目的：（1）建立一種骨髓間充質干細胞（Bone marrow mesenchymal stemcells, MSCs）的體外分離純化、擴增的方法，探討MSCs向平滑肌細胞誘導分化的可行性。（2）體外探討CXCR4/CXCR7在SDF-1誘導MSCs增殖和遷移中的作用及與磷脂酰肌醇3激酶（Phosphoinositide3-kinase, PI3K）/核因子-κB（Nuclear factor kappa B，NF-κB）信號通路的關系，為后期整體動物實驗提供實驗依據(jù)。方法：（1）全骨髓培養(yǎng)法分離培養(yǎng)、鑒定MSCs，利用血小板源性生長因子-BB（Platelet-derived growth factor-BB,PDGF-BB）和轉化生長因子β1（Transforming growth factor-β1,TGF-β1）進行聯(lián)合誘導，誘導期間觀察細胞形態(tài)變化，逆轉錄-聚合酶鏈反應（RT-PCR）檢測平滑肌細胞特異性標記α-平滑肌肌動蛋白（α-smooth muscle actin, α-SMA）、鈣調蛋白（calponin）、平滑肌鈣結合相關蛋白（smooth muscle22α, SM... 

【文章來源】：桂林醫(yī)學院廣西壯族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

大鼠骨髓間充質干細胞細胞形態(tài)學觀察×200AB

圖 2 大鼠骨髓間充質干細胞表面標志物表達Fig2 Surface marker expression of rat bone marrow mesenchymal stem cellsA：FITC-isotype；B：FITC-CD11b；C：FITC-CD44；D：PE-isotype；E：PE-CD45；F：PE-CD1062.2.2 MSCs 體外多向分化潛能MSCs 成骨誘導 4 周行茜素紅染色，鏡下可見橘紅色鈣結節(jié)；成脂誘導 2周行油紅 O 染色，鏡下可見橘紅色脂滴，見圖 3。A B

4 誘導后的骨髓間充質干細胞呈“峰-谷”狀 Bone marrow mesenchymal stem cells showed “peshape after induced by PDGF-BB and TGF-β1for 1 a-SMA、SM22a、Calponin 和 SM-示：經(jīng) PDGF-BB 和 TGF-β1聯(lián)合誘細胞表型標記物 a-SMA、SM22a、，見圖 5 和表 1。和未誘導組 a-SMA、SM22a、Calponin 和 SM-MH of mRNA expression of a-SMA、SM22a et al in tha-SMA/GAPDH SM22a/GAPDH Calponi0.4411±0.08710.8744±0.1104*0.4633±0.10741.0333±0.2062*0.10670.4611

【參考文獻】：
期刊論文
[1]CXCR7/SDF-1對肝癌細胞HepG2增殖、遷移和黏附作用的影響[J]. 王靈巧,蔡紹皙,戴小珍.  生命科學研究. 2010(02)
[2]不同檢測體系下骨髓源間充質干細胞遷移特征的比較[J]. 王新均,唐俊明,孔霞,郭凌鄖,楊建業(yè),鄭飛,陳龍,黃永章,王家寧.  中國實驗血液學雜志. 2009(02)
[3]骨髓間充質干細胞對哮喘小鼠CD4+CD25+調節(jié)性T細胞及氣道炎癥的影響[J]. 李建國,顓孫永勛,冉丕鑫,張煒,莫曉能,吳浩,李依群.  中國組織工程研究與臨床康復. 2008(47)
[4]氣道上皮損傷對上皮下成纖維細胞轉分化的影響及其在支氣管哮喘氣道高反應發(fā)生中的地位[J]. 陳興無,徐軍.  中華結核和呼吸雜志. 2005(10)



本文編號：3309881