發(fā)布時(shí)間：2021-11-01 10:04

　　研究背景及意義:支氣管哮喘（簡稱哮喘）是一種嚴(yán)重危害人類健康的慢性呼吸道疾病,以氣道非特異性炎癥、氣道反應(yīng)性增高及氣道重建為主要特征。哮喘的發(fā)生與發(fā)展受多種基因的調(diào)控,從而決定淋巴細(xì)胞亞型,免疫反應(yīng)性,嗜酸粒細(xì)胞（Eosinophils,EOS）及肥大細(xì)胞的遷移、活化、細(xì)胞因子合成、粘附分子表達(dá)及組織修復(fù)過程。盡管哮喘基礎(chǔ)研究取得較大的進(jìn)步,哮喘的治療更多的還是依賴于糖皮質(zhì)激素、β₂腎上腺素受體激動劑等幾類藥物。評估哮喘的指標(biāo)仍以肺功能指標(biāo)、呼出氣一氧化氮及誘導(dǎo)痰EOS為主,因此哮喘臨床診治策略仍有待進(jìn)一步完善。EOS與哮喘氣道炎癥、免疫調(diào)控、上皮細(xì)胞損傷、上皮下基質(zhì)沉積、氣道阻塞及肺功能下降等密切相關(guān)。臨床研究也顯示誘導(dǎo)痰EOS可作為哮喘臨床控制的有效指標(biāo)。2006年全球哮喘防治創(chuàng)議（Global Initiative for Asthma,GINA）明確指出:EOS可能在哮喘氣道重建過程中發(fā)揮重要作用,而氣道重建很可能是未來哮喘治療的新靶點(diǎn)。足夠證據(jù)表明EOS活化在哮喘發(fā)生發(fā)展中起重要作用,但其活化具體機(jī)制尚未完全闡明。近年來也有多項(xiàng)研究觀察到了EOS某些基因... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：89 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

SSH示意圖

實(shí)驗(yàn)結(jié)果、EOS分離結(jié)果經(jīng)全自動全血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀分析及EOS瑞氏一姬姆染色(圖1一3)，示，治療前EOS約為7、106個，純度為>95%;治療后EOS總數(shù)度>95%;臺盼藍(lán)活力鑒定均大于99%。顯微鏡計(jì)數(shù)8xl05個，純圖1一3:EOS瑞士一姬姆薩染色，400xFig.l一3:Wrigt一 GiemsastainingofEOS400x二、總RNA電泳結(jié)果分析圖卜4:總RNA電泳圖l:代表Drive:總RNA;2代表Teste;總RNAFig.I一 4Elee

三、 supersMA盯 enNAsynthesisds一enNA合成結(jié)果取20ng總RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，然后對第一鏈進(jìn)行純化，并行LD一PcR擴(kuò)增雙鏈DNA，從圖1一5可以看出，tester在27個循環(huán)達(dá)平臺期，drive:組在30個循環(huán)達(dá)平臺期。擴(kuò)增出的EOSds一cDNA均呈Smear擴(kuò)增，cDNA擴(kuò)增完整，質(zhì)量較好。圖1一5:cDNA第二鏈擴(kuò)增結(jié)果泳道 M:l000bpDNAmarker:泳道分別代表15，18，21，2427


本文編號：3469971