目的：目前特發(fā)性肺纖維化發(fā)病機(jī)制仍不明確,缺乏有效治療方法。有關(guān)肺纖維化發(fā)生過(guò)程中基因改變的相關(guān)研究逐漸增多,并通過(guò)相關(guān)基因的研究以尋找新的分子治療靶點(diǎn)。長(zhǎng)鏈非編碼RNA作為一類新的非編碼RNA,其調(diào)控機(jī)制及與疾病的關(guān)系已成為研究熱點(diǎn)。本研究通過(guò)觀察博萊霉素誘導(dǎo)的大鼠肺纖維化模型中l(wèi)ncRNA表達(dá)譜的變化,分析lncRNA的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)、與：mRNA的位置序列關(guān)系,最終選擇lncRNA-MRAK088388以及MRAK081523作為進(jìn)一步研究對(duì)象,探索其在肺纖維化發(fā)生中的調(diào)控機(jī)制。方法：Sprague-Dawley大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組及模型組,通過(guò)氣管內(nèi)注入BLM法建立肺纖維化動(dòng)物模型,于28 d時(shí)處死大鼠留取肺組織,部分置于液氮冷凍,其余組織進(jìn)行常規(guī)固定-石蠟包埋及戊二醛固定-環(huán)氧樹(shù)脂包埋處理。Masson染色和羥脯氨酸堿水解法檢測(cè)肺內(nèi)膠原含量的變化,透射電子顯微術(shù)觀察肺組織超微結(jié)構(gòu)改變；利用lncRNA芯片技術(shù)檢測(cè)對(duì)照組及模型組肺組織lncRNAs和mRNAs表達(dá)譜的改變,進(jìn)行GO分析及pathway分析,通過(guò)NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)、UCSC數(shù)據(jù)庫(kù)等對(duì)lncRNA進(jìn)行生物信息學(xué)分析；篩選差異表... 

【文章來(lái)源】：濱州醫(yī)學(xué)院山東省

【文章頁(yè)數(shù)】：76 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．博萊霉素誘導(dǎo)的肺纖維化模型鑒定（Ａ）正常組肺組織超微結(jié)構(gòu)：肺泡上皮??細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)完整，肺間隔寬度正常，含少量膠原纖維

為探索ＩｎｃＲＮＡ在肺纖維化的潛在生物學(xué)功能，我們通過(guò)基因芯片方法檢測(cè)??了在博萊霉素誘導(dǎo)的肺纖維化中ＩｎｃＲＮＡ表達(dá)譜，此外巧片結(jié)果還包含了?ｍＲＮＡ??表達(dá)譜。散點(diǎn)圖及聚類分析（圖２）直觀顯示了?ＩｎｃＲＮＡｓ和ｍＲＮＡｓ在不用樣本??中的轉(zhuǎn)錄表達(dá)情況。原始數(shù)據(jù)經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)化等處理后，根據(jù)倍數(shù)變化篩選出差異表達(dá)??２１??

根據(jù)ＩｎｃＲＮＡ的差異表達(dá)倍數(shù)，我們選擇了在模型組中上調(diào)表達(dá)較明顯的??ＡＪ００５３９６和Ｓ６９２０６?（表１Ａ）進(jìn)行原位雜交實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)它們?cè)诜谓M織的表達(dá)變??化及細(xì)胞定位，藍(lán)紫色代表基因的陽(yáng)性表達(dá)區(qū)域。結(jié)果如圖３所示，模型組中??ＡＪ００５３９６和Ｓ６９２０６的表這均較對(duì)照組明顯增加，與巧片表達(dá)趨勢(shì)一致。同時(shí)可??觀察到ＡＪ００５３％和％９２０６主要位于肺間質(zhì)細(xì)胞的胞質(zhì)中


本文編號(hào)：3467993