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HR通過MMP-9/p38信號通路減少小鼠模型痰液和黏蛋白MUC5AC表達

發(fā)布時間:2021-08-06 16:48
  [目的]急性支氣管炎、慢性阻塞性肺疾病與支氣管哮喘是常見的呼吸系統(tǒng)疾病,這些疾病常表現(xiàn)為咳嗽、痰多、喘息等癥狀。HR是一個復方制劑,臨床應(yīng)用證明它是一個很有效的鎮(zhèn)咳祛痰藥物,藥效學研究提示它有很強的鎮(zhèn)咳作用,但它是否有祛痰作用及其作用機制尚不清楚,本文重點研究它在祛痰方面的作用及其機制。[方法]1.首先采用常規(guī)的簡易祛痰模型小鼠氣道酚紅排泄試驗,評價HR是否具有祛痰作用。2.建立內(nèi)毒素脂多糖(LPS)誘導誘導的小鼠急性氣管炎模型:模型建立后,①氣道內(nèi)滴入碳墨,評價HR對模型小鼠氣道碳墨的清除能力;②采用咔唑比色法測定灌洗液中的黏多糖,評價HR能否減少模型小鼠氣道黏液黏多糖含量;③采用real-time PCR法測定肺組織中MUC5AC mRNA的表達和ELISA法檢測灌洗液中的MUC5AC的蛋白含量,觀察HR對黏蛋白MUC5AC mRNA表達與蛋白水平的影響。3.建立卵白蛋白(OVA)誘導的小鼠哮喘模型:模型建立后,①取肺進行病理切片,PAS染色,觀察HR對黏液分泌細胞氣道杯狀細胞增生的影響;②采用real-time PCR法測定肺組織中MUC5AC mRNA的表達,觀察HR對黏蛋白M... 

【文章來源】:揚州大學江蘇省

【文章頁數(shù)】:67 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
符號說明
前言
1. 實驗材料
    1.1 實驗動物
    1.2 實驗儀器
    1.3 實驗試劑
2. 實驗方法
    2.1 藥物配制
    2.2 墨汁配備
    2.3 小鼠氣道酚紅排泄試驗
    2.4 LPS誘導的小鼠急性氣管炎模型
        2.4.1 HR對LPS誘導的小鼠急性氣管炎模型氣道黏膜纖毛清除功能的影響
        2.4.2 HR對LPS誘導的小鼠急性氣管炎模型黏液黏多糖分泌、MUC5ACmRNA與蛋白表達的影響
    2.5 OVA致敏的小鼠哮喘模型
    2.6 吸煙誘導的小鼠急性氣管炎模型
        2.6.1 HR對吸煙誘導的小鼠急性氣管炎模型氣道黏膜纖毛清除功能的影響
        2.6.2 HR對吸煙誘導的小鼠急性氣管炎模型黏液黏多糖分泌、MUC5ACmRNA與蛋白以及相關(guān)蛋白表達的影響
    2.7 咔唑比色法測定BALF中黏液黏多糖含量
    2.8 ELISA法檢測BALF中MUC5AC蛋白含量
    2.9 肺組織總RNA提取與逆轉(zhuǎn)錄
    2.10 小鼠肺組織石蠟包埋切片
    2.11 過碘酸—Schiff氏(PAS)染色
    2.12 SABC免疫組化
3. 統(tǒng)計學
4. 實驗結(jié)果
    4.1 墨汁中碳粒直徑
    4.2 HR對小鼠氣道酚紅排泄的促進作用
    4.3 HR增強LPS誘導的小鼠氣管炎模型氣道黏膜纖毛清除能力
    4.4 HR抑制LPS誘導的小鼠急性氣管炎模型BALF中黏液黏多糖分泌
    4.5 HR抑制LPS誘導的小鼠急性氣管炎模型BALF中MUC5AC的表達
    4.6 HR抑制LPS誘導的小鼠急性氣管炎模型肺組織MUC5AC mRNA表達
    4.7 HR抑制OVA致敏的小鼠哮喘模型肺組織中杯狀細胞增生
    4.8 HR抑制OVA致敏的小鼠哮喘模型肺組織MUC5AC mRNA的表達
    4.9 HR增強吸煙誘導的小鼠急性氣管炎模型氣道黏膜纖毛清除能力
    4.10 HR抑制吸煙誘導的小鼠急性氣管炎模型氣道黏液黏多糖分泌
    4.11 HR抑制吸煙誘導的小鼠急性氣管炎模型MUC5AC的蛋白表達
    4.12 HR抑制吸煙誘導的小鼠急性氣管炎模型MUC5AC mRNA表達
    4.13 HR抑制吸煙誘導的小鼠急性氣管炎模型MMP-9與p-p38蛋白表達
討論與小結(jié)
結(jié)論
參考文獻
綜述
    參考文獻
致謝


【參考文獻】:
期刊論文
[1]MUC5AC EXPRESSION UP-REGULATION GOBLET CELL HYPERPLASIA IN THE AIRWAY OF PATIENTS WITH CHRONIC OBSTRUCTIVE PULMONARY DISEASE[J]. Rui Ma1*, Ying Wang2, Gang Cheng3, Hui-zhen Zhang2, Huan-ying Wan1, and Shao-guang Huang1 1Department of Respiratory, Ruijin Hospital, Shanghai Second Medical University, Shanghai 200025 2Institute of Immunology, Shanghai Second Medical Universitry, Shanghai 200025 3Department of Pathology, Chest Hospital, Shanghai 200030.  Chinese Medical Sciences Journal. 2005(03)
[2]杯狀細胞的研究進展[J]. 史玉蘭,段相林.  解剖科學進展. 2001(04)



本文編號:3326132

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