響
    3.8 BMSCs通過miR-130b對 ATⅡ中PTEN和 ENa C蛋白表達的影響
    3.9 敲減PTEN的表達對ENa C蛋白表達的影響
4 討論
5 結論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
綜述
    參考文獻
攻讀學位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷



本文編號：3979271