發(fā)布時(shí)間：2023-11-10 19:35

　　目的通過油酸誘導(dǎo)的ARDS大鼠模型,探討阿米洛利對(duì)急性肺損傷的影響以及這種影響是否是通過PI3K/Akt信號(hào)通路實(shí)現(xiàn)的。方法將96只Wistar雄性大鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組、DMSO組、ARDS模型組、阿米洛利干預(yù)組。建立油酸型ARDS大鼠模型,分別于注射油酸4 h、8 h和12 h時(shí)收集大鼠血清和肺泡灌洗液,稱取大鼠肺組織濕重(LW)和干重(DW),計(jì)算LW/DW比值和大鼠肺水清除率(AFC);采用Elisa法檢測(cè)大鼠血清和肺泡灌洗液中uPAR、TNF-α、IL-6和IL-10水平;采用HE染色方法觀察大鼠肺組織病理學(xué)變化;采用免疫組化方法檢測(cè)大鼠肺組織中VEGF、VCAM-1和ET-1陽(yáng)性表達(dá)水平;采用RT-PCR法檢測(cè)大鼠肺組織中uPAR、PI3K、Akt和GSK 3βmRNA表達(dá)水平;采用Western blot檢測(cè)大鼠肺組織中uPAR、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt和GSK 3β蛋白表達(dá)水平。結(jié)果(1)在注射油酸4 h、8 h、12 h后,與對(duì)照組比較,ARDS大鼠LW/DW明顯增大,AFC值明顯減小;阿米洛利干預(yù)可使LW/DW明顯減小,AFC值明顯增加;(2)AR...

【文章頁(yè)數(shù)】：61 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
第一章 引言
    1.1 ARDS研究進(jìn)展
        1.1.1 定義和流行病學(xué)
        1.1.2 病理學(xué)
        1.1.3 發(fā)病機(jī)制
        1.1.4 藥物治療現(xiàn)狀
    1.2 PI3K/AKT信號(hào)通路與ARDS的研究進(jìn)展
        1.2.1 PI3K/Akt信號(hào)通路
        1.2.2 PI3K/Akt信號(hào)通路與ARDS
    1.3 UPAR與 PI3K/AKT信號(hào)通路的研究進(jìn)展
        1.3.1 uPAR
        1.3.2 阿米洛利
        1.3.3 uPAR與 PI3K/Akt信號(hào)通路
    1.4 研究目的及意義
第二章 資料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 主要試劑
        2.1.2 主要儀器
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 ARDS大鼠模型建立
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)分組
        2.2.3 樣品收集
        2.2.4 大鼠肺組織濕重/干重比測(cè)定
        2.2.5 肺泡液體清除率(AFC)的測(cè)定
        2.2.6 ELISA檢測(cè)大鼠血清和肺泡灌洗液中uPAR、TNF-α、IL-6和IL-10含量
        2.2.7 HE染色觀察大鼠肺組織病理學(xué)變化
        2.2.8 免疫組化檢測(cè)大鼠肺組織VEGF、VCAM-1和ET-1 陽(yáng)性表達(dá)水平
        2.2.9 RT-PCR法檢測(cè)大鼠肺組織uPAR、PI3K、Akt和 GSK3βmRNA表達(dá)
        2.2.10 WB檢測(cè)大鼠肺組織uPAR和 PI3K/Akt信號(hào)通過關(guān)鍵蛋白的表達(dá)
        2.2.11 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
第三章 結(jié)果
    3.1 阿米洛利對(duì)大鼠肺組織LW/DW值的影響
    3.2 阿米洛利對(duì)大鼠肺組織AFC的影響
    3.3 阿米洛利對(duì)大鼠血清和肺泡灌洗液中UPAR、TNF-Α、IL-6和IL-10 含量的影響
        3.3.1 血清
        3.3.2 肺泡灌洗液
    3.4 阿米洛利對(duì)大鼠肺組織形態(tài)學(xué)的影響
    3.5 阿米洛利對(duì)大鼠肺組織中VEGF表達(dá)的影響
    3.6 阿米洛利對(duì)大鼠肺組織中VCAM-1表達(dá)的影響
    3.7 阿米洛利對(duì)大鼠肺組織中ET-1表達(dá)的影響
    3.8 阿米洛利對(duì)大鼠肺組織中UPAR表達(dá)的影響
    3.9 阿米洛利對(duì)大鼠肺組織中PI3K/AKT信號(hào)通路因子表達(dá)的影響
第四章 討論
第五章 結(jié)論
第六章 不足與展望
參考文獻(xiàn)
中英文縮略詞表
致謝
在學(xué)期間的研究成果
倫理批準(zhǔn)函



本文編號(hào)：3862182