發(fā)布時(shí)間：2022-02-15 18:24

　　目的:通過對(duì)哮喘模型小鼠鼻腔免疫標(biāo)準(zhǔn)化粉塵螨疫苗進(jìn)行治療,探討標(biāo)準(zhǔn)化粉塵螨疫苗對(duì)粉塵螨變應(yīng)原誘導(dǎo)的變態(tài)反應(yīng)性氣道炎癥的免疫保護(hù)作用,探討標(biāo)準(zhǔn)化粉塵螨疫苗在支氣管哮喘抗原特異性免疫治療中的機(jī)制。方法:1、21只4～6周齡SPF級(jí)Balb/c小鼠分成正常對(duì)照組、哮喘模型組、標(biāo)準(zhǔn)化粉塵螨疫苗治療組。正常對(duì)照組不做處理。用粉塵螨變應(yīng)原提取液誘發(fā)哮喘制作哮喘小鼠模型,哮喘小鼠模型制作成功后用標(biāo)準(zhǔn)化粉塵螨疫苗（400μg）在小鼠麻醉狀態(tài)下行鼻腔免疫,連續(xù)免疫8次,每次間隔1天,免疫結(jié)束1周以后,用50μg/50μl Der f變應(yīng)原滴鼻激發(fā),每天1次,連續(xù)7次。2、各組小鼠氣管插管進(jìn)行支氣管肺泡灌洗,觀察支氣管肺泡灌洗液（BALF）中細(xì)胞總數(shù)和細(xì)胞分類;各組小鼠取肺組織,通過HE染色（haematoxylin and eosin）觀察小鼠肺部炎癥變化。3、各組小鼠用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)血清中IgE、IgA和IgG2a抗體;檢測(cè)肺泡灌洗液中IL-10、IL-4和IFN-γ水平;同時(shí)檢測(cè)脾細(xì)胞在變應(yīng)原特異刺激下分泌的IL-10、IL-4和IFN-γ水平。4、各組小鼠用MTT法檢測(cè)脾淋巴細(xì)... 

【文章來源】：南昌大學(xué)江西省211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：37 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

肺組織HE染色（×200）

3.9 流式細(xì)胞儀檢測(cè)CD4+CD25+Foxp3調(diào)節(jié)性T細(xì)胞數(shù)量用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)化粉塵螨疫苗鼻腔免疫治療對(duì)脾細(xì)胞中調(diào)節(jié)性 T 細(xì)胞數(shù)量的影響。結(jié)果顯示，各組脾細(xì)胞 CD4+CD25+FOXP3+調(diào)節(jié)性 T 細(xì)胞占 CD4+CD25+淋巴細(xì)胞的百分比，分別為正常組 37.31±5.488，模型組 16.273±4.354，疫苗治療組 32.09±4.503。模型組中調(diào)節(jié)性 T 細(xì)胞數(shù)量比正常對(duì)照組顯著減少，而與模型組相比，標(biāo)準(zhǔn)化粉塵螨疫苗組能明顯誘導(dǎo)調(diào)節(jié)性 T 細(xì)胞數(shù)量增加（P<0.01）（圖 3.7）。上述結(jié)果提示，標(biāo)準(zhǔn)化粉塵螨疫苗鼻腔免疫能抑制 Der f變應(yīng)原誘導(dǎo)的氣道高反應(yīng)和氣道炎癥，其機(jī)理與調(diào)節(jié)性 T 細(xì)胞的誘導(dǎo)有關(guān)。

清和肺泡灌洗液中的細(xì)胞因子IL-4受到了顯著抑制，提示Th2反應(yīng)受到了。氣道高反應(yīng)性、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)和特異性IgE抗體水平下降與支氣管肺泡中IL-10水平增加有關(guān)。炎性細(xì)胞因子IL-4的下降與調(diào)節(jié)性T細(xì)胞和耐受粘膜耐受可能是鼻腔免疫治療的機(jī)制之一。在免疫耐受中起重要作用CD25+FoxP3調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(regulatory T cells,Treg),在標(biāo)準(zhǔn)化粉塵螨疫免疫治療后CD4+CD25+FoxP3細(xì)胞數(shù)量升高。提示標(biāo)準(zhǔn)化粉塵螨疫苗鼻腔機(jī)制與誘導(dǎo)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞和免疫無能而形成耐受有關(guān)。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3627106