目的:肺纖維化（pulmonary fibrosis,PF）是一種由遺傳因素、環(huán)境因素、衰老因素和表觀遺傳等相互作用導(dǎo)致肺泡上皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞發(fā)生深刻變化的疾病,病死率高,無有效的治療藥物。項(xiàng)目組前期藥理活性篩選發(fā)現(xiàn)黃芪中的芒柄花素（Formononetin,FM）和丹參中的丹參素（Danshensu,DS）具有明顯抗肺纖維化的作用。但是芒柄花素水溶性差、生物利用度低、顯效慢;而丹參素化學(xué)穩(wěn)定性差,易氧化、變色,從而限制了它們?cè)谂R床上的應(yīng)用。因此項(xiàng)目組運(yùn)用天然產(chǎn)物化學(xué)技術(shù)制備得到新的化合物命名為芒柄花素-7-丹酚酸酯（簡稱FS）,經(jīng)合成后其穩(wěn)定性及藥理活性明顯優(yōu)于單體。其作用機(jī)制可能與抑制肺肌成纖維細(xì)胞的分化、增殖和遷移相關(guān)。研究肺纖維化發(fā)生的分子機(jī)制中發(fā)現(xiàn)長鏈非編碼能夠參與調(diào)控肌成纖維細(xì)胞。本項(xiàng)目擬研究FS的抗肺纖維化作用及其調(diào)控機(jī)制,將FS開發(fā)為治療肺纖維化的新藥物;同時(shí)為發(fā)掘lncITPF作為肺纖維化新的基因治療靶點(diǎn)提供理論和實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的支持,具有重大的臨床應(yīng)用價(jià)值。方法:運(yùn)用天然產(chǎn)物化學(xué)技術(shù)制備得到新的化合物命名為芒柄花素-7-丹酚酸酯（簡稱FS）。采用正辛醇-水分配體系對(duì)其進(jìn)... 

【文章來源】：濱州醫(yī)學(xué)院山東省

【文章頁數(shù)】：89 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

芒柄花素一7一丹酚酸酷(FS)

Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ分析表明，與ＴＧＦ－Ｐ１相比，芒柄花素，丹參素，芒柄花素??＋丹參素和ＦＳ均能增加Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ的表達(dá)水平，降低ｖｉｍｅｎｔｉｎ、ａ－ＳＭＡ和Ｓｎａｉｌ??的表達(dá)水平，且ＦＳ的作用是最顯著的（圖３－３Ａ）。為了驗(yàn)證這一結(jié)論，我們分析??了?Ｌ９２９細(xì)胞中膠原纖維形成的生理指標(biāo)。芒柄花素，丹參素，芒柄花素＋丹參素??和ＦＳ能夠降低Ｌ９２９細(xì)胞中膠原蛋白Ｉ型和ＩＩＩ型，波形蛋白和ａ－ＳＭＡ的表達(dá)水??平。這些發(fā)現(xiàn)與Ａ５４９細(xì)胞中檢測(cè)結(jié)果一致（圖３－３Ａ）。肺纖維化過程中另一常??見現(xiàn)象是細(xì)胞形狀從不規(guī)則形狀轉(zhuǎn)變?yōu)殚L梭形。免疫熒光分析顯示ＦＳ可以預(yù)防這??種現(xiàn)象的發(fā)生（圖３－３Ｂ）。??Ａ?Ａ５４９?Ｂ?Ｌ９２９??１００－１?１００－??ｇ?８。＿?麵?！?８０－?．．??Ｉ?６０－?ｒ＾－｜?Ｈ｜?１?６０－??４０－?４０－??ＩＩ?ｍｉｌ?ＩＩ?１１?ｅｌｌ，１１??０?２．５?５?１０?２０?０?２．５?５?１０?２０??ＦＳ（?ｐｇ／ｍｌ）?ＦＳ（?ｐｇ／ｍｌ）??圖３－１．?ＦＳ有效濃度的篩選。首先將細(xì)胞用５？ｇ／ｍＬＴＧＦ－ｐ丨給藥７２小時(shí)，然后用０，２．５，５，１０，２０??狀／ｍＬ?ＦＳ共同處理４８小時(shí)。與僅用ＴＧＦ－ｐ丨處理的細(xì)胞相比，Ａ５４９?（Ａ）和Ｌ９２９?（Ｂ）細(xì)胞中??最明顯的抑制作用為１０／／ｇ／ｍＬＦＳ。每個(gè)條形柱代表平均值土ＳＤ

Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ分析表明，與ＴＧＦ－Ｐ１相比，芒柄花素，丹參素，芒柄花素??＋丹參素和ＦＳ均能增加Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ的表達(dá)水平，降低ｖｉｍｅｎｔｉｎ、ａ－ＳＭＡ和Ｓｎａｉｌ??的表達(dá)水平，且ＦＳ的作用是最顯著的（圖３－３Ａ）。為了驗(yàn)證這一結(jié)論，我們分析??了?Ｌ９２９細(xì)胞中膠原纖維形成的生理指標(biāo)。芒柄花素，丹參素，芒柄花素＋丹參素??和ＦＳ能夠降低Ｌ９２９細(xì)胞中膠原蛋白Ｉ型和ＩＩＩ型，波形蛋白和ａ－ＳＭＡ的表達(dá)水??平。這些發(fā)現(xiàn)與Ａ５４９細(xì)胞中檢測(cè)結(jié)果一致（圖３－３Ａ）。肺纖維化過程中另一常??見現(xiàn)象是細(xì)胞形狀從不規(guī)則形狀轉(zhuǎn)變?yōu)殚L梭形。免疫熒光分析顯示ＦＳ可以預(yù)防這??種現(xiàn)象的發(fā)生（圖３－３Ｂ）。??Ａ?Ａ５４９?Ｂ?Ｌ９２９??１００－１?１００－??ｇ?８。＿?麵?！?８０－?．．??Ｉ?６０－?ｒ＾－｜?Ｈ｜?１?６０－??４０－?４０－??ＩＩ?ｍｉｌ?ＩＩ?１１?ｅｌｌ，１１??０?２．５?５?１０?２０?０?２．５?５?１０?２０??ＦＳ（?ｐｇ／ｍｌ）?ＦＳ（?ｐｇ／ｍｌ）??圖３－１．?ＦＳ有效濃度的篩選。首先將細(xì)胞用５？ｇ／ｍＬＴＧＦ－ｐ丨給藥７２小時(shí)，然后用０，２．５，５，１０，２０??狀／ｍＬ?ＦＳ共同處理４８小時(shí)。與僅用ＴＧＦ－ｐ丨處理的細(xì)胞相比，Ａ５４９?（Ａ）和Ｌ９２９?（Ｂ）細(xì)胞中??最明顯的抑制作用為１０／／ｇ／ｍＬＦＳ。每個(gè)條形柱代表平均值土ＳＤ


本文編號(hào)：3394201