目的建立原位肝移植手術(shù)急性肺損傷的動(dòng)物模型,并初步探討肝移植所致成年大鼠急性肺損傷炎癥反應(yīng)的相關(guān)機(jī)制;觀察綠茶多酚對(duì)大鼠原位肝移植術(shù)后急性肺損傷的影響。方法（1）建立成年大鼠原位肝移植術(shù)后急性肺損傷模型:健康雄性SD大鼠72只,隨機(jī)分為兩組:對(duì)照組（8只）和肝移植組（32對(duì)64只）。對(duì)照組進(jìn)行麻醉和開(kāi)腹手術(shù),肝移植組進(jìn)行肝移植手術(shù),分別于手術(shù)完成后1h、4h、8h和12h處死大鼠。觀察各組大鼠動(dòng)脈血?dú)庾兓?計(jì)算氧合指數(shù)（PaO₂/FiO₂）,測(cè)定肺系數(shù)、肺濕/干值、支氣管肺泡灌洗液（BALF）中白細(xì)胞（WBC）、中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)和總蛋白含量,HE染色觀察肺組織病理學(xué)改變,BALF和血清中TNF-α,IL-1β、IL-8含量,肺組織和血清中MDA、SOD水平以及肺組織MPO水平。免疫組化法檢測(cè)NF-κB蛋白的表達(dá)情況,以及WesternBlotting法檢測(cè)各組肺組織TNF-α和IL-1β的表達(dá)情況。（2）應(yīng)用第一部分建立的肺損傷模型,選取健康雄性SD大鼠40只,隨機(jī)分為三組:對(duì)照組（8只）、肝移植組（8對(duì)）和綠茶多酚組（8對(duì)）,對(duì)照組進(jìn)行麻醉和... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院北京市

【文章頁(yè)數(shù)】：93 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

TNF一a檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖15工L一lp檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)曲線F中IL一8含量的測(cè)定用放射免疫分析(班A)方法，放免試劑盒購(gòu)自中國(guó)人民解放軍發(fā)中心放免研究所，嚴(yán)格按說(shuō)明操作。本實(shí)驗(yàn)采用平衡法，取編號(hào)，按表6步驟操作。表6IL一SRIA檢測(cè)加樣程序(閃)試劑NSB5051一55樣品緩沖液IL一8標(biāo)準(zhǔn)待測(cè)樣品125IL一8200100一一一一100一_一一100100100100100

圖16IL一8檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)曲線P65免疫組化檢測(cè)肺中葉用10%甲醛固定，常規(guī)切片。采用SABC免疫組化法染完成后干燥、封片，普通光鏡下觀察。一忍P65免疫組化方法:S妞C法(具體步驟如下)1)切片:將小鼠肺組織石蠟塊連續(xù)切片，厚度為sum。2)切片脫蠟:二甲苯常規(guī)脫蠟2次，每次10min。脫蠟后切片，90%，80%，70%乙醇中各smin，PBS漂洗2次，每次smin。)每張切片滴加0.3%H20250川，室溫下孵育10min，以滅活酶，PBS漂洗3次，每次smin。4)熱修復(fù)抗原:

【參考文獻(xiàn)】：
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