該研究利用實(shí)時(shí)無(wú)標(biāo)記細(xì)胞分析系統(tǒng)（xCELLigence real-time cell analysis system,RTCA）建立氣道平滑肌細(xì)胞（airway smooth muscle cells,ASMCs）收縮舒張效應(yīng)檢測(cè)方法。篩選適宜細(xì)胞接種密度,接種于RTCA檢測(cè)板中監(jiān)測(cè)細(xì)胞動(dòng)態(tài)生長(zhǎng)曲線;利用組胺刺激細(xì)胞收縮,并計(jì)算組胺半數(shù)抑制濃度(IC₅₀);在適宜組胺刺激濃度的基礎(chǔ)上,利用特布他林模擬細(xì)胞舒張效應(yīng),并計(jì)算半數(shù)有效濃度(EC₅₀)。結(jié)果顯示,ASMCs為4 000個(gè)/孔接種密度培養(yǎng)于（16±4） h區(qū)間內(nèi),符合后續(xù)實(shí)驗(yàn)需求;組胺作用ASMCs 2 h后的IC₅₀為8.07 mmol/L,故選擇8 mmol/L組胺刺激ASMCs可見(jiàn)較為明顯的收縮效應(yīng);特布他林作用ASMCs 2 h后的EC₅₀為8.08×10^–8 mol/L,故濃度為10 μmol/L和20 μmol/L的特布他林可檢測(cè)到明顯舒張效應(yīng)（P＜0.05）。利用RTCA可以穩(wěn)定、有效、可靠地檢測(cè)ASMC... 

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 細(xì)胞來(lái)源
        1.1.2 主要試劑
        1.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.2.1 大鼠ASMCs的培養(yǎng)
        1.2.2 基于RTCA篩選大鼠ASMCs接種密度
        1.2.3 監(jiān)測(cè)不同濃度組胺對(duì)大鼠ASMCs收縮程度的影響
        1.2.4 監(jiān)測(cè)不同濃度特布他林舒張大鼠ASMCs程度
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 大鼠ASMCs最適接種密度
    2.2 利用組胺進(jìn)行大鼠ASMCs收縮效應(yīng)檢測(cè)
    2.3 利用特布他林進(jìn)行大鼠ASMCs舒張效應(yīng)檢測(cè)
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]實(shí)時(shí)無(wú)標(biāo)記腫瘤細(xì)胞凋亡篩選技術(shù)體系的建立[J]. 李艷偉,宋興輝,王佳佳,劉麗,黃瑩瑩,郭春.  生物技術(shù)通報(bào). 2019(10)
[2]利用實(shí)時(shí)細(xì)胞分析系統(tǒng)檢測(cè)人和大鼠氣道平滑肌細(xì)胞倍增時(shí)間的研究[J]. 王文倩,王宇,徐玉東,楊永清,尹磊淼.  現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志. 2015 (03)
[3]運(yùn)用實(shí)時(shí)細(xì)胞分析系統(tǒng)監(jiān)測(cè)原代乳鼠心肌細(xì)胞的生長(zhǎng)及搏動(dòng)評(píng)價(jià)抗心律失常藥物[J]. 王淑顏,汪溪潔,靳康,惠濤濤,馬璟.  中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志. 2014(06)
[4]一氧化氮對(duì)被動(dòng)致敏人氣道平滑肌細(xì)胞鉀通道的作用[J]. 葉濤,徐永健,張珍祥,劉先勝,楊朝,曹勇,李亞清.  中華結(jié)核和呼吸雜志. 2006(04)



本文編號(hào)：3686048