目的：探討氨茶堿（aminophylline）對體外培養(yǎng)的大鼠氣道平滑肌細(xì)胞（ASMC）增殖抑制和促凋亡作用及其與基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）、c-fos的關(guān)系，在細(xì)胞和分子水平為氨茶堿治療哮喘提供理論依據(jù)。方法：以含10％胎牛血清（FBS）的DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)大鼠ASMC，第4—6代細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞用不同濃度氨茶堿（0、50、100、200、300、400mg/L）處理，采用細(xì)胞計數(shù)法及MTT法觀察并比較不同濃度氨茶堿對培養(yǎng)細(xì)胞的增殖抑制作用；RT-PCR半定量檢測細(xì)胞c-fos mRNA的表達(dá)；明膠酶譜和Western blot檢測細(xì)胞MMP2、MMP9的活性及表達(dá)：用蘇木精/伊紅（HE）及吖啶橙/溴化乙啶（AO/EB）染色，光學(xué)顯微鏡和熒光顯微鏡觀察細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)改變，并計算凋亡百分率；用瓊脂糖凝膠電泳分析DNA片斷。 結(jié)果：MTT法及細(xì)胞計數(shù)法觀察到：100mg/L以上濃度氨茶堿對體外培養(yǎng)大鼠ASMC增生具有明顯的抑制作用（p＜0.05），隨著藥物劑量的增大，其抑制作用增強(qiáng)，且呈時間—劑量依賴效應(yīng)。RT-PCR可見各組細(xì)胞均有c-fos表達(dá)，即371bp處電泳區(qū)帶。氨茶堿作... 

【文章來源】：中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)陜西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
縮略詞表
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 大鼠ASMC的培養(yǎng)、鑒定、傳代、凍存
第二部分 氨茶堿對大鼠ASMC的增殖抑制及其與c-fos表達(dá)的關(guān)系
第三部分 氨茶堿對大鼠ASMC的分泌MMPs的影響
第四部分 氨茶堿對體外培養(yǎng)大鼠ASMC的促凋亡作用
小結(jié)
文獻(xiàn)回顧
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]哮喘的新概念和免疫學(xué)研究進(jìn)展[J]. 李明華.  浙江中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2003(11)
[2]5-氟脲嘧啶和賴諾普利誘導(dǎo)合成型平滑肌凋亡及c-fos、c-myc、p53基因表達(dá)的研究[J]. 冷靜,姚玉宇,尹航,黃峻,彭韜.  南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2001(05)



本文編號：3535138